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.2011年8月19:8:103。
doi:10.1186/1742-2094-8-103。

中性粒细胞活性降低可减少蛛网膜下腔出血后早期微血管损伤

维克托·弗里德里希 1, 罗伊娜·弗洛雷斯, 阿图尔·穆勒, 维娜·比, 埃利诺·伊布·皮尔施克, 法蒂玛·A·塞赫巴
附属公司

中性粒细胞活性降低可减少蛛网膜下腔出血后早期微血管损伤

维克多·弗里德里希等。 神经炎症杂志. .

摘要

背景：蛛网膜下腔出血（SAH）引起实质血管结构和功能的快速病理变化（≤100μm）。中性粒细胞在这些变化中的作用尚未确定。本研究探讨了中性粒细胞在SAH后早期微血管变化中的作用。方法：大鼠要么未经治疗，要么用长春碱或抗多形核（PMN）血清治疗，以消耗中性粒细胞，要么用限制中性粒细胞活性的吡咯烷二硫代氨基甲酸酯（PDTC）治疗。SAH是由血管内穿孔引起的。免疫组化检测中性粒细胞浸润及血管内皮和基底膜的完整性。通过原位酶谱法评估血管胶原酶活性。

结果：长春碱和抗PMN血清可减少SAH后脑血管和脑实质中性粒细胞的积聚。PDTC增加脑血管中性粒细胞的蓄积，减少脑实质的蓄积。此外，这三种药物都降低了血管胶原酶活性和蛛网膜下腔出血后血管内皮和基底膜免疫染色的损失。

结论：我们的结果表明，中性粒细胞参与SAH后早期微血管损伤，并表明减少中性粒细胞活性的治疗有助于限制SAH后微血管损伤和提高生存率。

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数字

图1
图1
SAH后中性粒细胞浸润A：典型脑切片中的中性粒细胞染色。注意，蛛网膜下腔出血后10分钟时，大脑中明显存在大量中性粒细胞，24小时时数量较少。B： 每个冠状脑切片的中性粒细胞数量。数据为平均值±sem，N=7只动物/时间点*p<0.05。
图2
图2
SAH后微血管损伤中的中性粒细胞.A:显示SAH后10分钟处死的动物的脑切片中的中性粒细胞的代表性图像。请注意，一些中性粒细胞（红色）位于IV型胶原染色的血管内（绿色；箭头），其他中性粒细胞位于脑实质内（箭头）。B： SAH和假手术动物中IV型胶原和RECA-1免疫染色的面积分数。注意，SAH动物IV型胶原和RECA-1染色的面积分数始终低于假手术动物。C： SAH后与IV型胶原和RECA-1共定位的中性粒细胞数量。填充圆：所有中性粒细胞；填充方块：仅与IV型胶原共定位的中性粒细胞；填充三角形：仅与RECA-1共定位的中性粒细胞。开放的圆圈显示假手术动物中的所有中性粒细胞。注意，在SAH后的前3小时内，与IV型胶原共定位的中性粒细胞数量多于RECA-1。数据为平均值±sem，N=5只动物/时间点，表示整个冠状脑切片的总数*与假手术动物（B）或RECA-1（C）有显著差异，p<0.05。
图3
图3
SAH后的早期生理变化：动物要么未经治疗，要么接受长春碱、抗PMN血清或PDTC治疗在SAH发生前20分钟和发生后60分钟实时测量ICP、CBF和BP（见方法）。A：注意，所有组的ICP峰值都相似，但抗PMN组ICP下降幅度显著高于未经治疗的SAH动物（25±8 mmHg）。在B中，动物组的CAF下降和60分钟恢复是相似的。在C中，各组之间的基线BF和SAH时血压的短暂升高相似。之后，长春碱和PDTC治疗的动物血压降至较低水平，但抗PMN治疗的动物没有。数据为平均值±sem，N为每个治疗组5-7只动物。*与时间匹配的未治疗SAH动物相比，差异显著（p<0.05）。
图4
图4
蛛网膜下腔血容量动物要么未经治疗，要么用长春碱、抗PMN血清或PDTC治疗，并在SAH诱导后1小时处死。测量威利斯环周围的血容量（见方法）。抗PMN而非长春花碱和PDTC治疗动物的蛛网膜下腔出血血容量显著大于未治疗的SAH动物。数据为平均值±sem，N为每个治疗组5只动物。*与时间匹配的未治疗SAH动物相比，差异显著（p<0.05）。
图5
图5
中性粒细胞的药理还原及其活性答：SAH后1小时处死的未经治疗或长春花碱、抗PMN或PDTC治疗的动物的代表性脑切片中的中性粒细胞染色。请注意，长春碱和抗PMN治疗的动物中存在较少的中性粒细胞，而PDTC治疗的大脑中存在大量中性粒细胞。B： 全冠脑切片中中性粒细胞的数量。数值为未经治疗的蛛网膜下腔出血动物的%。长春花碱和抗PMN治疗后中性粒细胞减少，PDTC治疗后中性粒细胞增加。C： SAH后的RECA-1（填充条）和IV型胶原（开放条）免疫染色。这些值是SAH动物的面积分数，作为手术动物面积分数的%；这两种参数均显示出治疗动物的趋势或显著改善。D： PDTC治疗对SAH动物中性粒细胞外渗（实质性）数量的影响。PDTC可减少中性粒细胞外渗。E： 经治疗的SAH动物胶原酶阳性谱的数量，以未经治疗SAH动物值的%表示。所有三种处理都降低了血管胶原酶活性的程度。F： PDTC治疗对蛛网膜下腔出血后血管内示踪剂渗漏的影响。数值是血管内（封闭栅）和血管外（开放栅）FITC-白蛋白沉积的面积分数。G： 显示SAH后1小时处死的未经治疗和抗PMN治疗动物的血管胶原酶活性的纹状体代表性图像。箭头：IV型胶原染色血管（红色）胶原酶活性阳性（绿色）。数据为平均值±sem。N=每个治疗组5只动物。*与未经治疗的SAH动物相比，差异显著（p<0.05）。
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