Blood outgrowth endothelial cells alter remodeling of completely biological engineered grafts implanted into the sheep femoral artery

doi:10.1007/s12265-013-9539-z

.2014年3月；7(2):242-9.

doi:10.1007/s12265-013-9539-z。 Epub 2014年1月16日。

血液中生长的内皮细胞改变植入羊股动脉的完全生物工程移植物的重塑

李·梅耶¹, 泽山·H·赛丹, 马修·特拉蒂, 桑德拉·约翰逊, 明娜·H·陈, 罗伯特·P·赫贝尔, 罗伯特·特兰基洛

附属机构

采购管理信息： 24429838
PMCID公司：项目经理4213739
内政部： 2007年10月17日/12265-013-9539-z

血液中生长的内皮细胞改变植入羊股动脉的完全生物工程移植物的重塑

李·梅耶等。心血管传输研究杂志. 2014年3月.

.2014年3月；7(2):242-9.

doi:10.1007/s12265-013-9539-z。 Epub 2014年1月16日。

作者

李·梅耶¹, 泽山·H·赛丹, 马修·特拉蒂, 桑德拉·约翰逊, 明娜·H·陈, 罗伯特·P·赫贝尔, 罗伯特·特兰基洛

附属

¹明尼苏达大学生物医学工程系，7-114 NHH，312 Church St SE，Minneapolis，MN，55455，USA。

采购管理信息： 24429838
PMCID公司：项目经理4213739
内政部： 10.1007/s12265-013-9539-z

摘要

组织工程血管移植物的血液相容性仍然是小直径移植物临床应用的主要障碍。在这里，我们评估了在植入绵羊股动脉之前，利用自体血液生长出的内皮细胞在完全生物化、去细胞化的工程同种异体骨上通过腔内种植来建立内皮细胞的可行性。直径4毫米、长2至3毫米的移植物是由纤维蛋白凝胶制成的，纤维蛋白凝胶在脱细胞前由绵羊真皮成纤维细胞在体外重塑为对齐的组织管。植入后1小时，预先喂以血液生长的内皮细胞（n=3）的脱细胞移植物保持了前所未有（>95%）的单层覆盖率，在植入9周后，包括最后一周未进行抗凝治疗，内皮覆盖率更高，壁厚更小，基底膜更多，与对侧非喂食对照组相比。这些结果支持使用自体血液生长出的内皮细胞作为内皮细胞的可行来源，在由成纤维细胞重塑的纤维蛋白制成的脱细胞工程同种异体移植物上创建具有生物功能的内皮细胞。

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数字

图1
BOEC和BOEC要求的TEVG特征。BOEC对一VE-卡德林，bvon Willebrand因子，**c（c）**低密度脂蛋白摄入，阴性d日.CD45(*比例尺*=200μm）。体外血小板粘附试验的比较**e（电子）**非供体移植物**（f）**单层培养和克血小板覆盖面积百分比。血流下内皮滞留(小时)使用*面对面*1 h植入物染色（1 h），并与静态培养（静态）和流动调节（flow）植入前样品进行比较，以及通过组织切片vWF染色定量的移植内皮覆盖率（“9周”和“9周非种子TEVG”，单位为“h”）

图2
BOEC依赖与对照移植物基底膜染色与天然血管的比较。对冷冻进行评估，以获得基底膜蛋白沉积的证据一纤维连接蛋白，bIV型胶原蛋白，以及**c（c）**层粘连蛋白。脱细胞移植物的免疫染色显示在第一列（Ctrl植入前），植入时需要BOEC的移植物显示在第二列（BOEC植入前）、9周移植的脱细胞对照TEVG（Ctrl-Explant）和BOEC需要移植的TEVG，最后一栏显示了天然股动脉的免疫染色切片。*比例尺*=100μm和星号表示内腔表面

图3
植入9周后，收集内皮化前和对照移植物，并切割成环形段进行大体视觉分析(一). 进行了外植体嫁接特性的测量。厚度(b)，极限抗拉强度(**c（c）**)、和模量(d日)预内皮化（种子，n个=3）和控制（非种子，n个=3）TEVG与股动脉和植入前TEVG的比较(n个=3）显示

图4
BOEC要求在外植体中鉴定TEVG。9周移植移植物的三色图像*红色箭头*显示与管腔表面相邻的细胞区域*白色箭头*内部脱细胞区域一非种子TEVG和bBOEC支持的TEVG。非种子TEVG上的αSMA、CD45和vWF染色(**c（c）**,**e（电子）**,克)和BOEC支持的TEVG(d日,**（f）**,小时)近中层移植物(*白色刻度条*=200微米）

图5
BOEC导向的TEVG管腔表面的SEM图像。具有流动对齐汇合单层的区域(一)细胞间紧密连接(b)以及罕见的基质和结合血小板暴露部位(**c（c）**)(*比例尺*显示了μm值）

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