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.2012年11月2日；287(45):37732-44.
doi:10.1074/jbc。M112.389015。 Epub 2012年9月18日。

分泌型Hsp90是前列腺癌上皮-间质转化（EMT）的新调节因子

迈克尔·汉斯 1, 克里斯塔尔·多尔, 乌达亚库马尔·戈帕尔, 杰西卡·博霍诺维奇, 阿格涅斯卡·杰齐尔斯卡·杜特尔, 卡罗拉·诺伊曼, 刘海波, 加洛韦岛, 詹妮弗·艾萨克斯
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分泌型Hsp90是前列腺癌上皮-间质转化（EMT）的新调节因子

迈克尔·汉斯等。 生物化学杂志. .

摘要

前列腺癌（PCa）是男性中最常见的恶性肿瘤，也是男性癌症相关死亡率的第二高贡献者。疾病死亡率主要是由于转移性传播，这突出表明迫切需要确定与这种进展有关的因素。基因上皮-间充质转化（EMT）程序的激活被认为是PCa进展的主要因素。EMT的启动在临床前模型中具有侵袭和转移行为，并与不良临床预后相关。细胞外Hsp90（eHsp90）在临床前模型中促进肿瘤细胞的运动和侵袭以及转移，然而，其广泛致瘤功能的机制尚不清楚。我们已经确定了eHsp90在PCa中驱动EMT事件的新的关键作用。支持这一观点的是，与血统相关的非转移性细胞系相比，更多转移性PCa细胞系表现出eHsp90表达增加。我们证明eHsp90以ERK和基质金属蛋白酶-2/9依赖的方式促进细胞运动，并将细胞形态转变为间充质表型。相反，eHsp90的抑制减弱了促运动信号，阻止了PCa迁移，并使细胞形态向上皮表型转变。最后，我们报告在原发性前列腺癌标本中发现了表面eHsp90，eHsp90-表达升高与基质金属蛋白酶-2/9转录物水平升高有关。我们得出结论，eHsp90是EMT事件的驱动因素，为其在临床前模型中促进癌症进展和转移的能力提供了机制基础。此外，eHsp90在PCa标本中新发现的表达，以及前介导基因的潜在调控，支持eHsp90-在PCa进展中的假定临床作用。

