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.2012年9月12日6:64。
doi:10.3389/fncir.2012.00064。 eCollection 2012。

齿状回的内耳θ-频率输入三突触诱发海马CA1 LTP

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齿状回的内耳θ-频率输入三突触诱发海马CA1 LTP

延斯·斯蒂芬等。 前部神经电路. .

摘要

有大量证据表明,哺乳动物某些形式的外显学习需要海马CA3-CA1突触的长期增强(LTP)。虽然CA1 LTP在单突触水平上有很好的特征,但海马的传入系统如何启动这种神经可塑性现象的形成尚不清楚。在小鼠脑片制备中使用电压敏感染料成像(VSDI),我们发现,诱发的内嗅皮层(EC)θ-频率输入到齿状回,可以高效地产生神经元活动波,这些神经元活动波通过海马的整个三突触回路传播(“HTC-waves”)。我们也在体内证明了这种活动流,它在很大程度上取决于苔藓纤维对CA3突触传递的频率促进作用。认知增强剂咖啡因(5μM)和应激激素皮质酮(100 nM)会迅速增强HTC波。它们精确地遵循EC输入的节奏,涉及CA3锥体神经元的高频放电(>100 Hz),并在几秒钟内诱导NMDA受体依赖的CA1 LTP。我们的研究提供了第一个实验证据,证明EC星状细胞同步θ节律性尖峰放电,如在ECθ振荡期间发生的,有能力通过海马三突触通路驱动CA1 LTP的诱导。此外,我们提供的数据表明海马体对EC输入的基本过滤机制,并描述了一种方法来揭示海马三突触回路的“输入-输出关系”的变化。

