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.2014年9月16日；9（9）：e107635。
doi:10.1371/journal.pone.0107635。 2014年电子收集。

内质网应激诱导人类扩张型和缺血性心肌病不同分子结构的改变

安娜·奥尔特加 1, 埃丝特·罗斯洛-莱蒂 1, Estefanía Tarazón 1, 玛丽亚·米凯拉·莫里娜·纳瓦罗 1, 路易斯·马丁内斯·多尔兹 2, 何塞·拉蒙·冈萨雷斯·胡安纳蒂 3, 弗朗西斯卡·拉戈 3, 何塞·戴维·蒙托罗·马特奥斯 1, 安东尼奥·萨尔瓦多 2, 米格尔·里维拉 1, 曼努埃尔·波尔特斯 1
附属公司

内质网应激诱导人类扩张型和缺血性心肌病不同分子结构的改变

安娜·奥尔特加等。 公共科学图书馆一号. .

摘要

背景：内质网（ER）是一种多功能细胞器，负责蛋白质的合成和折叠以及信号传递和钙储存，与收缩-松弛过程有关。对其体内平衡的扰动会激活诸如心力衰竭（HF）等疾病的应激反应。为了阐明内质网分子成分的变化，我们分析了扩张型心肌病和缺血性心肌病的内质网应激和结构蛋白水平，及其与患者功能状态的关系。

方法和结果：我们检查了52颗DCM（n=21）和ICM（n=21）受试者的移植人类心脏和10颗未衰竭的心脏作为对照。我们的结果显示了应激（IRE1，p<0.05；p-IRE1（p<0.05））和结构（网状结构1，p<0.01）蛋白质水平的具体变化。应激蛋白GRP78、XBP1和ATF6以及结构蛋白RRBP1、激动素和Nogo A和B在DCM和ICM患者中均上调。免疫荧光结果与定量Western blot水平一致。此外，我们还展示了应激与结构蛋白之间的新关系。参与前胶原合成和重塑的RRBP1与左心室功能相关。

结论：在本研究中，我们报道了内质网应激反应和形成蛋白的变化。我们在一个合适的DCM和ICM受试者样本中显示了内质网应激对内质网结构的可能影响。RRBP1值较高的患者左心室功能较差。

PubMed免责声明

利益冲突声明

竞争利益：提交人声明，不存在相互竞争的利益。

数字

图1
图1。扩张型（DCM）和缺血性（ICM）心肌病和对照组（CNT）内质网应激蛋白的蛋白表达水平。
(A类)肌醇需要蛋白-1（IRE1）。(B类)肌醇需要蛋白-1磷酸化（p-IRE1）(C类)葡萄糖相关蛋白78（GRP78）。(D类)X盒结合蛋白1（XBP1）。(E类)激活转录因子6（ATF6）(F类)激活转录因子4（ATF4）。这些值被归一化为GAPDH，最后归一化到CNT组。CNT组中的值设置为100。数据表示为六个独立实验的平均值±光学密度平均值（SEM）的标准误差，任意单位（AU）*第页<0.05, **第页<0.01与。CNT组。
图2
图2。扩张型心肌病（DCM）、缺血性心肌病（ICM）和对照组（CNT）内质网结构蛋白的蛋白质印迹分析。
(A类)细胞骨架相关蛋白4（CKAP4）。(B类)网状结构1。这些值被归一化为GAPDH，最后归一化到CNT组。CNT组中的值设置为100。数据表示为两个独立实验的光学密度平均值（SEM）的平均值±标准误差，任意单位（AU）*第页<0.01与。CNT组#第页<0.01 DCM与。ICM组。
图3
图3。Western blot和免疫荧光研究根据心力衰竭病因对人左心室心肌细胞中一些内质网结构蛋白的细胞分布进行了研究，并与对照组（CNT）进行了比较。
(A类)核糖体受体结合蛋白（RRBP1）水平。(B类)RRBP1蛋白的免疫荧光。(C类)运动蛋白水平。(D类)激动素的免疫荧光。这些值被归一化为GAPDH，最后归一化到CNT组。CNT组中的值设置为100。数据表示为两个独立实验的光学密度平均值（SEM）的平均值±标准误差，任意单位（AU）*第页<0.05, **第页<0.01***第页<0.001与。CNT组。棒材代表10µm。
图4
图4。根据心力衰竭病因对Nogo A和B进行Western blot和免疫荧光研究，并与对照组（CNT）进行比较。
(A类)Nogo A的蛋白质水平(B类)野狗B的蛋白质水平(C类)Nogo A+B的免疫荧光。数值归一化为GAPDH，最后归一化至CNT组。CNT组中的值设置为100。数据表示为两个独立实验的光学密度平均值（SEM）的平均值±标准误差，任意单位（AU）。扩张型心肌病，ICM，缺血性心肌病*第页<0.01, **第页<0.001与。CNT组#第页<0.05 DCM与。ICM组。棒材代表10µm。
图5
图5。扩张型和缺血性心肌病患者心脏RRBP1与射血分数（EF）相关性散点图。
RRBP1的值归一化为GAPDH。
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出版物类型

赠款和资金

这项工作得到了美国国立卫生研究院“卫生研究基金会”的资助。[RETICS 12/0042/0003，FIS项目PI10/00275]。资助者在研究设计、数据收集和分析、决定出版或编写手稿方面没有任何作用。