FGF regulates TGF-β signaling and endothelial-to-mesenchymal transition via control of let-7 miRNA expression

doi:10.1016/j.celrep.2012.10.021

.2012年12月27日；2(6):1684-96.

doi:10.1016/j.celrep.2012.10.021。 Epub 2012年11月29日。

FGF通过调控let-7 miRNA表达调节TGF-β信号转导和内皮-间充质转化

陈培余¹, 秦凌峰, 卡门·巴恩斯, 克劳斯·查利斯, 泰伊, 张新波, 拉赫马特·阿里, 佩德罗·P·麦地那, 于军（Jun Yu）, 弗兰克·J·斯莱克, 丹尼尔·安德森, 维克托·科特利安斯基, 王芬（Fen Wang）, 乔治·特利德斯, 迈克尔·西蒙斯

附属公司

采购管理信息： 23200853
预防性维修识别码：项目经理3534912
内政部： 2016年10月10日/j.celrep.2012.10.021

FGF通过调控let-7 miRNA表达调节TGF-β信号转导和内皮-间充质转化

陈培余等。单元格代表. 2012.

.2012年12月27日；2(6):1684-96.

doi:10.1016/j.celrep.2012.10.021。 Epub 2012年11月29日。

作者

陈培余¹, 秦凌峰, 卡门·巴恩斯, 克劳斯·查利斯, 泰伊, 张新波, 拉赫马特·阿里, 佩德罗·P·麦地那, Yu军, 弗兰克·J·斯莱克, 丹尼尔·安德森, 维克托·科特利安斯基, 王芬（Fen Wang）, 乔治·特利德斯, 迈克尔·西蒙斯

附属

¹耶鲁大学心血管研究中心，美国康涅狄格州纽黑文耶鲁大学医学院内科心血管科，邮编06520。

采购管理信息： 23200853
预防性维修识别码：项目经理3534912
内政部： 2016年10月10日/j.celrep.2012.10.021

摘要

维持正常的内皮功能对血管功能的各个方面都至关重要，但对其调节却知之甚少。在本研究中，我们表明，破坏内皮细胞的基线成纤维细胞生长因子（FGF）信号导致let-7 miRNA水平显著降低，进而增加转化生长因子（TGF）-β配体和受体的表达以及TGF-β信号的激活，导致内皮细胞向间充质细胞转化（Endo-MT）。我们还发现，Endo-MT是小鼠移植动脉病模型中新生内膜形成和人类移植损伤排斥反应的重要驱动因素。内皮细胞FGF信号输入的减少是由于FGF抵抗状态的出现，其特征是FGF信号级联关键成分的表达和激活的炎症依赖性减少。这些结果确立了FGF信号作为维持内皮细胞稳态的关键因素，并指出Endo-MT在血管病理学中的意外作用。

PubMed免责声明

数字

**图1。FRS2通过TGFβR1途径调节间充质标志物基因表达**
（A）对照组和FRS2击倒HUAEC的VE-钙粘附素（红色）和SM-钙蛋白（绿色）的免疫荧光染色。细胞核用TO-PRO-3（蓝色）进行复染。比例尺：50µm。（B）对照组和FRS2击倒HUAEC的SMC标记物的免疫印迹。（C）用流式细胞术分析对照组或FRS2敲低的HUAEC的CD31和Dil-acLDL。（D）来自对照或FRS2敲除细胞的TGFβ家族基因的qPCR阵列mRNA表达谱。（E）对照组和FRS2敲低HUAEC的TGFβRs及其下游靶基因表达的qRT-PCR分析。（与对照组相比，*p<0.05；***p<0.001）。β-actin用于标准化模板加载的可变性。（F）对照组和FRS2击倒HUAEC的TGFβR1、Smad2、间充质细胞和内皮细胞标记物的免疫印迹。SM-calponin和间充质标志物纤维连接蛋白和波形蛋白表达的（G-I）qRT-PCR分析（**p<0.01；**p<0.001；NS：与对照组相比无显著性差异）。β-actin用于标准化模板加载的变异性。所示数据代表了四个独立实验（除了（D））。

