MCLIP, an effective method to detect interactions of transmembrane proteins of the nuclear envelope in live cells

doi:10.1016/j.bbamem.2014.06.008

.2014年10月；1838(10):2399-403.

doi:10.1016/j.bamme.2014.06.008。 Epub 2014年6月17日。

MCLIP是检测活细胞核膜跨膜蛋白相互作用的有效方法

穆罕默德·哈基姆·贾弗拉利¹, 巴拉杰·维贾亚拉加万¹, 李嘉图A Figueroa¹, 埃利诺·克拉福德¹, 桑托什·古迪斯², 维罗妮卡·J·拉尔森¹, 艾纳·哈尔伯格^三

附属公司

¹斯德哥尔摩大学神经化学系，瑞典斯德哥尔曼SE10691。
²斯德哥尔摩大学神经化学系，瑞典斯德哥尔曼SE10691；瑞典哈丁格SE14189卡罗林斯卡研究所生物科学与营养系（Novum）。
^三斯德哥尔摩大学神经化学系，瑞典斯德哥尔曼SE10691。电子地址：einar.hallberg@neurochem.sus.美国。

PMID： 24950247
内政部： 2016年10月10日/j.bamem.2014.06.008

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MCLIP是检测活细胞核膜跨膜蛋白相互作用的有效方法

穆罕默德·哈基姆·贾弗拉利等。 Biochim生物物理学报. 2014年10月.

免费文章

.2014年10月；1838(10):2399-403.

doi:10.1016/j.bbamem.2014.06.008。 Epub 2014年6月17日。

作者

穆罕默德·哈基姆·贾弗拉利¹, 巴拉杰·维贾亚拉加万¹, 李嘉图A Figueroa¹, 埃莉诺·克拉福德¹, 桑托什·古迪斯², 维罗妮卡·J·拉尔森¹, 艾纳·哈尔伯格^三

附属公司

¹斯德哥尔摩大学神经化学系，瑞典斯德哥尔曼SE10691。
²斯德哥尔摩大学神经化学系，瑞典斯德哥尔曼SE10691；瑞典哈丁格SE14189卡罗林斯卡研究所生物科学与营养系（Novum）。
^三斯德哥尔摩大学神经化学系，瑞典斯德哥尔摩SE10691。电子地址：einar.hallberg@neurochem.sus.美国。

PMID： 24950247
内政部： 2016年10月10日/j.bbamem.2014.06.008

摘要

由于核包膜（NE）中蛋白质对提取的固有阻力，使用免疫共沉淀（co-IP）研究其相互作用以前是困难的，甚至是不可能的。我们开发了一种新的方法，MCLIP（膜蛋白交联免疫沉淀），该方法利用细胞渗透性交联剂，利用Western blot有效检测和分析活细胞中NE蛋白的特定相互作用。利用MCLIP我们发现，在U2OS细胞中，完整的内核膜蛋白Samp1与Lamin B1、LINC（核骨架和细胞骨架连接子）复合蛋白、Sun1和可溶性小GTPase Ran相互作用。结果表明，先前检测到的Samp1和Emerin之间的体外相互作用也发生在活细胞中。体外下拉实验表明，Samp1和Emerin的核质结构域可以直接相互结合。我们还表明，MCLIP适合于在细胞周期的不同阶段共同沉淀蛋白质相互作用。

关键词：CoIP；交联；核包络；核膜；蛋白质-蛋白质相互作用；样品1。

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