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.2014年4月17日；33(16):2134-44.
doi:10.1038/onc.2013.147。 Epub 2013年4月22日。

蛋白激酶Cα通过激活p38 MAPK-TGFβ信号轴抑制Kras介导的肺肿瘤形成

K S山 1, 埃尔多安 1, A Khoor公司 2, M P沃尔什 1, M Leitges公司 三, N R穆雷 1, A P字段 1
附属公司

蛋白激酶Cα通过激活p38 MAPK-TGFβ信号轴抑制Kras介导的肺肿瘤形成

K S山等。 癌基因. .

摘要

蛋白激酶Cα（PKCα）可以根据细胞环境激活促癌和抗肿瘤信号。在这里，我们研究了PKCα在体内肺肿瘤发生中的作用。基因表达数据集显示，原发性人类非小细胞肺癌（NSCLC）表达PKCα水平显著降低，表明PKCα表达缺失是NSCLC的复发事件。我们评估了三种小鼠肺腺癌模型（LSL-Kras、LA2-Kras和氨基甲酸乙酯暴露）在肺肿瘤发生过程中PKCα丢失的功能相关性。PKCα基因缺失导致肺部肿瘤数量、大小、负担和分级显著增加，绕过癌基因诱导的衰老，从腺瘤进展为癌，体内生存率显著降低。PKCα缺失的促肿瘤作用反映在Kras介导的支气管肺泡干细胞（BASC）的增强扩张中，BASC是体内外公认的肿瘤起始细胞。LSL-Kras/Prkca（-/-）小鼠在体外BASC和体内肿瘤中表现出磷酸化p38 MAPK降低，用p38抑制剂治疗LSL-Kras-BASC导致集落大小增加，与在LSL-Klas/Prkca的BASC中观察到的集落大小无明显区别。此外，LSL-Kras/Prkca（-/-）BASC表现出TGFβ1 mRNA的适度但可重复的增加，并且向LSL-Kras BASC中添加外源性TGF-β1导致生长增强，类似于LSL-Klas/Prkca小鼠未经处理的BASC。相反，TGFβR1抑制剂逆转了LSL-Kras/Prkca（-/-）BASC中PKCα丢失的影响。最后，我们确定了DNA结合（Id）Id1-3抑制剂和Wilm’s Tumor 1作为体外和体内PKCα依赖性肿瘤抑制活性的潜在下游靶点。我们的结论是，PKCα通过调节肿瘤细胞增殖和Kras诱导的衰老的PKCα-p38MAPK-TGFβ信号轴，至少部分抑制肿瘤的发生和发展。我们的结果首次直接证明PKCα在体内肺中具有肿瘤抑制活性。