**图2。FRS2击倒下调let-7家族**
（A）对照或FRS2敲除HUAEC用DMSO或10µg/ml放线菌素D（ActD）处理指定时间。然后用qRT-PCR测定TGFβR1的表达。18S rRNA用于标准化模板加载的变异性。（B）对齐*let-7*βR1的3'UTR序列。（C）使用实时PCR miRNA阵列和来自对照细胞或FRS2敲除细胞的cDNA评估miRNA表达谱。（D）转Lin28的HUVEC中TGFβR1和SM-钙蛋白的qRT-PCR，*let-7*海绵表示或空向量。β-肌动蛋白用于标准化模板负载的可变性。（E）对照组TGFβR1、p-Smad2、Smad2和FRS2的免疫印迹以及用*let-7*慢病毒。（F）用qRT-PCR方法分析对照组和FRS2敲除的HUAEC中TGFβR1、TGFβ下游靶分子、平滑肌标志物和间充质标志物基因的表达*let-7*慢病毒（与对照组相比，*p<0.05；**p<0.01；**p<0.001）。β-actin用于标准化模板加载的变异性。所示数据（A和D–F）是三个独立实验的代表。（G）小鼠静脉注射对照药物或胆固醇制剂安替戈米尔-*let-7*b/c（单次注射2mg/kg），6d时分离肝内皮细胞。的表达式*let-7*用qRT-PCR分析miRNAs。SNORD66用于标准化模板加载的变异性（***p<0.001；NS：与对照组相比不显著）。（H）经对照或配方安替戈米治疗的小鼠肝内皮细胞中K-ras、N-ras、HMGA2、CDK6、CDC25A、TGFβR1和波形蛋白的基因表达水平-*let-7*6天。β-actin用于标准化模板负荷的变异性（与对照组相比，*p<0.05；***p<0.001）。（一） CD31/波形蛋白的免疫荧光染色（细胞核用DAPI（蓝色，比例尺：7µm）复染），在用对照药物或配方安替戈米尔治疗的小鼠肝切片中-*let-7*6天。（J）注射对照或配方安替戈米尔的小鼠肝脏EC表达波形蛋白的定量-*let-7*（与对照组相比***p<0.001）。

**图3。炎症细胞因子（IFN-γ、TNF-α和IL-1β）下调FGF受体，从而使EC在体内外对FGF的反应降低**
（A）对照组和人IFN-γ处理的HUVEC中平滑肌和间充质标志物基因表达的qRT-PCR分析（与对照组相比*p<0.05；**p<0.01；***p<0.001）。β-actin用于标准化模板加载的可变性。（B）对照组和人干扰素-γ治疗的HUVEC中平滑肌和间充质标记物的免疫印迹。（C）用人干扰素-γ（10 ng/ml）、人TNF-α（10 ng/ml）或人IL-1β（10 ng/ml）在完全生长培养基中处理HUVEC 6天，然后在0.5%FBS饥饿培养基中培养18小时。用FGF2（50 ng/ml。FGF信号下游靶点的免疫印迹。（D）成熟的qRT-PCR分析*let-7*对照组和人干扰素-γ处理的HUVEC中的表达。SNORD47用于标准化模板加载的可变性。所示数据（A–D）代表四个独立实验。（E）左图：Cdh5-CreERT2中邻近主动脉和移植物切片中p-ERK的免疫荧光染色；mT/mG小鼠。比例尺：10µm。右：注射FGF2的小鼠内皮细胞表达p-ERK的定量（***p<0.001，与相邻主动脉相比）。

**图4。Endo-MT参与小鼠动脉硬化**
（A）通过抗Notch3、抗αSMA和抗胶原蛋白1免疫染色对动脉移植物进行组织学分析。Cdh5-GFP公司⁺/槽口3⁺（红色）和Cdh5-GFP⁺/α形状记忆合金⁺（红色）共定位表示Endo-MT，并显示为黄色。细胞核用DAPI（蓝色）复染。比例尺：Notch3和αSMA为10µm，胶原蛋白1为63µm。五十、流明；N、新生内膜；白色三角形表示内皮细胞；黄色三角形表示内部弹性层；箭头表示内皮细胞表达SMC标记物。（B）缺口百分比3⁺（左）或αSMA⁺（右）Cdh5-GFP细胞⁺新生内膜（与对照组相比，p<0.05；p<0.01）。（C） Cdh5-GFP百分比⁺Notch3细胞⁺（左）或αSMA⁺（右）新生内膜（与对照组相比，**p<0.01）。（D） Cdh5-GFP的百分比⁺Notch3细胞⁺（左）或αSMA⁺（右）流明（与对照组相比，*p<0.05；**p<0.01；**p<0.001）。（E–F）通过计算机辅助显微镜对胶原1区域和动脉移植内膜厚度进行形态计量学评估（与对照组相比，*p<0.05；**p<0.01）。PBS（N=7只小鼠/组）、Luc对照（N=6只小鼠/组）、iEC-FRS2KO（N=4只小鼠/组）、安他戈米-*let-7*（N=9只小鼠/组），以及*let-7*b模拟（N=6只小鼠/组）。

