Chronic binge alcohol consumption alters myogenic gene expression and reduces in vitro myogenic differentiation potential of myoblasts from rhesus macaques

doi:10.1152/ajpregu.00502.2013

.2014年6月1日；306（11）：R837-44。

doi:10.11152/ajpregu.00502.2013。 Epub 2014年3月26日。

长期酗酒会改变恒河猴成肌细胞的肌原基因表达并降低其体外肌原分化潜能

附属公司

¹路易斯安那州立大学生理学系，路易斯安那州新奥尔良健康科学中心；
²路易斯安那州立大学生理学系，健康科学中心，路易斯安那州新奥尔良；路易斯安那州立大学综合酒精研究中心、路易斯安那州新奥尔良健康科学中心；
^三路易斯安那州巴吞鲁日Pennington生物医学研究中心细胞生物学和解剖学系；
⁴糖尿病、内分泌学和代谢联合项目，宾夕法尼亚生物医学研究中心，巴吞鲁日和路易斯安那州立大学，健康科学中心，路易斯安那州新奥尔良；
⁵路易斯安那州科温顿杜兰国家灵长类动物研究中心兽医处；和。
⁶路易斯安那州立大学生理学系，路易斯安那州新奥尔良健康科学中心；路易斯安那州立大学综合酒精研究中心、路易斯安那州新奥尔良健康科学中心；路易斯安那州立大学医学院，路易斯安那州新奥尔良健康科学中心。
⁷路易斯安那州立大学生理学系，路易斯安那州新奥尔良健康科学中心；路易斯安那州立大学综合酒精研究中心、路易斯安那州新奥尔良健康科学中心；pmolin@lsuhsc.edu。

PMID： 24671243
预防性维修识别码： PMC4042206型
内政部： 10.1152/ajpregu.00502.2013

长期酗酒会改变恒河猴成肌细胞的肌原基因表达并降低其体外肌原分化潜能

利兹·西蒙等。美国生理学杂志Regul Integr Comp Physiol. 2014.

.2014年6月1日；306（11）：R837-44。

doi:10.1152/ajpregu.00502.2013。 Epub 2014年3月26日。

附属公司

¹路易斯安那州立大学生理学系，路易斯安那州新奥尔良健康科学中心；
²路易斯安那州立大学生理学系，路易斯安那州新奥尔良健康科学中心；路易斯安那州立大学综合酒精研究中心、路易斯安那州新奥尔良健康科学中心；
^三路易斯安那州巴吞鲁日Pennington生物医学研究中心细胞生物学和解剖学系；
⁴糖尿病、内分泌学和代谢联合项目，宾夕法尼亚生物医学研究中心，巴吞鲁日和路易斯安那州立大学，健康科学中心，路易斯安那州新奥尔良；
⁵路易斯安那州科文顿杜兰国家灵长类动物研究中心兽医部；和。
⁶路易斯安那州立大学生理学系，路易斯安那州新奥尔良健康科学中心；路易斯安那州立大学综合酒精研究中心、路易斯安那州新奥尔良健康科学中心；路易斯安那州立大学医学院，路易斯安那州新奥尔良健康科学中心。
⁷路易斯安那州立大学生理学系，路易斯安那州新奥尔良健康科学中心；路易斯安那州立大学综合酒精研究中心、路易斯安那州新奥尔良健康科学中心；pmolin@lsuhsc.edu。

PMID： 24671243
预防性维修识别码： PMC4042206型
内政部： 10.1152/ajpregu.00502.2013

摘要

慢性酒精滥用与骨骼肌肌病有关。此前，我们证明恒河猴长期饮酒会加剧猴免疫缺陷病毒（SIV）感染末期的骨骼肌萎缩。促炎症、促氧化环境和泛素蛋白酶体活性增强被认为是导致骨骼肌丧失的可能机制。从卫星细胞衍生的成肌细胞分化为肌管的能力反映出再生能力受损的可能性尚未得到研究。我们假设在体外实验中，CBA动物骨骼肌中的炎症和氧化应激会损害成肌细胞的分化能力，以形成新的肌纤维。我们从恒河猴股四头肌中分离出原代成肌细胞，用CBA或等热量蔗糖（SUC）给药19个月。体外检测培养的成肌细胞的增殖和分化潜能。CBA组的成肌细胞显著降低了PAX7、MYOD1、MYOG、MYF5和MEF2C的表达。Jenner-Giemsa染色和肌核融合指数证明，这与肌管形成减少有关。从CBA组和SUC组分离的成肌细胞在增殖能力、细胞周期分布或自噬方面无显著差异。总之，这些结果反映了成肌细胞成肌基因表达和肌管形成的显著失调，我们将其解释为CBA给药猕猴骨骼肌再生能力受损的证据。这种机制对酒精性肌病的作用值得进一步研究。

关键词：慢性酗酒；基因表达；成肌细胞；肌源性分化；猕猴；卫星电池。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
成肌细胞培养中的肌原基因表达。成肌细胞肌原基因的mRNA表达*第3天*增殖（d3、d5、d7）和分化（d3d、d5d、d7d）。*PAX7*(A类),*MYOD1年*(B类),*MYOG公司*(C类),*第五个多年电价*(D类)、和*MHC3型*(F类)慢性酗酒（CBA）组与蔗糖（SUC）组相比显著降低。PAX7是一种卫星细胞标记。*MYOD1、MYOG、MYF5*和*MEF2C公司*(E类)是肌肉调节因子，以及*MHC3型*是成熟的标志$重要(*P（P）*<0.05）CBA对各自mRNA表达的影响#重要(*P（P）*<0.05）时间对各自mRNA表达的影响*重大互动。数据表示为平均值±SE。

**图2。**
成肌细胞的体外分化潜能。Jenner-Giemsa污染文化图片*第1天*,4、和7对分化程度进行了分析。A类：肌管密度计算为0–75色调（较暗色调）的像素总和。与SUC组相比，CBA组的肌管密度显著降低B类：融合指数是指纳入肌管的细胞核占总细胞核的比例。与SUC组相比，CBA组的融合指数显著降低。詹纳-吉姆萨染色培养物的代表性图像(C类)SUC组(D类)CBA集团**P（P）*与SUC组相比<0.05。比例尺=10μm。数据表示为平均值±SE。

**图3。**
成肌细胞增殖、细胞周期和细胞死亡的指标。A类：CBA组和SUC组之间的细胞增殖没有差异。B类：增殖期间细胞周期G1、S和G2M期的细胞百分比。CBA组和SUC组在细胞周期不同阶段的细胞分布没有显著差异。C类：分化过程中细胞周期G1期和S期的细胞百分比。根据成肌细胞增殖和分化过程中的凋亡和坏死指数对细胞死亡进行量化。凋亡指数无显著差异(D类)和坏死指数(E类)在增殖的d3和d5(F类)评估细胞死亡的双重染色流式细胞术分析的代表性图像。右下象限（Annexin V−/PI−）为早期凋亡细胞，右上象限（Ennexin V+/PI+）为晚期凋亡细胞，左上象限为坏死细胞，左下象限为活细胞。数据表示为平均值±SE。

**图4。**
成肌细胞自噬标记物的表达。A类：两个凋亡基因的mRNA表达没有变化，*贝克林-1*和*自动液位计5*在CBA组和SUC组之间增殖和分化的第5天。B类：在两组细胞增殖和分化的第5天，LC3B（一种自噬体蛋白）的标记指数没有显著变化。C类：SUC和CBA组成肌细胞中LC3B免疫染色的代表性图像。箭头表示LC3B免疫染色。比例尺=10μm。数据表示为平均值±SE。

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