跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2010年3月31日；30(13):4573-84.
doi:10.1523/JNEUROSCI.5597-09.2010。

血管生成因子血管生成素-1是室下区干/祖细胞上的前神经生成肽

亚历山德拉一世罗莎 1, 乔安娜·冈萨尔维斯, 路易斯·科尔特斯, 莉莉亚娜·贝纳迪诺, 乔·奥·马尔瓦, 法比安娜·阿加塞
附属机构

血管生成因子血管生成素-1是室下区干/祖细胞上的前神经生成肽

亚历山德拉一世罗莎等。 神经科学. .

摘要

在成年哺乳动物的大脑中，脑室下区（SVZ）承载着不断生成新神经元的干细胞。血管生成素-1（Angiopietin-1，Ang-1）是一种内皮生长因子，通过Tie-2受体活性在内皮细胞的分裂、存活和粘附中发挥关键作用。Tie-2在非内皮细胞，特别是神经元和干细胞中的表达表明Ang-1可能参与神经发生。在本研究中，我们研究了Ang-1在SVZ神经发生中的假定作用。来自SVZ衍生神经球的未成熟细胞表达Ang-1和Tie-2 mRNA，表明Ang-1/Tie-2系统在神经原生态位中的作用。此外，我们还发现Tie-2蛋白在神经元和胶质细胞的分化过程中保持表达。Ang-1通过激活ERK1/2（细胞外信号调节激酶1/2）丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）激酶途径触发增殖，但不诱导细胞死亡。因此，与抗Tie-2中和抗体共培养可阻止Ang-1的促增殖作用。此外，Ang-1增加了培养物中NeuN（神经元核蛋白）阳性神经元的数量，以及通过监测神经元和未成熟细胞施加特定刺激后[Ca（2+）]（i）增加的功能神经元的数量。Ang-1的前神经原效应通过Tie-2激活和随后的mTOR（哺乳动物雷帕霉素激酶靶点）动员介导。一致的是，暴露于抗Tie-2中和抗体和雷帕霉素后，神经元分化显著降低。此外，Ang-1诱导SAPK（应激激活蛋白激酶）/JNK（c-Jun N末端激酶）MAPK的激活，参与轴突发生。我们的研究显示了Ang-1的前神经原作用，突出了血管/干细胞相互作用与健康和疾病的相关性。

