跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2013年9月1日；99(4):632-9.
doi:10.1093/cvr/cvt121。 Epub 2013年5月21日。

补体32缺陷反应基因导致小鼠胎盘血管生成受损

崔晓兵 1, 夏果（Xia Guo）, 陈世友
附属公司

补体32缺陷反应基因导致小鼠胎盘血管生成受损

崔晓兵等。 心血管研究. .

摘要

目的：本研究的目的是确定补体32反应基因（RGC-32）在妊娠期胎盘血管生成中的作用，并探讨其潜在机制。

方法和结果：RGC-32缺陷（RGC32（-/-））小鼠由具有RGC-32基因外显子2和3缺失的C57BL/6胚胎干细胞产生。大多数RGC32（-/-）小鼠可以存活。然而，与出生时的野生型室友相比，它们的体型要小得多。通过检查性交后16.5天的胚胎发育和胎盘，我们发现RGC32（-/-）胚胎和胎儿胎盘明显小于野生型。进一步分析表明，RGC32（-/-）胎盘的迷路区较小，血管生成缺陷。从机制上讲，RGC32（-/-）胎盘中血管内皮生长因子（VEGF）受体2（VEGFR2）和胎盘生长因子（PlGF）显著下调，提示VEGFR2和PlGF-可能介导RGC-32在胎盘血管生成中的作用。事实上，shRNA敲低RGC-32可抑制VEGF诱导的内皮细胞增殖、迁移和管形成，同时阻断VEGFR2的表达。RGC-32似乎通过激活NF-kB来调节VEGFR2的表达。此外，RGC-32通过控制PlGF的表达来调节滋养层细胞的增殖。

结论：RGC-32的缺失通过中断胎盘血管生成导致胎儿生长受限，这是由于血管内皮细胞中通过NF-kB依赖性途径和滋养层细胞中PlGF表达降低VEGFR2表达所致。

关键词：血管生成；胎儿生长受限；胎盘生长因子；补体反应基因32；血管内皮生长因子受体。

PubMed免责声明

数字

图1
图1
RGC32增长受限−/−老鼠。(A类)生成RGC32的策略示意图−/−老鼠。(B类)野生型（RGC32）的基因分型+/+)，RGC32+/−和RGC32−/−利用小鼠尾部基因组DNA进行RT-PCR；仅285 bp的产物表明为野生型。750和285 bp片段的存在均表明杂合，而仅750 bp则表明纯合敲除。(C类)RGC32的16.5个DPC胚胎中的RGC-32转录物+/+，RGC32+/−和RGC32−/−用qPCR对小鼠进行定量。(D类)代表性RGC32的体型−/−与野生型同窝小鼠相比，小鼠较小。(E类)野生型的出生后体重和相对生长率(n个=6）和RGC32−/−(n个=7）4周大的小鼠。
图2
图2
RGC-32缺失导致胎儿生长受限和死亡。母RGC32+/−小鼠与雄性RGC32交配+/−老鼠。在16.5 DPC时收集胚胎和胎盘。(A类)RGC32型−/−胚胎和胎盘均小于野生型同窝卵。(B类和C类)野生型和RGC32重量的定量分析−/−胚胎(B类)和胎盘(C类). **P（P）与野生型组相比<0.01。(D类)RGC32的比率+/+，RGC32+/−，RGC32−/−胚胎和死胎。结果表示为平均值±SD(n个= 5).
图3
图3
RGC32血管受损−/−胎盘迷路区和卵黄囊。(A类)如图所示，将一半胎盘均匀分为三部分，并进行石蜡包埋。胎盘切片用H&E染色，迷路区用黄线环绕。(B类)不同迷宫区域的定量分析。这些区域被归一化为野生型迷宫区的第一部分。(C类)野生型和RGC32 CD31免疫组化染色的代表性显微照片−/−胎盘迷路区。(D类)迷路区胎儿毛细血管数量的量化。(E类和F类)野生型和RGC32两个可比较位置的总血管−/−11.5 DPC时的卵黄囊*P（P）< 0.05, **P（P）< 0.01,$P（P）>与相应野生型组相比，0.05(B类)或(D类) (n个≥ 3). MS，母窦；Tr，滋养层细胞；FE，胎儿内皮细胞；FCp，胎儿毛细血管。
图4
图4
野生型和RGC32中血管生成因子的mRNA表达−/−胎盘。VEGFR2的mRNA表达(A类)，PlGF(B类)和其他血管生成基因(C类)野生型和RGC32−/−用qPCR检测16.5 DPC时的胎盘*P（P）与野生型组相比，每个基因的差异均<0.05(n个= 3).
图5
图5
敲除RGC-32抑制EC功能、PlGF表达和滋养层细胞增殖。(A类)RGC-32基因敲除阻断了VEGFR2 mRNA的表达。用表达GFP（Ctrl）或RGC-32 shRNA（Ad-shRGC32）的腺病毒转导C166细胞48小时。如图所示，进行qPCR检测RGC-32、VEGFR2和PlGF的mRNA表达。(B类)RGC-32基因敲除阻断了VEGFR2蛋白的表达。C166细胞的处理与(A类). western blot检测VEGFR2的表达，并用α-微管蛋白进行归一化。(C类)RGC-32基因敲除阻断VEGF诱导的EC增殖。用Ad-GFP（Ctrl）或Ad-shRGC32转导C166细胞，然后用载体或VEGF（20 ng/mL）处理48 h。用MTT评估EC增殖。(D类)RGC-32基因敲除阻断了VEGF诱导的EC迁移。C166细胞的处理与(C类). 伤口愈合试验用于评估EC迁移。(E类)迁移距离的定量分析。(F类)RGC-32敲除阻止EC管形成。将Ad-GFP或Ad-shRGC32转导的C166细胞接种在Matrigel上24 h，观察毛细血管样管的形成。所示数据是三个独立实验的代表。(克)RGC-32敲除抑制滋养层细胞中PlGF的表达。用对照组（Ctrl）或RGC-32 shRNA质粒（shRGC32）转染HTR-8/SVneo细胞48 h。用qPCR检测RGC-32和PlGF的mRNA表达。(H（H）)RGC-32基因敲除阻断滋养层细胞增殖。用对照（Ctrl）或shRGC32质粒转染细胞48小时后，采用MTT法评估滋养层细胞的增殖情况*P（P）< 0.05, **P（P）与Ctrl组相比<0.01, #P（P）与Ctrl+VEGF组相比<0.05(n个≥3）。
图6
图6
RGC-32通过激活NF-kB调节VEGFR2的表达。用表达GFP（Ctrl）或RGC-32（Ad-RGC32）的腺病毒转导C166细胞48小时，然后检测NF-kB p65的磷酸化(A类)和CREB(B类)并将其归一化为自身的总蛋白水平。(C类和D类)用25μM PDTC预处理C166细胞，然后用Ad-GFP（Ctrl）或Ad-RGC32转导48小时。NF-kB p65活化和表达(C类)，VEGFR2 mRNA(D类)和蛋白质表达(E类)检测到。NF-kB磷酸化被归一化为总NF-kB表达。VEGFR2蛋白表达归一化为α-微管蛋白*P（P）< 0.05, **P（P）与对照组相比<0.01；#P（P）< 0.05,##P（P）与Ad-RGC32组相比<0.01(n个≥ 3).
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