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数字

图1。
图1。
eHsp90-LRP1信号通路启动前列腺癌细胞运动。 A类，使用NPGA（1μ米)或两种eHsp90靶向抗体（SPA-830，Ab1；SPS-771，Ab2）中的任一种。B类，类似于用打乱的DU145细胞转导的分析(可控硅)shRNA或shLRP1。C类，用NPGA（1μ米，16h）以及对DU145中FAK和ERK活性的影响。天shLRP1和NPGA对FAK和ERK活性的比较。美国犹他州指未经处理的车辆控制。星号（*）指出第页≤ 0.05.
图2。
图2。
eHsp90在侵袭性更强的PCa细胞中升高，对细胞运动至关重要。 A类，通过ELISA检测指示细胞对的条件培养基中分泌的eHsp90α。每对细胞都是血统相关的，黑色的转移性衍生物更多。B类刮伤试验评估了外源性eHsp90蛋白（3天预处理，3μg/ml）对ARCaPE细胞运动的影响，或用NPGA处理ARCaPM细胞。C类、用eHsp90对上皮性P69细胞进行类似治疗，以及用NPGA对转移性对应物M12进行治疗。天shLRP1对eHsp90介导的ARCaPE细胞运动的影响。美国犹他州指未经处理的车辆控制。星号（*）表明第页值≤0.05。
图3。
图3。
eHsp90诱导与上皮细胞向间充质细胞转化一致的分子和形态学变化。 A类、ARCaPE细胞治疗指定时间（1、3或5天(d日))用外源性Hsp90蛋白和上皮E-cadherin的免疫印迹分析(电子cad)和间充质蛋白N-钙粘蛋白(N-计算机辅助设计)和扭转。细胞形态的相控图像。B类NPGA处理ARCaPM对E-和N-cadherin表达及相应细胞形态的影响。C类分析eHsp90对P69非肿瘤细胞的治疗答：D，中M12的NPGA处理分析B类.
图4。
图4。
适度升高eHsp90足以抑制E-cadherin功能并促进细胞运动。 A类,上部面板从稳定转染对照的亲代ARCaPE细胞条件培养基中检测到分泌eHsp90蛋白的ELISA分析(lacZ公司)或V5标记的eHsp90α慢病毒。下部面板总（内源性和外源性）eHsp90α的免疫印迹检测，或转导eHsp90-蛋白的V5检测。B类，ARCaPE-LacZ或ARCaPE-eHsp90细胞裂解物的免疫印迹分析证实细胞内eHsp90α水平一致(集成电路Hsp90). E-和N-cadherin及ERK活性的指示分析。C类，所示ARCaPE细胞的典型形态。ARCaPE-eHsp90未经治疗或经NPGA治疗的细胞运动分析。天，NPGA对ARCaPE-eHsp90中E-cadherin表达的影响。E类分析ARCaPE-LacZ和ARCaPE-eHsp90未处理细胞或NPGA处理指定时间的E-cadherin定位。F类ZO1在ARCaPE-LacZ和ARCaPE-eHsp90未处理细胞中的膜定位，或用NPGA处理3天。星号（*）指出第页值≤0.05。比例尺为50μm。
图5。
图5。
eHsp90调节与EMT激活相关的多个基因的表达。 A类，使用聚焦EMT qRT-PCR阵列评估ARCaPE细胞中eHsp90调控的EMT调节基因。阵列数据的样本来源于两个相同的生物复制实验。B类，E-cadherin的转录表达和阵列中显示的EMT转录效应器通过qRT-PCR在未经治疗的患者中验证(美国犹他州)ARCaPE或用eHsp90蛋白处理1、3或5天的细胞(上部面板)而对对照组或ARCaPE-eHsp90转基因细胞进行了类似的分析(下部面板).C类，两种蛋白处理的MMP转录物的蛋白水解表达增加也得到了验证(上部面板)和ARCaPE-eHsp90修饰细胞(下部面板). 定量PCR水平归一化为GAPDH表达。美国犹他州指未经处理的车辆控制。星号（*）指出第页值≤0.05。
图6。
图6。
eHsp90介导的运动和EMT事件需要MMP和ERK活性。 A类明胶酶谱分析用于测定对照或ARCaPE-Hsp90细胞中MMP-2/9的活性。对于所指示的抑制剂，在培养基收集之前将细胞处理2天。用ERK抑制剂（UO126，10μ米)，MMP-2/9抑制剂（SB-3CT，1μ米)或NPGA（1μ米).B类用以下药物治疗3天后，在ARCaPE-eHsp90中评估E-cadherin的转录表达：NPGA（1μ米)，pan-MMP抑制剂（GM6001，1μ米)，MMP-2/9抑制剂（SB-3CT，1μ米)，MMP-3抑制剂（抑制剂IV，5μ米)，或ERK抑制剂（UO126，10μ米).C类在对MMP-2/9、MMP-3或ERK进行时间依赖性抑制后，对ARCaPE-eHsp90中的E-cadherin和ERK蛋白进行免疫印迹分析。天共聚焦显微镜评估3天MMP和ERK抑制对ARCaPE-LacZ和ARCaPE-eHsp90中E-cadherin和ZO-1定位的影响。细胞被视为A类，包括pan-MMP抑制剂（GM6001，1μ米)和MMP-3抑制剂（抑制剂IV，5μ米).E类在划伤试验后评估MMP和ERK在指导eHsp90细胞运动中的作用。比例尺为50μm。美国犹他州指未经处理的车辆控制。星号（*）表示重要性第页值≤0.05。
图7。
图7。
人类前列腺切除术肿瘤标本中eHsp90蛋白和调节转录物的检测。 A、，2名患者的前列腺组织经FACS分类以检测eHsp90低的和eHsp90高的使用Hsp90α特异性藻红蛋白结合抗体的人群。在每种情况下，eHsp90的亚群高的细胞占细胞总数的～5%。患者1被确定为Gleason 3+4（T3aNO阶段），而患者2被确定为Greeason 4+5（T3bNO阶段）。B类从这些亚群中提取RNA，并通过qRT-PCR评估MMP-2、MMP-3和MMP-9的转录物。C类，提出了eHsp90介导的细胞运动和EMT事件调节机制。肿瘤分泌的eHsp90通过其受体LRP1以自分泌方式发挥作用，以转导ERK磷酸化。eHsp90-LRP1-ERK信号随后启动几个前-EMT转录因子（Snail/Zeb/Twist）和MMPs的转录。MMP激活通过几种潜在机制增强ERK持续激活和E-cadherin抑制(虚线箭头，详见正文）。这些同时发生的过程解除了对连接复合体（E-cadherin和ZO-1）的调控，导致细胞极性丧失，迁移潜能增加，并引发一系列EMT事件。
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    1. Crawford E.D.（2009）了解前列腺癌的流行病学、自然史和关键途径。泌尿学73，S4-10-公共医学
    1. Jemal A.、Siegel R.、Ward E.、Hao Y.、Xu J.、Thun M.J.（2009）《癌症统计》，2009年。加州癌症杂志临床。59, 225–249-公共医学
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