Ras transformation uncouples the kinesin-coordinated cellular nutrient response

doi:10.1073/pnas.1411016111

.2014年7月22日；111(29):10568-73.

doi:10.1073/pnas.1411016111。 Epub 2014年7月7日。

Ras转化解偶联驱动蛋白协调的细胞营养反应

埃尔马·扎甘约尔¹, 劳伦·M·威尔¹, 约书亚·X·冈萨雷斯¹, 约翰·德·明纳², 梅兰妮·科布^三

附属公司

¹药理学和。
²德克萨斯州达拉斯市德克萨斯大学西南医学中心药理学系和哈蒙癌症治疗肿瘤研究中心，邮编75390-9041。
^三药理学和melanie.cobb@utsouthwest.edu。

PMID： 25002494
预防性维修识别码： PMC4115560
内政部： 10.1073/pnas.1411016111

Ras转化解偶联运动蛋白协调的细胞营养反应

埃尔马·扎甘约尔等。美国国家科学院程序. 2014.

.2014年7月22日；111(29):10568-73.

doi:10.1073/pnas.1411016111。 Epub 2014年7月7日。

作者

埃尔马·扎甘约尔¹, 劳伦·M·威尔¹, 约书亚·X·冈萨雷斯¹, 约翰·德·明纳², 梅兰妮·科布^三

附属公司

¹药理学和。
²德克萨斯州达拉斯市德克萨斯大学西南医学中心药理学系和哈蒙癌症治疗肿瘤研究中心，邮编75390-9041。
^三药理学和melanie.cobb@utsouthwestern.edu。

PMID： 25002494
预防性维修识别码： PMC4115560
内政部： 10.1073/pnas.1411016111

摘要

驱动蛋白家族成员（KIFs）KIF2A和KIF2C解聚微管，这与大多数其他驱动蛋白不同，驱动蛋白沿着微管运输货物。KIF2A调节溶酶体在细胞质中的定位，这有助于激活溶酶体表面雷帕霉素复合物1（mTORC1）的机械靶点。我们发现，密切相关的驱动蛋白KIF2C也影响永生化人支气管上皮细胞（HBEC）中的溶酶体组织。未转化和突变K-Ras转化细胞中KIF2C和KIF2A的表达受ERK1/2调节。PD0325901对ERK1/2激活的长时间抑制通过破坏HBEC中溶酶体组织和降低mTORC1活性来模拟营养剥夺，这表明ERK1/2优化mTORC2活性的长期机制。我们验证了ERK1/2上调KIF2C和KIF2A导致突变K-Ras依赖性癌症和癌症模型中溶酶体定位和mTORC1活性异常的假设。然而，在Ras转化细胞中，mTORC1活性和溶酶体组织似乎独立于ERK1/2和这些驱动蛋白，尽管ERK1/2活性和驱动蛋白是Ras依赖性增殖和迁移所必需的。我们得出结论，突变K-Ras重新利用这些信号和调节蛋白来支持转化的表型。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明没有利益冲突。

数字

**图1。**
KIF2C影响HBEC3KT细胞中的溶酶体组织和mTORC1活性。(A类)用对照或KIF2C siRNA处理HBEC3KT细胞两次，间隔48小时，共96小时。然后将细胞饥饿90分钟，并用氨基酸（每种氨基酸的组合包含在我-无谷氨酰胺DMEM加0.5 mM我-谷氨酰胺）作用30分钟。细胞共免疫内源性mTOR（红色）和内源性LAMP2（绿色）。(B类)图1中的八位灰度图像A类在阈值化后进行分析，通过获得mTOR染色与全细胞面积的比值，测量氨基酸再刺激后mTOR定位的面积。(C类)如上所述，用对照、KIF2C或KIF2A siRNA饥饿处理细胞，饥饿后用氨基酸（AA）或含血清的新鲜培养基（M）刺激细胞。将裂解蛋白溶解在凝胶上，转移到膜上，并用所示蛋白的抗体进行免疫印迹。

**图2。**
ERK1/2的抑制抑制永生化支气管上皮细胞中的mTORC1，但在Raf转化细胞中不抑制。(A类)用100 nM PD0325901处理HBEC3KT和HBEC3KTRL53细胞2 d，并进行免疫染色，如图1所示A类. (B类)如图1所示，通过获得细胞器面积与全细胞面积的比值，对图像进行分析，以测量溶酶体分布面积（LAMP2染色）。(C类)用100 nM PD0325901处理HBEC3KT和HBEC3KTRL53细胞30分钟或2天。用所示抗体对裂解蛋白进行免疫印迹。