  • DOCK2缺乏减弱腹主动脉瘤形成——Brief报告。
    郭X，蔡D，董凯，李C，徐Z，陈SY。 郭X等。 动脉硬化血栓血管生物学。2023年6月；43（6）：e210-e217。doi:10.1161/ATVBAHA.122.318400。Epub 2023年4月6日。 动脉硬化血栓血管生物学。2023 PMID：37021575
  • 出生后生长期间肺内皮亚型的发育多样性和对损伤的独特敏感性。
    Zanini F、Che X、Knutsen C、Liu M、Suresh NE、Domingo-Gonzalez R、Dou SH、Zhang D、Pryhuber GS、Jones RC、Quake SR、Cornfield DN、Alvira CM。 Zanini F等人。 iScience。2023年1月31日；26(3):106097. doi:10.1016/j.isci.2023.106097。eCollection 2023年3月17日。 iScience。2023 PMID：36879800 免费PMC文章。
  • 细胞周期蛋白调节器（RGCC/RGC-32）对肺纤维化的保护作用。
    Luzina IG、Rus V、Lockatell V、Courneya JP、Hampton BS、Fishelevich R、Misharin AV、Todd NW、Badea TC、Rus H、Atamas SP。 Luzina IG等人。 美国呼吸细胞分子生物学杂志。2022年2月；66(2):146-157. doi:10.1165/rcmb.2021-0022OC。 美国呼吸细胞分子生物学杂志。2022 PMID：34668840 免费PMC文章。
  • RGCC平衡发育中哺乳动物新皮质中神经干细胞的自我更新和神经元分化。
    郭Z，陈M，赵毅，蔡C，刘L，赵L，李L，白QR，徐Y，牛W，石L，毕Y，任D，袁F，石S，曾Q，韩K，石Y，卞S，何G。 郭Z等。 EMBO代表2021年9月6日；22（9）：e51781。doi:10.15252/embr.202051781。Epub 2021年7月29日。 EMBO代表2021。 PMID：34323349 免费PMC文章。
  • RGC-32与疾病：最初的20年。
    Vlaicu SI、Tatomir A、Anselmo F、Boodhoo D、Chira R、Rus V、Rus H。 Vlacu SI等人。 免疫研究2019年6月；67（2-3）：267-279。doi:10.1007/s12026-019-09080-0。 2019年免疫学研究。 PMID：31250246 审查。
查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Cetin I、Foidart JM、Miozzo M、Raun T、Jansson T、Tsatsaris V等。胎儿生长受限：研讨会报告。胎盘。2004;25:753–757.-公共医学
    1. Gardosi J.改善胎儿生长受限检测的临床策略。临床围产期。2011;38:21–31.-公共医学
    1. Gerber S、Hohlfeld P、Viquerat F、Tolsa JF、Vial Y。胎儿宫内生长受限和脐动脉舒张末期血流缺失或逆转（多普勒II级或III级）：对短期和长期胎儿发病率和死亡率的回顾性研究。欧洲妇产科学杂志。2006年；126:20–26.-公共医学
    1. Barker DJ。胎儿生长受限的成人后果。妇产临床。2006年；49:270–283.-公共医学
    1. Regnault TR、Galan HL、Parker TA、Anthony RV。正常妊娠和妊娠不良的胎盘发育——综述。胎盘。2002;23（补遗A）：S119–S129。-公共医学

出版物类型