关键词:长期有形资产;咖啡因;皮质酮;内嗅皮层;海马;θ;三突触回路;电压敏感染料。

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数字

图1
图1
心律失常(5 Hz)EC/DG输入可高效地通过海马产生神经元活动流。(A–C)用于调查的实验安排和协议如所示(D–K)1 Hz EC/DG输入的实验(N个=9片/6只小鼠)和20 Hz EC/DG输入(N个=11片/6只小鼠)(J)K)在不同的切片组中进行。(B、D、F、I)典型实验的插图和结果。打开三角形(D)表示VSDI中断4.34秒。(E)海马亚区神经元活动的量化(N个=9片/5只小鼠)。(G、I)中描述和量化的5 Hz神经元活动特征(D–F).(H)AMPA/红藻氨酸受体阻滞剂NBQX(5μM)和NMDA受体拮抗剂APV(50μM)在脑片上的浴敷完全抑制了海马神经元的活动。(J、K)量化由0.2、1、5和20 Hz EC/DG输入产生的CA1和DG神经元活动。(D,I)为了清晰起见,FPR记录道中的刺激伪影被截断。缩写:Δ前/后,荧光变化分数;F、 成像帧(相对于刺激脉冲的数量和时间规格);FP(R),场电位(记录);海马三突触回路;MF,苔藓纤维;PS,种群尖峰;ROI,关注区域;SC、Schaffer抵押品;SL,透明层;SR,辐射层;细胞外电刺激;TA,时间-共同通路。
图2
图2
(A)在BIM(0.6μM)处理的脑片中,EC/DG输入的单脉冲激发导致海马中中度、空间受限的神经元活动。在相同的实验中,BIM浓度增加到20μM会导致所有海马亚区的巨大(癫痫样)活动。(B)5 Hz EC/DG输入诱发的癫痫样活动(EA)示例。(C)在没有BIM的情况下,5 Hz EC/DG输入诱发的HTC波(N个=10片/6只小鼠)。(D)通过EC/DG输入的单脉冲激发获得的DG输入-输出曲线(N个=8片/4只小鼠)。(E)PP刺激强度低于产生DG-FDS的强度,峰值振幅约为最高可达到值的80%,也会触发HTC波(N个=7片/5只小鼠)。
图3
图3
HTC波浪体内.(A)验证其中一个电极的位置体内实验(“SP”代表“地层金字塔”)。(B)从四只小鼠记录的具有代表性的FPR痕迹、神经元活动的量化和特征。为了清晰起见,FPR记录道中的刺激伪影被截断。0.2 Hz PP刺激总是在5 Hz PP激活后5分钟进行。
图4
图4
HTC波依赖于苔藓纤维对CA3突触传递的频率促进,并通过咖啡因和皮质酮迅速增强。(A)用于调查的实验安排如所示(C–G)(“P”代表“压力”)。(B)所示调查使用的实验协议(C)E–G).(C)荧光素(Fluo;10μM)引导mGluR2激动剂DCG-IV(30μM;1 min)靶向CA3区选择性阻断苔藓纤维突触传递可消除HTC波而不影响DG活性(N个=8片/6只小鼠)。(D)在5 Hz EC/DG输入后的低频(0.05 Hz)EC/DG输出期间,HTC恢复到神经元活动通路的锁定状态(N个=6片/3只小鼠)。(E,F)咖啡因(5μM)以可逆方式快速增强HTC波(E类,N个=8片/4只小鼠;F类,N个=4片/3只小鼠)。(G)100nM皮质酮浴敷于快速放大的HTC波切片(N个=7片/4只小鼠)。(C、E、G)*<0.05(成对t吨-测试)**<0.01(成对t吨-测试)***<0.001(成对t吨-测试)。
图5
图5
HTC-Waves引发NMDA受体依赖性CA1 LTP。(A、B)用于调查的实验安排和协议如所示(C–H)(“CF”输入A类代表“连合纤维”)。(C)中总结的一项实验的插图和结果(D).(D)5 Hz EC/DG输入6 s诱发CA1 LTP,如图所示,未饱和(E)(D类,N个=13片/8只小鼠;E类,N个=8片/5只小鼠)。(F)5 Hz EC/DG输入2 s未能引起具有统计学意义的CA1 LTP[开平方;N个=7片/5只小鼠;>0.05(成对t吨-测试)]。蓝色圆圈表示中显示的数据(E).(G)Fluo(10μM)引导的APV(200μM;1分钟)特异性给药CA1区,阻断CA3-CA1突触NMDA受体,阻止CA1-LTP的形成[N个=6片/4只小鼠;N个=5片/4只小鼠用于Fluo对照实验;N个=6片/4只小鼠,用于Fluo+APV对照实验;N个=5片/3只小鼠,用于对照实验,将APV(50μM)浴应用于切片(基本原理见“材料和方法”)]。(H)在没有BIM的情况下,5 Hz EC/DG输入诱发的CA1 LTP(N个=10片/6只小鼠)。(D–F,H)**<0.01(成对或不成对t吨-测试)***<0.001(成对t吨-测试)。
图6
图6
图5所示LTP实验中EC/DG输入触发的海马亚区神经元活动.
图7
图7
(A)海马脑片中的去传入图示。(B)FDS的特性2013财年同时记录的CA1-FDS和CA1(辐射层)fEPSP的振幅。分别在100、5和50μM浓度下对环噻嗪(Cyclo)、NBQX和APV进行深施。(C)刺激脉冲后28.6ms,5Hz EC/DG输入6s,导致CA1(辐射层)fEPSP的斜率和振幅长时间增加。在5 Hz EC/DG输入40分钟后,记录描述CA1 LTP的场电位。(D)分别向CA3和CA1区域注射DCG-IV和APV的Fluo-guided给药说明。为了更好地显示压力注射盐水的扩散情况,将Ponceau S代替Fluo添加到移液管溶液中。(E)1μM DCG-IV在脑片上的浴敷降低了DG的神经元活性(N个=6片/3只小鼠)***<0.001(成对t吨-测试)。(B、C)为了清晰起见,FPR记录道中的刺激伪影被截断。

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