跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2014年11月；131(3):333-47.
doi:10.1111/jnc.12810。 Epub 2014年8月1日。

慢性氨治疗后星形胶质细胞血小板反应蛋白-1分泌减少会降低突触蛋白水平：体外和体内研究

Arumugam R贾古玛 1, 小Y童, 凯文·柯蒂斯, 罗伯托·鲁伊斯·科尔德罗, Nagarajarao Shamaladevi公司, 米萨·阿布扎梅尔, 约书亚·约翰斯通, 加布里埃尔·盖多什, 卡库拉瓦拉普五世拉玛饶, 迈克尔·D·诺伦伯格
附属公司

慢性氨治疗后星形胶质细胞血小板反应蛋白-1分泌减少会降低突触蛋白水平：体外和体内研究

Arumugam R贾古玛等。 神经化学杂志. 2014年11月.

摘要

慢性肝性脑病（CHE）是严重肝病患者的主要并发症。血氨和脑氨水平升高与该病的发病机制有关，星形胶质细胞是参与该病的主要神经细胞。由于在其他神经系统疾病中，星形细胞因子的合成和释放缺陷会损害突触的完整性，因此我们检测了参与维持突触完整性的星形细胞因子血小板反应蛋白-1（TSP-1）在CHE中是否也发生改变。培养的星形胶质细胞暴露于氨（NH）中₄Cl，0.5-2.5 mM）持续1-10天，并在细胞提取物和培养基中测量TSP-1含量。接触氨的星形胶质细胞表现出细胞内外TSP-1水平的降低。将培养的神经元暴露于氨处理的星形胶质细胞的条件培养液中，突触素、PSD95和突触素水平降低。用氨处理过表达TSP-1的星形胶质细胞的条件培养基，当添加到培养的神经元中时，可以逆转突触蛋白的下降。重组TSP-1同样逆转了突触蛋白的减少。二甲双胍是一种已知能增加其他细胞类型TSP-1合成的药物，也能逆转氨诱导的TSP-1减少。同样，我们发现在CHE大鼠模型中，皮质星形胶质细胞中TSP-1水平显著下降，并且体内突触素含量降低。这些发现表明TSP-1可能是CHE的一个重要治疗靶点。慢性肝性脑病患者星形细胞因子释放缺陷可能损害突触完整性。我们发现氨处理的星形胶质细胞中星形胶质细胞基质细胞蛋白血小板反应蛋白-1（TSP-1）的释放减少；这种减少与氨处理的星形胶质细胞条件培养基引起的突触蛋白减少有关。神经元暴露于氨处理的星形胶质细胞中的CM（TSP-1在其中过度表达）可逆转（约75%）突触蛋白的减少。NF-kB=核因子kappa B；PSD95=突触后密度蛋白95；ONS=氧化/硝化应激。