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利益冲突声明

利益冲突

作者声明没有利益冲突。

数字

图1
图1
PKCα的缺失是非小细胞肺癌的常见事件。(一)使用NextBio对公开可用的基因表达数据集进行分析，发现PKCα在三种主要形式的非小细胞肺癌（肺腺癌、鳞状细胞癌和大细胞癌）中表达下调，并且随着肿瘤的进展而进行。(b)人肺腺癌和邻近正常肺组织PKCα的免疫组织化学染色显示肿瘤组织中PKCα表达缺失。显微照片代表了所分析的三种原发性肺腺癌。(c（c）)在肺腺瘤中观察到PKCα的丢失LSL-Kras公司老鼠。显微照片代表了15例荷瘤患者的肿瘤LSL-Kras公司老鼠。分析的基因表达数据集列表(一)可在材料和方法中找到。
图2
图2
PKCα基因缺失刺激喀斯特-介导的肺肿瘤发生。(一)肺部来自LSL-Kras、LSL-Kras/Prkca+/负极和LSL-Kras/Prkca公司−/−小鼠表现出PKCαmRNA的渐进性丢失。数据表示每个基因型中两只小鼠的平均mRNA值Inset：这些小鼠肺提取物的免疫印迹分析LSL-Kras、LSL-Kras/Prkca+/负极和LSL-Kras/Prkca公司−/−PKCα蛋白表达缺失的小鼠。Actin充当加载控件。(b)LSL-Kras/Prkca公司−/−与LSL-Kras公司肿瘤诱导后*P（P）<0.001;N个=20/基因型。(c（c）)代表性肺部的大体病理学LSL-Kras公司和LSL-Kras/Prkca公司−/−小鼠表现出与PKCα丢失相关的致瘤表型增强。对肿瘤数量、肿瘤大小和肿瘤负担的定量分析表明LSL-Kras/Prkca公司−/−小鼠与LSL-Kras公司老鼠*P（P）<0.001;N个=20只小鼠/基因型。(d日)PKCα丢失刺激尿烷诱导的肺肿瘤数量和负担*P（P）<0.001;N个每个治疗组=20。(e（电子）)PKCα缺失刺激致癌喀斯特拉丁美洲2-诱导的肺部肿瘤数量和负担*P（P）<0.03;N个= 15.
图3
图3
PKCα缺失导致肿瘤进展和OIS旁路体内. (一)典型肿瘤的组织学分析LSL-Kras公司和LSL-Kras/Prkca公司−/−小鼠证明肿瘤来自LSL-Kras/Prkca公司−/−小鼠表现出从腺瘤向癌发展的特征性特征，而大多数肿瘤LSL-Kras公司小鼠被归类为腺瘤。箭头：核肿胀，核形态异常；箭头：细胞核拥挤和异常染色质凝聚。肿瘤的免疫组织化学染色LSL-Kras公司(b)以及LSL-Kras/Prkca公司−/−(c（c）)小鼠PKCα、p16和Ki67。LSL-Kras公司肿瘤在PKCα表达保留的肿瘤区域表达丰富的p16，而LSL-Kras/Prkca公司−/−小鼠不表达PKCα，p16很少或不表达，Ki67增加。
图4
图4
PKCα损失导致喀斯特-改造后的BASC体内和增强的BASC增长体外. (一)BASC数的定量分析体内根据材料和方法中的描述，对BASC的.TB进行评分，结果绘制为TB与0或1个BASC或2个或更多BASC的分数。两者都有LSL克拉斯和LSL-Kras/Prkca公司−/−与Ntg或普尔科卡−/−老鼠*P（P）<0.05, **P（P）<0.004. (b)BASC多重性分析表明LSL-Kras/Prkca公司−/−小鼠的BASC扩张明显大于LSL-Kras小鼠.P（P）<0.04. (c（c）)Ntg中BASC菌落直径的形态学和定量分析，普尔科卡−/−,LSL-Kras公司和LSL-Kras/Prkca公司−/−小鼠在三维Matrigel培养基中生长7天*P（P）与Ntg相比<0.01**P（P）<0.0001与LSL-Kras公司. (d日)选择性PKCα抑制剂Go6976对BASC菌落生长的影响。来自Ntg和LSL-Kras公司在Go6976（10n个M） 或稀释剂（DMSO）7天。显示了BASC菌落大小的典型显微照片和定量分析*P（P）与Ntg相比<0.0001**P（P）<0.0001与LSL-Kras公司用DMSO处理。
图5
图5
