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.2013年10月；14(5):635-43.
doi:10.1007/s10162-013-0403-2。 Epub 2013年7月3日。

前庭系统血管周围巨噬细胞样黑素细胞的特征和炎症反应

张飞（音译） 1, 张金辉, 玲玲能, 史晓瑞
附属公司

前庭系统血管周围巨噬细胞样黑素细胞的特征和炎症反应

张飞（音译）等。 耳鼻喉科研究杂志. 2013年10月.

摘要

在正常成人耳蜗前庭系统的血蓝屏障区也发现了大量同时表达巨噬细胞和黑素细胞特征的血管周细胞（称为血管周-邻近巨噬细胞样黑素细胞，PVM/M），这些细胞以前发现于窦内液血屏障中，包括半规管的三个壶腹（后、上、水平）、椭圆囊和球囊。这些细胞被鉴定为PVM/M，巨噬细胞和黑素细胞标记蛋白F4/80和GSTα4阳性。与血管纹中的PVM/Ms类似，前庭系统中的PVM/Ms与微血管密切相关，结构上与内皮细胞和周细胞交织，正常（非刺激）胞囊密度为225±43/mm（2）；球囊191±25/mm（2）；水平壶腹212±36/mm（2）；前壶腹238±36/mm（2）；后壶腹223±64/mm（2）。通过鼓膜向中耳注射细菌脂多糖可使PVM/M在48小时内激活并沿毛细血管壁不规则排列。炎症反应显著增加血管通透性和渗漏。结果强调了前庭系统血屏障及其周围基底膜、周细胞和PVM/Ms.PVM/Ms的第二道防线的形态复杂性，可能对维持血屏障完整性和启动前庭系统局部炎症反应很重要。

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数字

图1
图1
前庭系统中的血管周围巨噬细胞。A类显示了一个孤立的小鼠前庭系统的宏观视图。这个比例尺为1000μm。B类对正常前庭系统的不同部分，包括水平、前半规管和后半规管壶腹、椭圆囊、球囊和半规管进行了摄影描绘。这个比例尺为500μm。C类正常前庭系统不同部位的PVM/Ms用F4/80抗体标记(绿色)，毛细血管用GS-IB4标记(红色). 这个比例尺为100μm。
图2
图2
确定为黑色素细胞样巨噬细胞的血管周围滞留细胞。A类——C类用F4/80和GSTα4抗体双重标记的PVM/Ms对巨噬细胞和黑素细胞标记蛋白F4/80（绿色）和GSTβ4（红色）呈阳性染色。这个比例尺为50μm。天——F类PVM/Ms含有黑色素颗粒。这个柱状特殊方形区域面板内F类高倍镜下显示黑色素颗粒。这个比例尺为100μm。
图3
图3
前庭系统PVM/M与微血管密切相关，结构上与内皮细胞和周细胞交织。A类——天(左侧面板)全套半规管壶腹、椭圆囊、球囊和半规管三联标记F4/80(蓝色)，结蛋白(绿色)，和GS-IB4(红色)低倍（×20）共聚焦和DIC图像显示PVM/M、周细胞和内皮细胞。这个比例尺为100μm。A类——天(中间面板)高倍（×40）下的共焦图像显示了三种细胞类型之间的相互作用。这个比例尺为50μm。A类——天(右侧面板)放大后的图像显示了三种结构上相互交织的细胞类型。这个比例尺为30μm。
图4
图4
脂多糖治疗会引起炎症。A类,B类全套半规管壶腹、椭圆囊和球囊双标F4/80(绿色)和GS-IB4(红色)在控制中(A类)和LPS治疗组(B类). 这个比例尺为100μm。C类,天LPS处理后，整个半规管、壶腹、胞囊和球囊中F4/80阳性巨噬细胞数量显著增加[C类,n个 = 5,P（P） （对照组与LPS治疗组/后壶腹） = 0.015;P（P） （对照组与LPS治疗组/胞囊组） = 0.004;P（P） （对照组与LPS治疗组/球囊组） = 0.025]. 已鉴定的PVM/M对LPS的细胞数量反应水平与巨噬细胞不同(天,n个 = 5,P（P） （所有地区的对照组与LPS治疗组） > 0.05).
图5
图5
LPS治疗导致PVM/Ms激活。A类,B类通过LPS处理激活PVM/M。双标记的全套壶腹、球囊和椭圆囊显示，在LPS治疗组中，用F4/80抗体标记的PVM/Ms对GS-IB4也呈阳性。这个比例尺为50μm。C类，50 um后“壶腹、胞囊和囊状组织中激活的PVM/Ms的百分比”。
图6
图6
LPS治疗会增加血管渗漏。A类,B类静脉注射示踪剂（FITC-白蛋白，MW = 66 kD）在LPS治疗动物的整个前庭系统中蓄积(B类)，但不在控件中(A类).C类在LPS治疗的小鼠中，FITC-白蛋白的毛细血管渗漏是显著的[n个 = 6,P（P） （对照组与LPS治疗组） = 0.007].天——G公司静脉注射IgG Alexa 568的外渗(白色箭头)通过IV型胶原免疫染色观察毛细血管(绿色)在LPS治疗的小鼠中观察到，但在对照组中未观察到。这个比例尺为50μm。
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