**图5。Endo-MT参与人移植动脉硬化**
（A–B）人类正常和慢性排斥反应人冠状动脉的CD31和Notch3免疫荧光染色的代表性图像。比例尺：62µm。L表示流明；白色三角形表示IEL（内部弹性板）。（C–D）人慢性排斥反应冠状动脉管腔和新生内膜EC的高倍图像，用Notch3染色共定位。比例尺：16µm。箭头表示内皮细胞表达SMC标记物。（E） CD31的百分比⁺Notch3细胞⁺管腔（与正常动脉相比，***p<0.001）。（F） CD31的百分比⁺Notch3细胞⁺新生内膜（Ø，未检出）。（G）缺口百分比3⁺CD31细胞⁺新生内膜（Ø，未检出）。（H–I）人CD31和Notch3免疫荧光染色在SCID/米色小鼠中的人冠状动脉移植的代表性图像，用或不用人PBMC重建。比例尺：62µm。L表示流明；白色三角形表示IEL（内部弹性板）。（J–K）经人PBMC管腔和新生内膜EC处理的动脉移植物的高倍图像，用Notch3染色共定位。比例尺：16µm。箭头表示内皮细胞表达SMC标记物。（五十） CD31的百分比⁺Notch3细胞⁺流明（与无PBMC相比***p<0.001）。（M） CD31的百分比⁺Notch3细胞⁺新生内膜（Ø，未检出）。（N）缺口3的百分比⁺CD31细胞⁺新生内膜（Ø，未检出）。

**图6。Endo-MT在股动脉钢丝损伤和静脉适应模型中的应用**
（A） A–b：后肢血管解剖。蓝线表示内皮层剥落。A、动脉；五、静脉；星号表示导线插入的位置。c–d：未损伤（左）和损伤（右）股动脉的典型横截面图像。e–f：损伤3周后损伤股动脉切片中αSMA（红色）的免疫荧光染色。五十、流明；N、新生内膜；M、媒体。（B） a：静脉-动脉移植示意图。b–c：下腔静脉低倍镜下CD31（红色）和αSMA（红色）的免疫荧光染色。d：高倍放大下腔静脉αSMA（红色）的免疫荧光染色。e–f：低倍放大静脉移植物中CD31（红色）和αSMA（红色）的免疫荧光染色。g&i：移植后2周和4周静脉移植物的高倍放大CD31（红色）免疫荧光染色。h&j：移植后2周或4周静脉移植物高倍镜下αSMA（红色）的免疫荧光染色。

