Altered subcellular localization of the NeuN/Rbfox3 RNA splicing factor in HIV-associated neurocognitive disorders (HAND)

doi:10.1016/j.neulet.2013.10.037

.2014年1月13:558:97-102。

doi:10.1016/j.neulet.2013.10.037。 Epub 2013年11月8日。

HIV-相关神经认知障碍（HAND）中NeuN/Rbfox3 RNA剪接因子的亚细胞定位改变

卡里斯特·霍普·卢卡斯¹, 马蒂尔德·卡尔韦斯², 罗什尼巴布^三, 阿曼达·布朗⁴

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¹约翰·霍普金斯大学医学院神经病学系，地址：美国马里兰州巴尔的摩市梅尔北沃尔夫街600号，邮编：21287，邮编：6-181。电子地址：clucas7@jhu.edu。
²约翰·霍普金斯大学医学院神经病学系，地址：美国马里兰州巴尔的摩市梅尔北沃尔夫街600号，邮编：21287，邮编：6-181。电子地址：Mathilde.calvez@ens-lyon.fr。
^三约翰·霍普金斯大学医学院神经病学系，地址：美国马里兰州巴尔的摩市梅尔北沃尔夫街600号，邮编：21287，邮编：6-181。电子地址：robabu@gmail.com。
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HIV-相关神经认知障碍（HAND）中NeuN/Rbfox3 RNA剪接因子的亚细胞定位改变

卡里斯特·霍普·卢卡斯等。神经科学快报. 2014.

.2014年1月13:558:97-102。

doi:10.1016/j.neulet.2013.10.037。 Epub 2013年11月8日。

作者

卡里斯特·霍普·卢卡斯¹, 马蒂尔德·卡尔韦斯², 罗什尼巴布^三, 阿曼达·布朗⁴

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¹约翰·霍普金斯大学医学院神经病学系，地址：美国马里兰州巴尔的摩市梅尔北沃尔夫街600号，邮编：21287，邮编：6-181。电子地址：clucas7@jhu.edu。
²约翰·霍普金斯大学医学院神经病学系，地址：美国马里兰州巴尔的摩市梅尔北沃尔夫街600号，邮编：21287，邮编：6-181。电子地址：Mathilde.calvez@ens-lyon.fr。
^三约翰·霍普金斯大学医学院神经病学系，地址：美国马里兰州巴尔的摩市梅尔北沃尔夫街600号，邮编：21287，邮编：6-181。电子地址：robabu@gmail.com。
⁴约翰·霍普金斯大学医学院神经病学系，地址：美国马里兰州巴尔的摩市梅尔北沃尔夫街600号，邮编：21287，邮编：6-181。电子地址：abrown76@jhmi.edu。

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摘要

抗NeuN抗体已被广泛使用超过15年，以明确识别包括小鼠、大鼠和人类在内的多种脊椎动物中枢神经系统中的有丝分裂后神经元。与广泛报道的核定位相反，我们发现与对照组相比，HIV感染者认知障碍患者脑切片中神经元胞浆中的NeuN反应性显著升高。抗NeuN抗血清的蛋白靶点最近被确定为神经元特异性RNA剪接因子Rbfox3，但其在影响大脑的疾病中的意义之前尚未报道。RNA剪接发生在细胞核中，因此，RbFox3在细胞质中定位的改变可能导致神经元基因表达的下调。

关键词：基因表达；HIV相关神经认知障碍；NeuN；神经变性；Rbfox3；拼接。

PubMed免责声明

数字

**图1。HIV-相关无症状认知障碍（ANI）患者抗NeuN染色的细胞质定位（石蜡切片）**
黄色星号表示细胞核定位，箭头突出显示细胞体和轴突中NeuN阳性的神经元。(一)病例14，认知正常(b条)病例编号20，HIV+ANI（见表1）。**四个不同正常对照组的NeuN免疫反应（冰冻切片）。**箭头突出显示具有核排斥染色（N）或核和细胞质反应性（N+C）的神经元。在插图中（图1c–f），放大细胞以说明NeuN定位，包括细胞质专属染色。黄色箭头表示苏木精阳性细胞与抗NeuN抗血清无反应。(一)案例4(b条)案例5(**c（c）**)案例2和(d日)案例1（见表1）。

**图2。两种不同HIV的NeuN免疫反应⁺ANI病例（冰冻切片）**
箭头突出显示具有核排斥染色（N）或核和细胞质反应性（N+C）的神经元。黄色箭头表示苏木精阳性细胞与抗NeuN抗血清没有反应。(一)案例6和(b条)案例7（见表1）。**四种不同HIV的NeuN免疫反应⁺MND/HAD病例（冰冻切片）。**箭头突出显示具有核专属染色（N）或核和细胞质反应性（N+C）或专属细胞质染色（C）的神经元。黄色箭头表示苏木精阳性细胞与抗NeuN抗血清没有反应。在a和c中，苏木精染色的细胞核被细胞质中的NeuN反应所包围。(一)案例编号9(b条)案件编号13(**c（c）**)案件编号8，以及(d日)案例编号11（见表1）。

**图3。四种正常石蜡包埋病例的NeuN免疫反应**
箭头突出显示具有核排他性染色（N）或核和细胞质反应性（N+C）的神经元。黄色箭头表示苏木精阳性细胞与抗NeuN抗血清没有反应。(一)案件编号16(b条)案件编号17(**c（c）**)案件编号15，以及(d日)病例编号14（见表1）。**两种不同HIV的NeuN免疫反应⁺ANI石蜡包埋病例。**箭头突出显示具有核排斥染色（N）或核和细胞质反应性（N+C）的神经元。黄色箭头表示苏木精阳性细胞与抗NeuN抗血清没有反应。(一)19号案件(b条)案例编号18（见表1）。

**图4。两种不同HIV的NeuN免疫反应⁺MND/HAD石蜡包埋病例**
箭头突出显示具有核排斥染色（N）或核和细胞质反应性（N+C）的神经元。黄色箭头表示苏木精阳性细胞与抗NeuN抗血清没有反应。(一)案件编号22和(b条)21号病例（见表1）。**患有MND/HAD的HIV感染者大脑中发现的神经元细胞核中的NeuN染色显著减少，细胞质中的Neu染色增加**对每个病例冰冻切片中大约200–300个神经元进行评分（平均+/-s.e.m.；单尾t吨-测试*p<0.05，**p<0.001）。(一)对照组（N=5；31.6+/−6.71）和HIV中具有唯一核定位NeuN的神经元数量⁺MND/HAD（N=6；16.5+/-2.81显著降低，第页=0.0269. (b条)在对照组（N=5；98.2+/−19.3（平均+/−s.e.m.）和HIV中，仅胞质定位NeuN的神经元数量⁺MND/HAD（N=6；159+/-12.99）显著增加，第页=0.0017. (**c（c）**)对照组（N=5；115+/-9.67）和HIV中核和细胞质定位NeuN的神经元数量⁺MND/HAD（N=6；114.7+/-10.9）无显著差异，p=0.4965。

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