PubMed免责声明

数字

图1。
图1。
SVZ细胞同时表达Ang-1和Tie-2。A类SVZ神经球中Ang-1和Tie-2 mRNA的RT-PCR检测。通道1和通道2分别对应于阴性对照（非模板阴性对照）和阳性对照（小鼠胎盘组织中的总mRNA）。3号通道对应于SVZ神经球。Ang-1，～101 bp；第2级，约313 bp。B类，通过免疫印迹法检测SVZ神经球中的Tie-2和Ang-1蛋白。通道1对应于阳性对照（形成小鼠胎盘的总蛋白），通道2对应于SVZ增殖细胞。C类,D类，描绘SVZ神经球中Tie-2和Ang-1免疫反应的典型荧光共焦数字图像（Tie-2与Ang-1的红色染色；巢蛋白的绿色染色，作为未成熟细胞的标记）c1级和二氧化碳、和第1天和第2天是正方形的放大倍数C类和D类分别是。E类，Tie-2受体在电镀后2天迁移出神经球的SVZ细胞中保持不变，并在成神经细胞中表达（Tie-2的红色染色；DCX的绿色染色，未成熟神经元的标记）。F类分化7天后，SVZ细胞源性神经元中也保留有Tie-2受体（Tie-2呈红色染色；Tau蛋白呈绿色染色，为轴突标记物）。G公司,H（H），Tie-2表达分别保留在星形胶质细胞（Tie-2的红色染色；GFAP的绿色染色）和少突胶质细胞祖细胞（Tie-2的红色着色；NG2硫酸软骨素蛋白聚糖的绿色染色，少突胶质祖细胞的标记）中。箭头表示Tie-2标记的区域。Hoechst 33342染色（蓝色）用于观察细胞核。比例尺，20μm。
图2。
图2。
Ang-1调节小鼠SVZ细胞培养物中的细胞增殖，这种效应由Tie-2受体介导。A类,B类，分别在对照培养物和用500 ng/ml Ang-1处理的培养物中BrdU（红核）和Hoechst 33342染色（蓝核）的代表性荧光共聚焦数字图像。C类，条形图描绘了对照培养物和暴露于500 ng/ml Ang-1和/或5μg/ml抗Tie-2中和抗体48小时的培养物中BrdU阳性细胞的数量，以计数细胞核总数的百分比表示。数据以平均值±SEM表示***第页<0.001，使用未配对学生t吨与SVZ对照培养物的比较试验。+++第页<0.001，使用未配对学生t吨与Ang-1处理的SVZ培养物进行比较的试验。D类,E类，代表z（z）-对照SVZ培养物的共聚焦数字图像叠加显示BrdU阳性细胞（红色）Tie-2（白色染色）和DCX（绿色染色）阳性(D类)或巢蛋白（绿色染色）(E类). 箭头表示三重标签区域。Hoechst 33342染色（蓝色）用于观察细胞核。比例尺，20μm。
图3。
图3。
Ang-1调节小鼠SVZ细胞培养物中的细胞增殖，这种作用由MAPK/ERK激酶途径介导。条形图描述了BrdU阳性细胞的数量，用每个培养物、对照培养物和暴露于500 ng/ml Ang-1和/或20μ米U0126是MEK1和-2的一种高选择性抑制剂，持续48小时。数据表示为平均值±SEM***第页< 0.001, **第页< 0.01, *第页<0.05，使用未配对学生t吨与SVZ对照培养物的比较试验。+++第页<0.001，使用未配对学生t吨与Ang-1处理的SVZ培养物进行比较的试验。
图4。
图4。
Ang-1通过激活Tie-2诱导小鼠SVZ细胞培养中的神经元分化。A类,B类、对照SVZ培养物中NeuN-阳性神经元（红核）和Hoechst 33342染色（蓝核）的代表性荧光显微照片(A类)以及用Ang-1处理的培养物(B类). 比例尺，20μm。C类，条形图描述了NeuN-阳性细胞的数量，表示为每培养物、对照培养物和用500 ng/ml Ang-1和/或5μg/ml抗Tie-2中和抗体处理7天的培养物中细胞总数的百分比。数据表示为平均值±SEM***第页<0.001，使用未配对学生t吨与SVZ对照培养物的比较试验。+第页<0.05，使用未配对学生t吨与Ang-1处理的SVZ培养物的比较试验。D类,E类，βIII微管蛋白的代表性Western blots(D类)和总建筑面积(E类)-β-肌动蛋白印迹作为SVZ细胞总蛋白提取物的负荷对照物，在缺乏（对照）或存在500 ng/ml Ang-1的情况下处理7天。F类,G公司，SVZ细胞培养物的典型共焦数字图像，在没有处理的情况下处理7天（对照）(F类)或存在500ng/ml Ang-1(G公司)βIII微管蛋白（绿色染色）和GFAP（红色染色）染色。Hoechst 33342染色（蓝色）用于观察细胞核。比例尺，50μm。
图5。
图5。
