doi:10.1002/cbic.201200515。
Epub 2013年1月4日。
非洲爪蟾卵母细胞遗传密码的扩展
附属公司
附属
- 1法国巴黎75005 Ulm街46号IBENS生物研究所正常高等学校。yelehman@biologie.ens.fr
剪贴板中的项目
非洲爪蟾卵母细胞遗传密码的扩展
叶世新等。
化学生物化学.
.
doi:10.1002/cbic.201200515。
Epub 2013年1月4日。
附属
- 1法国巴黎75005 Ulm街46号IBENS生物研究所正常高等学校。yelehman@biologie.ens.fr
剪贴板中的项目
摘要
非洲爪蟾卵母细胞中配体门控离子通道(LGIC)的异源表达结合定点突变已被证明是研究结构-功能关系的有效方法。特别是,引入非天然氨基酸(UAA)可以实现天然蛋白质中未发现的修饰。然而,目前的策略依赖于对技术要求较高的氨酰化抑制因子tRNA的体外合成。我们在这里报道了一种通用方法,通过利用正交氨酰化tRNA合成酶(aaRS)/抑制因子tRNA(CUA)对对爪蟾卵母细胞中的UAA进行遗传编码来绕过这一限制。我们表明,插入N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)N末端结构域的UAA作为光交联剂,将受体锁定在离散构象状态,以响应UV光处理。我们的方法应该普遍适用于爪蟾卵母细胞中其他LGIC的研究。
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