**图3。**
K-Ras突变的癌细胞对饥饿的敏感性低于正常细胞。(A类)HBEC3KTRL53和HCT116细胞在EBSS中饥饿30分钟或120分钟，如图1所示，并进行联合免疫维持A类. (B类)HBEC3KT和HBEC3KTRL53细胞在EBSS中饥饿0分钟、30分钟或60分钟。将裂解蛋白溶解在凝胶上，然后用所示抗体进行免疫印迹。(C类)HBEC3KT和HCT116细胞在EBSS中饥饿特定时间，并如上所述进行免疫印迹。

**图4。**
HeLa和HBEC3KT中KIF2A和KIF2C过度表达激活pERK和pS6。(A类)在EBSS中饥饿或饥饿90分钟的HeLa细胞中表达FLAG-KIF2A(B类)用PD0325901处理表达FLAG-KIF2A的细胞90分钟(C类)FLAG-KIF2C在用PD0325901处理90分钟的HBEC3KT细胞中表达。裂解蛋白在凝胶上溶解，然后用所示抗体进行免疫印迹。

**图5。**
KIF2C缺失诱导自噬。(A类)在等量的HBEC3KT和HBEC3KTRL53裂解液中免疫印迹LC3-II。(B类)用siRNA从HBEC3KTRL53中去除Ras。然后用100 nM PD0325901处理细胞3天，然后按指示对裂解产物进行免疫印迹。(C类)KIF2C被来自HBEC3KTRL53的siRNA耗尽。细胞在EBSS中饥饿12小时，或用10 nM巴氟霉素A处理，并用p62抗体进行免疫印迹。ERK1/2作为负荷控制。

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

Ras调节驱动蛋白13家族成员以控制转化的人类支气管上皮细胞中的细胞迁移途径。
Zaganjor E、Osborne JK、Weil LM、Diaz-Martinez LA、Gonzales JX、Singel SM、Larsen JE、Girard L、Minna JD、Cobb MH。 Zaganjor E等人。致癌物。2014年11月20日；33(47):5457-66. doi:10.1038/onc.2013486。Epub 2013年11月18日。致癌物。2014 PMID：24240690 免费PMC文章。
mTORC1通过ERK依赖性基因表达变化上调，赋予致癌KRas-突变癌细胞对MEK抑制剂的内在抗性。
小松N、藤田Y、松田M、青木K。 Komatsu N等人。致癌物。2015年11月5日；34(45):5607-16. doi:10.1038/onc.2015.16。Epub 2015年2月23日。致癌物。2015 PMID：25703330
S6K1选择性剪接调节其致癌活性并调节mTORC1。
Ben-Hur V、Denichenko P、Siegfried Z、Maimon A、Krainer A、Davidson B、Karni R。 Ben-Hur V等人。 Cell Rep.2013年1月31日；3(1):103-15. doi:10.1016/j.celrep.2012.11.020。Epub 2012年12月27日。 Cell Rep.2013年。 PMID：23273915 免费PMC文章。
氨基酸对mTORC1的调节。
Bar Peled L，萨巴蒂尼DM。 Bar-Peled L等人。趋势细胞生物学。2014年7月；24(7):400-6. doi:10.1016/j.tcb.2014.03.003。Epub 2014年3月31日。趋势细胞生物学。2014 PMID：24698685 免费PMC文章。审查。
氨基酸和mTORC1：从溶酶体到疾病。
Efeyan A、Zoncu R、Sabatini DM。 Efeyan A等人。《分子医学趋势》，2012年9月；18(9):524-33. doi:10.1016/j.molmed.2012.05.007。Epub 2012年6月28日。《2012年分子医学趋势》。 PMID：22749019 免费PMC文章。审查。

