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比较研究
.2014年1月；181(1):76-89.
doi:10.1667/RR13405.1。 Epub 2014年1月7日。

范科尼贫血（Fancd2（-/-））小鼠骨髓基质细胞和造血祖细胞系的放射学差异

希伯斯特·贝哈内 1, 迈克尔·W·埃珀利, 朱莉·戈夫, 罗尼·卡拉什, 曹绍南, 达西·弗朗西科拉, 张西晨, 唐娜·希尔兹, 弗兰克·霍顿, 王宏（Hong Wang）, 彼得·威普夫, 卡林迪·帕尔马, 乔尔·格林伯格
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比较研究

范科尼贫血（Fancd2（-/-））小鼠骨髓基质细胞和造血祖细胞系的放射学差异

希伯斯特·贝哈内等。 辐射Res. 2014年1月.

摘要

FancD2在人类Fanconi贫血DNA损伤反应（DDR）途径中起着核心作用。Fancd2（-/-）小鼠表现出人类Fanconi贫血的许多特征，包括细胞DNA修复缺陷。Fancd2（-/-）小鼠的DNA修复缺陷是否会导致所有细胞系的放射学改变尚不清楚。我们测量了长期骨髓培养中的造血应激和克隆存活曲线中的放射敏感性，以及与骨髓基质细胞系相比，造血祖细胞中彗星尾强度、总抗氧化存储量和辐射诱导基因表达。我们进一步评估了线粒体靶向抗氧化剂GS氮氧化物的辐射保护作用，JP4-039。Fancd2（-/-）小鼠长期骨髓培养的造血寿命降低，骨髓基质细胞系与Fancd2+/+基质细胞相比具有放射敏感性（Fancd2-/-）D0=1.4±0.1 Gy，ñ=5.0±0.6 vs.Fancd2,+/+D0=1.6±0.1 Gy，ñ=6.7±1.6），D0的P=0.0124，ñ的P=0.0023）。相反，Fancd2（-/-）IL-3依赖性造血祖细胞具有放射抗性（D0=1.71±0.04 Gy和ñ=5.07±0.52），而Fancd2+/+（D0=1.39±0.09 Gy和≠=2.31±0.85，D0的P=0.001）。来自新鲜移植Fancd2（-/-）骨髓的CFU-GM也具有抗辐射性。与辐射敏感性一致，经照射的Fancd2（-/-）基质细胞与Fancd2+/+细胞相比，彗星尾强度分析显示其DNA损伤更高（P<0.0001），DNA损伤恢复较慢，基线总抗氧化能力较低，辐射诱导的抗氧化剂耗竭增强，CDKN1A-p21基因转录物和蛋白质增加。Fancd2（-/-）IL-3依赖性造血细胞具有较高的基线和照射后总抗氧化能力，这与放射抗性一致。虽然Fancd2（-/-）基质细胞辐射诱导的细胞周期阻滞没有明显变化，但造血祖细胞显示G2/M细胞周期阻滞减少。小鼠Fancd2基因产物的缺失使其对骨髓基质细胞而非造血祖细胞具有放射敏感性。

