摘要
由于引入了基于沸点温度下考马斯蓝染色溶液染色的快速染色方案，使用考马斯兰染料可视化蛋白质所需的时间大大缩短。然而，快速染色受到高凝胶背景的影响，降低了信噪比，并限制了2D SDS-PAGE中可检测斑点的数量。这项工作的目的是消除高凝胶背景，从而改进基于考马斯蓝染料的快速染色方案。我们的研究表明，仅在沸点下用4mM EDTA洗涤液替换水，就可以在50到60分钟内得到透明的凝胶背景。此外，当使用咪唑锌反向染色和考马斯蓝快速染色相结合时，灵敏度显著提高；1D-SDS-PAGE可以检测到纳克数量的蛋白质，而2D-SDS-PAGE可以检测到血浆、血小板和大鼠脑组织样本中大约30%到60%的斑点。这项工作代表了一种优化的快速染色方案，具有更高的灵敏度，需要60-75分钟才能完成蛋白质可视化。
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赠款和资金
本研究得到捷克科学基金会P205/12/G118和研究组织概念发展项目（捷克共和国卫生部）（血液学和输血研究所）的支持。资助者在研究设计、数据收集和分析、决定出版或编写手稿方面没有任何作用。