p38 MAPK在Kras介导的BASC扩增中是PKCα的下游效应子。(一)BASC总细胞裂解物的免疫印迹分析LSL-Kras公司和LSL克拉斯/普克卡−/−小鼠p38磷酸化MAPK、总p38 MAPK、磷酸化Erk 1,2和总Erk 1,2。(b)p38 MAPK的药理抑制模拟了BASC菌落生长中PKCα的丢失。来自Ntg的BASC，LSL-Kras公司和LSL-Kras/Prkca公司−/−小鼠在存在稀释剂（DMSO）或p38 MAPK选择性抑制剂SB203580（1µ米). SB203580刺激LSL-Kras公司BASC对Ntg或LSL-Kras/Prkca公司−/−BASC公司*P（P）<0.001; **P（P）<0.02; ***P（P）<0.003. (c（c）)肿瘤和正常肺组织的免疫组织化学染色LSL-Kras公司和LSL-Kras/Prkca公司−/−磷酸化p38 MAPK小鼠。LSL-Kras/Prkca公司−/−与之相比，肿瘤表现出磷酸化p38 MAPK的缺失LSL-Kras公司肿瘤。正常肺上皮显示低磷酸化p38 MAPK染色，不受基因型的影响。
图6
图6
TGFβ1是PKCα抑制BASC生长作用的关键介质。(一)TGFβ1的表达在LSL-Kras/Prkca公司−/−BASC与LSL-Kras公司BASC公司。N个=4*P（P）<0.004. (b)TGFβ1模拟PKCα丢失对BASC菌落生长的影响。添加外源性TGFβ1刺激LSL-Kras公司BASC菌落对Ntg或LSL-Kras/Prkca公司−/−BASC公司*P（P）<0.001; **P（P）<0.001. 所有其他比较均不显著。(c（c）)选择性TGFβ受体拮抗剂SB431542可抑制肿瘤细胞的生长LSL-Kras/Prkca公司−/−BASC对Ntg或LSL-Kras公司BASC公司*P（P）与Ntg DMSO相比<0.001**P（P）<0.001与LSL-Kras公司二甲基亚砜***P（P）<0.001与LSL-Kras/Prkca公司−/−二甲基亚砜。所有其他比较均不显著。
图7
图7
PKCα缺失诱导DNA结合抑制剂1、2和3（Id1-3）的p38 MAPK-、TGFβ依赖性表达。(一)PKCα缺失导致Id1、Id2和Id3 mRNA的诱导。Id1-4 in的定量PCRLSL-Kras公司和LSL克拉斯/普克卡−/−BASC公司。N个= 3; *P（P）<0.0001。(b)p38 MAPK抑制剂SB203580诱导Id1–3表达LSL-Kras公司但不是LSL克拉斯/普克卡−/−BASC公司。N个= 3; *P（P）与DMSO对照组相比<0.01。(c（c）)TGFβR1抑制剂SB431542逆转Id1–3 mRNA诱导LSL-Kras/Prkca公司−/−BASC公司。N个= 3; *P（P）与DMSO对照组相比<0.001。
图8
图8
PKCα缺失诱导WT1的p38 MAPK-TGFβ依赖性表达。(一)WT1 mRNA在LSL-Kras/Prkca公司−/−BASC与LSL-Kras公司BASC公司。N个= 3; *P（P）<0.0001. (b)WT1免疫组织化学染色。WT1蛋白在LSL-Kras/Prkca公司−/−肿瘤与LSL-Kras公司肿瘤。(c（c）)p38 MAPK抑制剂SB203580优先诱导WT1表达LSL-Kras公司BASC公司。N个= 3; *P（P）<0.001与LSL-Kras公司DMSO。(d日)TGFβR1抑制剂SB431542优先抑制WT1的表达LSL-Kras/Prkca公司−/−BASC公司。N个= 3; *P（P）<0.0001与LSL克拉斯/普克卡−/−二甲基亚砜。
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    1. Castagna M、Takai Y、Kaibuchi K、Sano K、Kikkawa U、Nishizuka Y。通过促瘤佛波酯直接激活钙活化的磷脂依赖性蛋白激酶。生物化学杂志。1982;257:7847–7851.-公共医学
    1. Kikkawa U、Takai Y、Tanaka Y、Miyake R、Nishizuka Y。蛋白激酶C可能是促肿瘤佛波酯的受体蛋白。生物化学杂志。1983;258:11442–11445.-公共医学
    1. Fields AP，Murray NR。蛋白激酶C同工酶作为人类癌症治疗靶点。Adv酶调节。2008;48:166–178.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Cacase AM、Ueffing M、Philipp A、Han EK、Kolch W、Weinstein IB。PKCε通过增强Raf激酶的活化发挥癌基因的作用。致癌物。1996;13:2517–2526.-公共医学

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