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数字

图1
图1
减少造血寿命范迪2−/−小鼠长期骨髓培养。按照方法部分所述，每组建立八个骨髓培养物，并按照所述进行培养。每周测试各组粘附层的汇合百分比（A组）；（B组）每周对每个烧瓶的鹅卵石岛进行评分；（面板C）累积鹅卵石岛；（面板D）非粘附细胞/烧瓶；（面板E）累积非粘附细胞/烧瓶；（图F）每周第7天集落形成祖细胞；（G组）累积第7天非粘附集落形成细胞；（H组）每周非粘附第14天集落形成细胞；和（第一组）累积第14天的集落形成细胞。(●)范迪2+/+; (▲）范迪2+/负极; 和(■)范迪2−/−（统计分析见补充表S1；http://dx.doi.org/10.1667/RR13405.1.S1).
图2
图2
辐射敏感性范迪2−/−骨髓基质细胞与肿瘤的放射抗性范迪2−/−IL-3依赖性造血祖细胞。每个骨髓基质细胞（A组）或造血祖细胞（B组）按照方法一节中的描述，对细胞系进行辐照和菌落形成分析（电镀效率为40–70%，电镀密度为100–400个细胞/孔。结果是至少3个实验的平均值±SEM，这些实验将每个表型的细胞系绘制为单击多靶点模型（16，17）。
图3
图3
电离辐射诱导DNA链断裂的不同修复率范迪2−/−骨髓基质细胞与IL-3依赖性造血祖细胞系的比较。按照方法部分所述进行彗星分析，比较：（A组）骨髓基质细胞系和（B组）每个基因型的IL-3依赖性造血祖细胞系。范迪2−/−照射后基质细胞DNA损伤程度较高(*P（P）<0.0001），与范迪2+/+(*P（P）<0.0001）或范迪2+/负极(*P（P）<0.0001）基质细胞*表示与范迪2+/+细胞。
图4
图4
不同水平的基线和辐射诱导抗氧化能力范迪2−/−骨髓基质细胞和IL-3依赖性造血祖细胞系。来自的单元格行范迪2−/−将小鼠骨髓基质细胞（A组）和造血祖细胞（B组）暴露于5或10Gy辐射。照射后24小时收集细胞。蛋白质浓度标准化为1 mg/mL，总抗氧化还原能力（抗氧化状态）按方法部分所述进行测量。将抗氧化活性与使用trolox单位生成的标准曲线进行比较，因此所有数据均表示为毫摩尔（mM（M）)trolox单位的等效值*与相比存在显著差异范迪2+/+细胞系。
图5
图5
基线和辐射诱导的不同水平的基因转录范迪2−/−骨髓基质细胞与IL-3依赖性造血祖细胞系的比较。比较骨髓基质细胞（A–C组）和IL-3依赖性造血祖细胞系（D–F组）。使用三唑从每个细胞系的细胞颗粒中提取RNA。如方法部分所述，使用与p21、Chk1、p53、MnSOD、Nrf2、Nfkb和TGFB1相关的启动子特异性引物进行RT-PCR*与相比存在显著差异范迪2+/+细胞系*与相比，P<0.05范迪2+/+0 Gy时；#与相比，P<0.05范迪2+/+5 Gy时。
图6
图6
不同水平的基线和辐射诱导的p21、p53和MnSOD蛋白范迪2−/−骨髓基质细胞和IL-3依赖性造血祖细胞系。按照方法部分所述，在0 Gy（基线）、5 Gy照射后24或48小时，通过Western分析分析每个细胞系的蛋白质水平。A组：基质细胞中的p53；面板B:p21英寸范迪2−/−和控制范迪2+/+和范迪2+/负极基质细胞；C组：基质细胞中的MnSOD；D组：IL-3依赖细胞中的p53；E组：IL-3依赖性造血祖细胞中的p21；和F组：）IL-3依赖性造血祖细胞中的MnSOD。这些蛋白质的分子大小如下：MnSOD为25kDa；GAPDH为37 kDa；p21是21kDa，p53是53kDa。见补充表4A–C）中p53、p21和MnSOD蛋白的表达范迪2+/+，范迪2+/负极和范迪2−/−基质细胞。（对于p53、p21和MnSOD蛋白的表达范迪2+/+，范迪2+/负极和范迪2−/−IL-3依赖性细胞见补充表S4D-F；http://dx.doi.org/10.1667/RR13405.1.S1.)
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参考文献

    1. Kee Y，D’Andrea A.范科尼贫血的分子发病机制和临床治疗。临床投资杂志。2012;122(11):3799–3806.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Jenkins C，Kan J，Hoatlin ME。以范科尼贫血途径为靶点，确定量身定制的抗癌药物。贫血。2012;2012:1–7.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. 更改BP。范科尼贫血和恶性肿瘤。美国血液学杂志。1996;53:99–110.-公共医学
    1. Bernard ME、Kim H、Berhane H、Epperly MW、Franicola D、Xichen Z等。GS-一氧化氮（JP4-039）对人范科尼贫血细胞系的辐射防护作用。辐射研究2011；176:603–12.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Du W、Rani R、Sipple J、Schick J、Myers KC、Mehta P等。FA途径通过选择性保护抗氧化防御基因启动子对抗氧化应激。鲜血。2012;119(18):4142–51.-项目管理咨询公司-公共医学

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