查看所有类似文章

引用人

HPV16 E6E7通过激活JNK/c-Jun信号上调KIF2A的表达，有利于宫颈癌细胞的迁移和侵袭。
王Y，王J，赵A，黄X，张X。王毅等。开放医学（战争）。2022年11月14日；17(1):1780-1787. doi:10.1515/med-2022-0578。eCollection 2022年。开放医学（战争）。2022 PMID：36447525 免费PMC文章。
KIF2A减少IL-33的产生并减轻过敏性哮喘炎症。
王Z、吴杰、姜杰、马Q、宋M、徐T、刘Y、陈Z、鲍Y、黄M、张M、季恩。 Wang Z等。过敏性哮喘临床免疫学。2022年6月19日；18(1):55. doi:10.1186/s13223-022-00697-9。过敏性哮喘临床免疫学。2022 PMID：35718777 免费PMC文章。
TBX15/miR-152/KIF2C通路通过促进PKM2泛素化调节乳腺癌阿霉素抵抗。
蒋CF、谢玉霞、钱玉霞、王明、刘丽珍、舒玉清、白XM、蒋波鸿。姜长凤等。《癌症细胞国际》2021年10月18日；21(1):542. doi:10.1186/s12935-021-02235-w。《癌症细胞国际》2021。 PMID：34663310 免费PMC文章。
环状RNA circ_0010235通过调节KIF2A使miR-338-3p海绵在非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭中发挥致瘤作用。
朱毅、马C、吕A、寇C。朱毅等。《医学年鉴》，2021年12月；53(1):693-706. doi:10.1080/07853890.2021.1925736。《医学年鉴》，2021年。 PMID：34024242 免费PMC文章。
激动素超家族蛋白2A（KIF2A）的过度表达与食管鳞癌的增殖和预后相关。
李德、孙浩、孟立、李德。 Li D等人。癌症管理研究2020年5月20日；12:3731-3739. doi:10.2147/CMAR。S248008.2020年电子收款。 2020年癌症管理研究。 PMID：32547209 免费PMC文章。缩回。

查看所有“被引用”文章

参考文献

1. Vander Heiden MG、Cantley LC、Thompson CB。了解Warburg效应：细胞增殖的代谢需求。科学。2009;324(5930):1029–1033.-项目管理咨询公司-公共医学
1. Karnoub AE，Weinberg RA。致癌基因：人格分裂。Nat Rev Mol细胞生物学。2008;9(7):517–531.-项目管理咨询公司-公共医学
1. White MA等。多种Ras功能可促进哺乳动物细胞转化。单元格。1995;80(4):533–541.-公共医学
1. Peifer M等。综合基因组分析确定了小细胞肺癌的关键体细胞驱动突变。自然遗传学。2012;44(10):1104–1110.-项目管理咨询公司-公共医学
1. Sekido Y、Fong KM、Minna JD。肺癌的分子遗传学。2003年医学年鉴；54:73–87.-公共医学

出版物类型

行动
行动

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

物质

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

赠款和资金

LinkOut-更多资源

[1] Vander Heiden MG、Cantley LC、Thompson CB。了解Warburg效应：细胞增殖的代谢需求。科学。2009;324(5930):1029–1033.-项目管理咨询公司-公共医学

[2] Vander Heiden MG、Cantley LC、Thompson CB。了解Warburg效应：细胞增殖的代谢需求。科学。2009;324(5930):1029–1033.-项目管理咨询公司-公共医学

[3] Karnoub AE，Weinberg RA。致癌基因：人格分裂。Nat Rev Mol细胞生物学。2008;9(7):517–531.-项目管理咨询公司-公共医学

[4] Karnoub AE，Weinberg RA。致癌基因：人格分裂。Nat Rev Mol细胞生物学。2008;9(7):517–531.-项目管理咨询公司-公共医学

[5] White MA等。多种Ras功能可促进哺乳动物细胞转化。单元格。1995;80(4):533–541.-公共医学

[6] White MA等。多种Ras功能可促进哺乳动物细胞转化。单元格。1995;80(4):533–541.-公共医学

[7] Peifer M等。综合基因组分析确定了小细胞肺癌的关键体细胞驱动突变。自然遗传学。2012;44(10):1104–1110.-项目管理咨询公司-公共医学

[8] Peifer M等。综合基因组分析确定了小细胞肺癌的关键体细胞驱动突变。自然遗传学。2012;44(10):1104–1110.-项目管理咨询公司-公共医学

[9] Sekido Y、Fong KM、Minna JD。肺癌的分子遗传学。2003年医学年鉴；54:73–87.-公共医学

[10] Sekido Y、Fong KM、Minna JD。肺癌的分子遗传学。2003年医学年鉴；54:73–87.-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

Ras转化解偶联驱动蛋白协调的细胞营养反应

附属公司

Ras转化解偶联运动蛋白协调的细胞营养反应

作者

附属公司

摘要

利益冲突声明

数字

类似文章

引用人

参考文献

出版物类型

MeSH术语

物质

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

研究材料

其他

摘要

利益冲突声明

数字

类似文章

引用人

参考文献

出版物类型

MeSH术语

物质

相关信息

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

研究材料

其他