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.2012年5月;16(5):1038-46.
doi:10.1111/j.1582-4934.2011.01414.x。

终末期心力衰竭患者心脏移植前后IGF-2受体的升高及其潜在意义

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终末期心力衰竭患者心脏移植前后IGF-2受体的升高及其潜在意义

魏英杰等。 细胞与分子医学杂志. 2012年5月.

摘要

胰岛素样生长因子2受体(IGF-2R)上调参与血管紧张素Ⅱ诱导的成心肌细胞凋亡,并与高血压大鼠心肌细胞凋亡相关。在这里,我们检测了IGF-2R水平,并探讨了心脏移植前后终末期心力衰竭(HF)患者的潜在影响。Western blot和免疫组化检测心脏IGF-2R水平。ELISA检测血清IGF-2R和CD8水平。DNA链断裂标记和二氢乙硫铵检测分别用于检测细胞凋亡和活性氧物种。终末期心衰患者(n=11)的心脏IGF-2R水平与非心衰对照组相比升高。Leu27-IGF-2是一种IGF-2类似物,特别激活IGF-2R,可诱导新生大鼠心室肌细胞凋亡和活性氧生成。HF患者的血清IGF-2R水平显著高于非失败对照组。一个意外的观察结果是,心脏移植后血清IGF-2R水平进一步升高,在第一个月达到峰值,在心脏移植后第六个月逐渐降至接近心脏移植前的水平。心脏移植后急性排斥反应标志物CD8无变化,但IGF-2R和Granzyme B作为IGF-2R配体和CD8T淋巴细胞活化标志物共存于移植心脏。我们的初步研究表明,IGF-2R升高可能参与终末期心力衰竭的病理过程,并参与心脏移植后的急性细胞排斥反应。

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数字

图1
图1
心脏IGF-2R的Western blot分析。(A)心脏IGF-2表达的代表性Western blot分析。(B) 心脏IGF-2R表达的密度定量。计算与内标蛋白GAPDH相关的IGF-2R蛋白水平作为相对丰度。斑点密度分析显示DCM衰竭心脏(DCM-HF,n个=5)与非衰竭对照心脏(NF,n个= 5; **P(P)< 0.01). 数据表示为平均值±S.D。
图2
图2
IGF-2R的组织病理学分析。(A)苏木精和伊红染色的典型光镜结果。在非衰竭对照心脏(NF)中可以看到具有中央核的心肌纤维的正常外观,在扩张型心肌病衰竭心脏(DCM-HF)中发现间质纤维化替代。(B) 使用识别IGF-2R的单克隆抗体进行的具有代表性的光镜下IGF-2R免疫反应。在非衰竭对照心脏(NF)中观察到少量和微弱的IGF-2Rs免疫反应,但在扩张型心肌病衰竭心脏(DCM-HF)中可以看到更多和强的IGF-2免疫反应。箭头表示阳性染色。
图3
图3
Leu27-IGF-2诱导的细胞凋亡。(A) TUNEL法检测NRVM中的凋亡细胞。平行培养的细胞用DAPI染色进行核标记,以计数每个视野的细胞总数。缬氨酸治疗作为细胞凋亡的阳性对照。(B) 凋亡细胞的百分比是通过每个视野中TUNEL阳性细胞与总细胞的比率来计算的。数据来自三个独立实验的六个不同视野。数据以平均值±标准差表示**P(P)<0.01和*P(P)< 0.05未经处理的对照。#P(P)< 0.05Leu27-IGF-2处理的细胞。
图4
图4
Leu27-IGF-2诱导的活性氧生成。(A) 用荧光探针二氢乙锭(DHE)检测NRVM中ROS阳性细胞。平行培养的细胞用DAPI染色进行核标记,以计数每个视野的细胞总数。缬霉素治疗作为ROS阳性对照。(B) ROS阳性细胞的百分比是通过每个视野中ROS阳性的细胞与总细胞的比率来计算的。数据来自三个独立实验的六个不同视野。数据表示为平均值±S.D**P(P)< 0.01未经处理的对照。##P(P)< 0.01Leu27-IGF-2处理的细胞。
图5
图5
血清IGF-2R和CD8的ELISA检测。(A) DCM心力衰竭患者心脏移植前血清IGF-2R的平均水平(Bef-Htx,n个=11)显著高于非失败对照受试者(NF,n个= 11). 心脏移植后,血清IGF-2R水平进一步升高,第一个月达到峰值,第六个月逐渐下降,接近术前水平,但仍高于非失败对照组**P(P)< 0.01美国国家标准。##P(P)< 0.01Bef-Htx公司。(B) 心脏移植前DCM心力衰竭患者血清CD8的平均水平(Bef-Htx,n个=11)与非失败对照受试者(NF,n个= 11). 与心脏移植前相比,心脏移植后不同时间点的血清CD8平均水平也没有变化。数据表示为平均值±S.D。
图6
图6
免疫组织化学检测IGF-2R和颗粒酶B阳性T淋巴细胞。来自6号患者(A)的排异等级为3的活组织检查和来自4号患者(B)的排异等级为2的活组织检查的序列切片的代表性免疫组织化学染色第个心脏移植后1个月,苏木精-伊红染色显示IGF-2R和颗粒酶B阳性T淋巴细胞共存,并伴有单核细胞浸润,同部位心肌细胞损伤。

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引用人

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