摘要
组织和器官去细胞化是一项成功的平台技术,可用于构建组织工程和再生医学的支架材料。有人认为,植入后这些材料的成功是由于剩余支架细胞外基质(ECM)成分在体内重新填充细胞表面时提供给探测细胞的分子信号。在本研究中,从成年雄性Fischer 344大鼠的食道、膀胱和小肠中提取脱细胞基质。对三种脱细胞基质(每种基质来源于其管腔表面包括上皮衬里的来源组织)进行IV型胶原和层粘连蛋白的免疫染色,以确定基底膜滞留。使用表面的扫描电子显微照片来深入了解每个脱细胞组织的表面形貌。飞行时间二次离子质谱(ToF-SIMS)用于生成每个支架表面的高分辨率质谱。这种表面敏感技术允许对材料的最外层1-2 nm进行详细的分子分析,以前已应用于在聚N-异丙基丙烯酰胺(polyNIPAAM)表面上的蛋白质薄膜和分泌ECM蛋白质。为了从复杂的ToF-SIMS数据集中提取趋势,采用了一种多元分析技术,即主成分分析(PCA)。使用此方法,创建每个表面的分子指纹,并在脱细胞食管和脱细胞小肠样品之间的PCA评分中看到分离。去细胞膀胱样本的PCA得分介于前两个去细胞样本之间。还研究了常见细胞外基质成分(IV型胶原、I型胶原、层粘连蛋白和基质)的蛋白膜。利用这些蛋白膜的主成分分析结果,对脱细胞ECM主成分分析中确定的关键片段之间的关系提出了定性假设。
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