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.2014年4月;57(4):422-31.
doi:10.1007/s11427-014-4635-0。 Epub 2014年3月18日。

可视化细胞核中微管相关蛋白tau

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可视化细胞核中微管相关蛋白tau

Jing Lu公司等。 科学中国生命科学. 2014年4月.
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摘要

虽然tau主要被称为轴突微管相关蛋白,但许多研究表明它并不局限于这个亚细胞室。然而,评估tau的亚细胞分布并不是一件小事,正如转基因小鼠研究所表明的那样。当人类tau过度表达时,它可以被免疫组织化学定位于轴突和体脂蛋白结构域,模拟阿尔茨海默病等神经退行性疾病中的情况。然而,在野生型小鼠中,尽管tau数量丰富,但即使在轴突中也很难看到。在细胞核中检测这种蛋白质更具挑战性,因为tau被认为可以保护DNA免受损伤。为了建立tau核功能未来研究的框架,我们比较了几种在细胞系和小鼠大脑中可视化内源性核tau的方法。虽然依赖于固定和渗透方案,我们能够在SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞中检测到核tau,但在N2a鼠神经母细胞癌细胞中未能检测到。作为第二种方法,我们使用小鼠组织的亚细胞分离,发现在细胞核中,tau主要以低磷酸化形式存在。当全长或截短的人类tau表达时,两者都聚集在细胞质中,但也在细胞核中发现。由于亚细胞分馏方法有其局限性,我们最终分离细胞核以探测核τ,发现细胞核没有细胞质污染。我们的分析确定了几种检测细胞核中tau的方案,在那里tau以磷酸化程度较低的形式被发现。

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