关键词：氨；星形胶质细胞；慢性肝性脑病；突触蛋白；血小板反应蛋白-1。

PubMed免责声明

利益冲突声明

利益冲突：作者声明没有相互竞争的经济利益。

数字

图1
图1
用0.5–2.5 mM氨（NH）处理培养的星形胶质细胞10天后的细胞外TSP-1水平4Cl）。(A类)氨处理星形胶质细胞细胞培养液中的典型蛋白质印迹显示TSP-1水平显著降低。(B类)氨诱导TSP-1蛋白水平变化的量化*与对照组相比p<0.05。C、 控制；全日空航空公司4+，氨。
图2
图2
用0.5–2.5 mM氨水处理培养的星形胶质细胞10天后，细胞内TSP-1水平。(A类)氨处理星形胶质细胞（1和2.5 mM）的典型蛋白质印迹显示细胞内TSP-1水平显著降低。(B类)NH的量化4Cl诱导TSP-1蛋白的变化。TSP-1水平根据α-微管蛋白标准化。(C类)氨处理后TSP-1 mRNA表达*与对照组相比p<0.05。C、 控制；N、 NH公司4氯。
图3
图3
培养神经元中突触体素、PSD95和突触结合蛋白的水平。(A类)用氨（0.5–2.5 mM）处理10天的星形胶质细胞的典型蛋白质印迹，并将条件培养基（CM）添加到神经元中24小时。这种处理以剂量依赖的方式导致突触素显著减少。(B类)来自氨处理的星形胶质细胞的CM也降低了PSD95和突触素水平(C类). *与对照组相比p<0.05。C、 控件。
图4
图4
重组TSP-1（rTSP-1）对突触素水平的影响。(A类)用氨（1.0 mM）处理10天培养的星形胶质细胞的典型蛋白质印迹，然后将CM与rTSP-1一起添加到培养的神经元中24小时。这样的治疗导致突触素损失的逆转*与对照组相比，p<0.05。†与氨处理（1.0 mM）星形胶质细胞的CM相比，p<0.05。C、 控制；CM，条件培养基。
图5
图5
c-Myc对TSP-1表达的影响。(A类)氨处理星形胶质细胞的典型Western blot显示c-Myc蛋白显著增加。(B类)c-Myc siRNA治疗显著降低c-Myc浓度。(C和D)siRNA对c-Myc的抑制显著增加了细胞内外TSP-1蛋白水平*与对照组相比p<0.05；†与加扰控制相比p<0.05。C、 控制；全日空航空公司4+，氨；Scr，加扰控制（控制siRNA）。
图6
图6
星形细胞c-Myc抑制对神经元突触素水平的影响。(A-C公司)c-Myc-gene沉默的星形胶质细胞，或暴露于c-Myc抑制剂10058-F4，以及氨和CM，然后添加到培养的神经元中（24小时），导致突触素水平轻微降低*与对照组相比p<0.05；†与加扰控制相比p<0.05。C、 控制；全日空航空公司4+，氨；Scr，加扰控制（控制siRNA）；CM，条件培养基。
图7
图7
给予肝毒素硫代乙酰胺（TAA，100 mg/kg）10天后，CHE大鼠大脑皮层星形胶质细胞中TSP-1蛋白水平。(A类)对照脑：胶质纤维酸性蛋白（GFAP，红色，星形胶质细胞）、TSP-1（绿色）和DAPI（蓝色，细胞核）。TSP-1和GFAP的联合定位（合并）图像说明了TSP-1在星形胶质细胞中的富集。(B类)TAA处理的大鼠大脑显示星形细胞TSP-1含量降低。(C类)TSP-1免疫荧光染色的相对定量。比例尺=20µm。(D类). 用TAA治疗大鼠10天后的皮层TSP-1水平。TAA治疗大鼠的典型Western blot显示细胞内TSP-1水平显著降低。(E类)TSP-1免疫印迹定量。*与对照组相比p<0.05。C、 控件。
图8
图8
服用肝毒素硫代乙酰胺（TAA）10天后，CHE大鼠大脑皮层中的突触体素水平。(A类)对照（正常）大脑中的突触体素水平。(B类)与对照动物相比，TAA治疗组大鼠的突触素水平显著降低。(C类)突触素免疫荧光染色的相对定量*与对照组相比p＜0.05。控制。硫代乙酰胺。比例尺=20µm。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

中的注释

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Abbott NJ，Rönnbäck L，Hansson E.血脑屏障处的Astrocyte-endothelial相互作用。神经科学自然评论。2006;7点41分至53分。-公共医学
    1. Alder J，Kanki H，Valtorta F，Greengard P，Poo MM。突触素的过度表达增强了爪蟾神经肌肉突触的神经递质分泌。《神经科学杂志》。1995;15:511–519.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Ampuero J、Ranchal I、Nuñez D、Díaz-Herrero Mdel M、Maraver M、del Campo JA、Rojasá、Camacho I、Figueruela B、Bautista JD、Romero-Gómez M.二甲双胍抑制谷氨酰胺酶活性并预防肝性脑病。公共科学图书馆一号。2012;7:e49279。-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Asch AS，Leung LL，Shapiro J，Nachman RL.人脑胶质细胞合成血小板反应蛋白。程序。国家。阿卡德。科学。美国1986年；83:2904–2908.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. 贝朗格·M，Magistretti PJ。星形胶质细胞在神经保护中的作用。对话。临床。神经科学。2009;11:281–295.-项目管理咨询公司-公共医学

出版物类型