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.2014:2014:590581.
doi:10.1155/2014/590581。 Epub 2014年4月7日。

食物摄入的同步改变肝脏GABA转氨酶表达和活性的每日变化

附属公司

食物摄入的同步改变肝脏GABA转氨酶表达和活性的每日变化

达利亚·德伊塔·佩雷斯等。 生物识别识别. 2014.

摘要

日间限制进食(DRF)是一项影响昼夜节律计时系统的实验方案,是被称为食物夹带振荡器(FEO)的生物钟表达的基础。肝脏是通过调节分子昼夜节律钟和代谢网络之间的功能关系对食物限制反应最快的器官。γ-氨基丁酸(GABA)是肝脏中的一种信号分子,能够调节细胞周期和凋亡。本研究旨在研究DRF/FEO表达过程中主要线粒体酶GABA转氨酶(GABA-T)的表达和活性。我们发现,DRF在整个昼夜周期内促进肝匀浆和线粒体部分中GABA-T的持续增加。DRF促进的较高GABA-T量与GABA-TmRNA或GABA-T-活性的变化无关。线粒体部分的GABA-T活性在光照期间甚至趋于下降。我们得出的结论是,DRF影响GABA-T mRNA水平的每日变化、稳定性和GABA-T的催化活性。这些数据表明,肝脏GABA能系统对代谢挑战(如DRF)和伴随出现的FEO作出反应。

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图1
图1
24的Western blot分析AL和DRF大鼠肝脏GABA-T蛋白的h分布。肝匀浆(Hg)(a)和线粒体组分(Mt)(b)在10%SDS-聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳。数据通过从24小时内收集的匀浆(a)和线粒体部分(b)中获得的条带密度测定进行量化AL组和DRF组以及食物状况控制、F组和F+R组的h时段。DRF组的食物可用性由黑框表示(12:00至14:00h) ●●●●。平均值表示为AL组的虚线和DRF组的虚点。图表表示每个时间点4只大鼠的平均值±SEM。重大差异(P(P)<0.05)如下所示:a:通过双向方差分析和事后Bonferroni检验得出DRF与AL;c: DRF平均值与学生AL平均值t吨-匀浆和线粒体部分测试;仅用于匀浆:&,DRF与11:00时的F;#,14点DRF与F+R,均由学生t吨-测试。
图2
图2
24项分析AL和DRF大鼠肝脏中GABA-T活性的分布。通过分光光度法在24小时内测定AL和DRF大鼠肝脏匀浆(a)和线粒体部分(b)中的GABA-T活性h周期。大鼠接受12小时 : 12h光状态 : 黑暗。阴影区域表示暗相。RFS组的食物可用性用黑框表示(12:00至14:00h) ●●●●。食品条件控制如图所示(F和F+R)。AL组的平均值用虚线表示,RFS组的平均值用虚线表示。图表显示了每个时间点4只大鼠的平均值±SEM。重大差异(P(P)<0.05)表示如下:*:通过单向方差分析和事后Bonferroni检验,匀浆和线粒体部分的DRF与AL;a: 仅在线粒体部分通过双向ANOVA和事后Bonferroni检验进行的RFS与AL的比较;b: 学生的F与F+Rt吨-测试。
图3
图3
24人分析h AL和DRF条件下大鼠肝脏GABA-T相对mRNA表达谱。通过RT-qPCR测定相对mRNA水平,并将其归一化为Rps18表达。阴影区域表示暗相。DRF组的食物供应情况用暗盒表示(从12:00到14:00h) ●●●●。图表显示了每个时间点6-8只大鼠的平均±SEM。平均值表示为AL组的虚线,DRF组为虚线。重大差异(P(P)<0.05)表示如下:*:通过单向方差分析和事后Bonferroni检验,匀浆和线粒体部分的DRF与AL;a: 通过双向方差分析和事后Bonferroni检验得出的RFS与AL;#:DRF与F+R在14:00,由学生的t吨-测试。

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