Ang-1通过激活Tie-2增加小鼠SVZ细胞培养物中神经样反应细胞的生成。A类用克雷布斯溶液连续灌注SVZ培养物15分钟，并用50 m米KCl和2分钟（从10分钟到12分钟），100μ米组胺。B–D类所示为对照培养物中20个细胞反应的典型单细胞钙成像曲线(B类)，在500 ng/ml Ang-1暴露培养基中(C类)，在用500 ng/ml Ang-1和5μg/ml抗Tie-2中和抗体处理的培养物中(D类).E类条形图描述了SVZ对照培养物和暴露于Ang-1和/或Tie-2抗体7天的培养物中神经样反应细胞的百分比。数据表示为平均值±SEM**第页<0.01，使用未配对学生t吨与SVZ对照培养物的比较试验。+第页<0.05，使用未配对学生t吨与Ang-1处理的SVZ培养物的比较试验。
图6。
图6。
Ang-1通过mTOR增加小鼠SVZ细胞培养物中神经样反应细胞的生成。用克雷布斯溶液连续灌流SVZ培养物15分钟，并用50 m刺激2分钟（从5分钟到7分钟）米KCl和2分钟（从10分钟到12分钟），100μ米组胺。条形图描述了SVZ对照培养物和暴露于500 ng/ml Ang-1和/或20 n的培养物中神经样反应细胞的百分比米雷帕霉素7天。数据表示为平均值±SEM***第页<0.001，使用未配对学生t吨与SVZ对照培养物的比较试验。+++第页<0.001，使用未配对学生t吨与Ang-1处理的SVZ培养物的比较试验。
图7。
图7。
Ang-1诱导生长轴突上SAPK/JNK通路的激活。A类代表性的荧光共焦数字图像描绘了用500 ng/ml Ang-1处理6小时的培养物中的P-SAPK/JNK（绿色）、Tau蛋白（红色）和Hoechst 33342染色（蓝色细胞核）。生长轴突（P-SAPK/JNK和Tau的双重标记）用箭头表示。比例尺，20μm。B类,C类条形图描述了P-JNK阳性分支的总长度（以微米为单位）和每个神经圈的分支数。数据表示为平均值±SEM。使用数字图像（放大20倍），在两个独立培养液制备的每份盖玻片的～20个非重叠区域进行测量**第页< 0.01; ***第页<0.001，使用未配对的学生t吨与SVZ对照培养物的比较试验。+第页< 0.05,+++第页<0.001使用未配对学生t吨用于与用Ang-1处理的SVZ培养物进行比较的测试。
图8。
图8。
Tie-2在SVZ、RMS和嗅球沿线的神经元中表达。A类,B类，代表z（z）-SVZ的共聚焦数字图像叠加显示BrdU阳性干/祖细胞（BrdU的红核染色和EGFR的绿色染色）(A类)和BrdU阳性神经母细胞（BrdU的红核染色和DCX的绿色染色）(B类)两种细胞类型均表达Tie-2（白色染色）。C类，代表z（z）-RMS的共聚焦数字图像叠加显示DCX成神经细胞（绿色染色）表达Tie-2（红色染色）。D类，代表z（z）-堆叠表达Tie-2（红色染色）的TH-表达肾小球周围细胞（绿色染色）的共聚焦数字图像。箭头表示三重标记区域。Hoechst 33342染色（蓝色）用于观察细胞核。比例尺，20μm。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Abdel-Malak NA、Srikant CB、Kristof AS、Magder SA、Di Battista JA、Hussain SN。血管生成素-1通过AP-1依赖的白细胞介素-8自分泌促进内皮细胞增殖和迁移。鲜血。2008;111:4145–4154.-公共医学
    1. Acker T，Beck H，Plate KH。血管内皮生长因子和血管生成素-1和-2的细胞类型特异性表达表明星形胶质细胞在小脑血管形成中起着重要作用。机械开发2001；108:45–57.-公共医学
    1. Agasse F、Bernardino L、Silva B、Ferreira R、Grade S、Malva JO。组胺反应可用于鉴定脑室下区细胞培养中的神经元祖细胞、神经元、星形胶质细胞和未成熟细胞的功能。复兴研究2008a；11:187–200.-公共医学
    1. Agasse F、Bernardino L、Kristiansen H、Christiansen SH、Ferreira R、Silva B、S级、Woldbye DP、Malva JO。神经肽Y促进小鼠心室下区的神经发生。干细胞。2008年b；26:1636–1645.-公共医学
    1. Ambrósio AF、Silva AP、Malva JO、Mesquita JF、Carvalho AP、Carvalho CM。AMPA受体脱敏对培养大鼠海马神经元的神经元活力和[Ca2+]i变化的作用。欧洲神经病学杂志。2000;12:2021–2031.-公共医学

出版物类型

MeSH术语