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

成纤维细胞生长因子信号通过Elk1调节转化生长因子β诱导的肿瘤内皮细胞向肌成纤维细胞的内皮转化。
Akatsu Y、Takahashi N、Yoshimatsu Y、Kimuro S、Muramatsu T、Katsura A、Maishi N，Suzuki HI、Inazawa J、Hida K、Miyazono K、Watabe T。 Akatsu Y等人。 Mol Oncol公司。2019年8月；13(8):1706-1724. doi:10.1002/1878-0261.12504。Epub 2019年6月19日。 Mol Oncol公司。2019 采购管理信息：31094056 免费PMC文章。
Let-7g通过靶向转化生长因子-β和SIRT-1信号通路改善多种内皮功能。
廖一科、王一科、郭一科、林武、张明海、廖生。廖永春等。美国心脏病杂志。2014年4月29日；63(16):1685-94. doi:10.1016/j.jacc.2013.09.069。Epub 2013年11月27日。美国心脏病杂志。2014 采购管理信息：24291274
FGF和TGF-β信号在ETV1作为关键决定因素的异质性癌相关成纤维细胞激活中的双重性。
Bordignon P、Bottoni G、Xu X、Popescu AS、Truan Z、Guenova E、Kofler L、Jafari P、Ostano P、Röcken M、Neel V、Dotto GP。 Bordignon P等人。 Cell Rep.2019年8月27日；28（9）：2358-2372.e6。doi:10.1016/j.celrep.2019.07.092。 2019年Cell Rep。采购管理信息：31461652 免费PMC文章。
TGFβ和FGF信号在晶状体中的作用：原肌球蛋白对后囊不透明度的调节。
Kubo E、Shibata T、Singh DP、Sasaki H。 Kubo E等人。国际分子科学杂志。2018年10月9日；19(10):3093. doi:10.3390/ijms19103093。国际分子科学杂志。2018 采购管理信息：30304871 免费PMC文章。审查。
成纤维细胞生长因子-转化生长因子-β对话、内皮细胞-间充质转化和动脉粥样硬化。
Chen PY、Simons M。 Chen PY等。当前Opin Lipidol。2018年10月；29(5):397-403. doi:10.1097/MOL.0000000000000542。当前Opin Lipidol。2018 采购管理信息：30080704 免费PMC文章。审查。

查看所有类似文章

引用人

体外人主动脉内皮细胞和体外人动脉粥样硬化病变的单细胞组学特征揭示了内皮亚型的异质性和对激活扰动的反应。
Adelus ML、Ding J、Tran BT、Conklin AC、Golebiwski AK、Stolze LK、Whalen MB、Cusanovich DA、Romanoski CE。 Adelus ML等人。埃利夫。2024年4月5日；12：RP91729。doi:10.7554/eLife.91729。埃利夫。2024 采购管理信息：38578680 免费PMC文章。
动脉粥样硬化和非动脉粥样硬化性主动脉瘤细胞表型和壁重塑的miRNA调节：差异和相似性。
Terriaca S、Ferlosio A、Scioli MG、Coppa F、Bertoldo F、Pisano C、Belmonte B、Balistreri CR、Orlandi A。 Terriaca S等人。国际分子科学杂志。2024年2月24日；25(5):2641. doi:10.3390/ijms25052641。国际分子科学杂志。2024 采购管理信息：38473887 免费PMC文章。审查。
在胶质母细胞瘤中，免疫抑制性血管龛驱动巨噬细胞极化和免疫治疗抵抗。
Yang F、Akhtar MN、Zhang D、El-Mayta R、Shin J、Dorsey JF、Zhang-L、Xu X、Guo W、Bagley SJ、Fuchs SY、Koumenis C、Lathia JD、Mitchell MJ、Gong Y、Fan Y。 Yang F等。《科学进展》2024年3月；10（9）：eadj4678。doi:10.1126/sciadv.adj4678。Epub 2024年2月28日。科学进展2024。采购管理信息：38416830 免费PMC文章。
内皮细胞向间充质细胞的转变：心血管健康和疾病的轴心。
Hall IF、Kishta F、Xu Y、Baker AH、Kovacic JC。 Hall IF等人。心血管研究，2024年3月14日；120(3):223-236. doi:10.1093/cvr/cvae021。《心血管研究》2024。采购管理信息：38385523 免费PMC文章。审查。
对内皮细胞进行重新编程以增强癌症免疫治疗的能力。
克利夫兰·AH、范·Y。克利夫兰AH等人。《分子医学趋势》，2024年2月；30(2):126-135. doi:10.1016/j.molmed.2023.11.002。Epub 2023年11月30日。《2024年分子医学趋势》。采购管理信息：38040601 审查。

查看所有“被引用”文章

工具书类

1. Acevedo L、Yu J、Erdjument-Bromage H、Miao RQ、Kim JE、Fulton D、Tempst P、Strittmatter SM、Sessa WC。Nogo作为血管重塑调节器的新作用。自然医学。2004;10:382–388.-公共医学
1. Basile DP、Friedrich JL、Spahic J、Knipe N、Mang H、Leonard EC、Changizi-Ashtiyani S、Bacallao RL、Molitoris BA、Sutton TA。内皮细胞增殖和间充质转化受损导致急性肾损伤后血管稀疏。美国生理学杂志肾脏生理学。2011;300:F721–F733。-项目管理咨询公司-公共医学
1. Chang AC、Fu Y、Garside VC、Niessen K、Chang L、Fuller M、Setiadi M、Smrz J、Kyle A、Minchinton A、Marra M、Hoodless PA、Karasan A。Notch通过可溶性鸟苷酸环化酶的自分泌激活，启动房室管内皮-间充质转化。发育细胞。2011;21:288–300.-公共医学
1. Chen PY，Simons M，Friesel R.FRS2通过成纤维细胞生长因子受体1参与血小板衍生生长因子受体β介导的血管平滑肌标记基因表达调控。生物化学杂志。2009;284:15980–15992.-项目管理咨询公司-公共医学
1. Costa MA，Simon DI。再狭窄和药物洗脱支架的分子基础。循环。2005;111:2257–2273.-公共医学

出版物类型

行动

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

物质

行动
行动
行动
行动
行动

赠款和资金

R01 HL053793/HL/NHLBI NIH HHS/美国

LinkOut-更多资源

[1] Acevedo L、Yu J、Erdjument-Bromage H、Miao RQ、Kim JE、Fulton D、Tempst P、Strittmatter SM、Sessa WC。Nogo作为血管重塑调节器的新作用。自然医学。2004;10:382–388.-公共医学

[2] Acevedo L、Yu J、Erdjument-Bromage H、Miao RQ、Kim JE、Fulton D、Tempst P、Strittmatter SM、Sessa WC。Nogo作为血管重塑调节器的新作用。自然医学。2004;10:382–388.-公共医学

[3] Basile DP、Friedrich JL、Spahic J、Knipe N、Mang H、Leonard EC、Changizi-Ashtiyani S、Bacallao RL、Molitoris BA、Sutton TA。内皮细胞增殖和间充质转化受损导致急性肾损伤后血管稀疏。美国生理学杂志肾脏生理学。2011;300:F721–F733。-项目管理咨询公司-公共医学

[4] Basile DP、Friedrich JL、Spahic J、Knipe N、Mang H、Leonard EC、Changizi-Ashtiyani S、Bacallao RL、Molitoris BA、Sutton TA。内皮细胞增殖和间充质转化受损导致急性肾损伤后血管稀疏。美国生理学杂志肾脏生理学。2011;300:F721–F733。-项目管理咨询公司-公共医学

[5] Chang AC、Fu Y、Garside VC、Niessen K、Chang L、Fuller M、Setiadi M、Smrz J、Kyle A、Minchinton A、Marra M、Hoodless PA、Karasan A。Notch通过可溶性鸟苷酸环化酶的自分泌激活，启动房室管内皮-间充质转化。发育细胞。2011;21:288–300.-公共医学

[6] Chang AC、Fu Y、Garside VC、Niessen K、Chang L、Fuller M、Setiadi M、Smrz J、Kyle A、Minchinton A、Marra M、Hoodless PA、Karasan A。Notch通过可溶性鸟苷酸环化酶的自分泌激活，启动房室管内皮-间充质转化。发育细胞。2011;21:288–300.-公共医学

[7] Chen PY，Simons M，Friesel R.FRS2通过成纤维细胞生长因子受体1参与血小板衍生生长因子受体β介导的血管平滑肌标记基因表达调控。生物化学杂志。2009;284:15980–15992.-项目管理咨询公司-公共医学

[8] Chen PY，Simons M，Friesel R.FRS2通过成纤维细胞生长因子受体1参与血小板衍生生长因子受体β介导的血管平滑肌标记基因表达调控。生物化学杂志。2009;284:15980–15992.-项目管理咨询公司-公共医学

[9] Costa MA，Simon DI。再狭窄和药物洗脱支架的分子基础。循环。2005;111:2257–2273.-公共医学

[10] Costa MA，Simon DI。再狭窄和药物洗脱支架的分子基础。循环。2005;111:2257–2273.-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

你的RSS订阅源

FGF通过调控let-7 miRNA表达调节TGF-β信号转导和内皮-间充质转化

附属

FGF通过调控let-7 miRNA表达调节TGF-β信号转导和内皮-间充质转化

作者

附属

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

分子生物学数据库

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

相关信息

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

分子生物学数据库