Dual role for the methyltransferase G9a in the maintenance of beta-globin gene transcription in adult erythroid cells

doi:10.1073/pnas.0906769106

.2009年10月27日；106(43):18303-8.

doi:10.1073/pnas.0906769106。 Epub 2009年10月12日。

甲基转移酶G9a在维持成人红细胞β-珠蛋白基因转录中的双重作用

钱德拉·普拉卡什·查图维迪¹, 艾莉森·M·霍西, 卡门·巴利, 卡罗琳娜·佩雷兹·伊拉特塞塔, 中田义弘, 杰弗里·拉尼什, F杰弗里·迪尔沃思, Marjorie品牌

附属公司

PMID： 19822740
预防性维修识别码： PMC2775297型
内政部： 10.1073/pnas.0906769106

甲基转移酶G9a在维持成人红细胞β-珠蛋白基因转录中的双重作用

钱德拉·普拉卡什·查图尔维迪等。美国国家科学院程序. 2009.

.2009年10月27日；106(43):18303-8.

doi:10.1073/pnas.0906769106。 Epub 2009年10月12日。

作者

钱德拉·普拉卡什·查图尔维迪¹, 艾莉森·M·霍西, 卡门·巴利, 卡罗琳娜·佩雷兹·伊拉特塞塔, 中田义弘, 杰弗里·拉尼什, F杰弗里·迪尔沃思, Marjorie品牌

附属

¹加拿大安大略省渥太华市渥太华医院研究所再生医学项目斯普洛特干细胞研究中心。

PMID： 19822740
预防性维修识别码： PMC2775297型
内政部： 10.1073/pnas.0906769106

摘要

通过蛋白质组学筛选，我们确定甲基转移酶G9a是造血激活剂NF-E2的相互作用伙伴。我们发现G9a以NF-E2依赖的方式被招募到β-珠蛋白基因座，并扩散到整个基因座。虽然G9a通常被认为是一种辅抑制因子，但在分化成体红细胞时敲除该蛋白会导致成体β（maj）珠蛋白基因的抑制和胚胎β样珠蛋白基因E（y）的异常重新激活。在成体细胞中，G9a通过组蛋白H3在赖氨酸9和27处的二甲基化使E（y）保持被抑制状态，并以甲基转移酶诱导的依赖方式激活β（maj）转录。有趣的是，去甲基化酶UTX被招募到β（maj）（而不是E（y））启动子，在那里它拮抗G9a-依赖的H3K27二甲基化。总之，这些结果揭示了G9a在维持β-珠蛋白基因在分化成体红细胞中的正确表达（抑制和激活）方面的双重作用。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明没有利益冲突。

数字

**图1。**
NF-E2/p45与H3K9 MT复合物G9a/GLP相互作用。(A类)通过Abs从红系核提取物中免疫沉淀的内源性蛋白质的针对NF-E2/p45、GLP和G9a的蛋白质印迹分析。用于免疫印迹的抗体如右图所示。星号表示Ab重链。(B类)重组UBC4或NF-E2/p45蛋白在G9a IP之前与重组G9a蛋白孵育。(C类)组蛋白H3先前与p300（+p300）乙酰化或不乙酰化（-p300）被用作NF-E2/p45相互作用蛋白甲基化的底物，并提交给Edman降解测序。公司[^三H] 每个氨基酸的-甲基以cpm表示。

**图2。**
G9a在调节β*-珠蛋白*基因。(A类)在Dox诱导两个针对G9a转录物不同区域的独立MEL克隆（cl.1和cl.2）的G9a KD后，通过Western blot分析G9a和GLP的表达。(B类)如图所示，在G9a KD前后通过Western blot分析H3K9me2、H3K27me2和其他组蛋白修饰物的体细胞水平。(C类)Western blot分析H3K9me2和H3K27me2的相对富集度(B类)已量化。平均值±SD代表三个独立实验。(D类)小鼠β-珠蛋白基因座示意图。带阴影的三角形表示β*-类珠蛋白*基因。白色三角形代表不活跃的嗅觉受体基因。如图所示，用于通过RT-qPCR检测β-珠蛋白基因座转录物的探针根据G9a-KD转录物水平的变化进行标记。(E类)G9a-缺失（Dox）MEL细胞与正常（无Dox）细胞分化后，通过RT-qPCR评估指示基因的转录。成绩单是相对于GAPDH表达的，最高比率设置为1或*E类^年*与β相关的转录本*^马吉*如图所示的成绩单。平均值±SD代表三个独立的实验。(F类)在G9a-缺失（Diff.G9a-KD）和正常（Diff.）MEL细胞诱导分化之前（Nondiff.）和之后进行ChIP，以分析Pol II的RPB1亚单位的结合。如图所示，使用位于珠蛋白基因启动子（prom）、外显子2（ex2）和外显子3（ex3）内的TaqMan探针通过qPCR揭示ChIP。数值表示为最高富集度的函数，并表示至少两个重复±SD的平均值。

**图3。**
β-珠蛋白基因座上依赖G9a的组蛋白甲基化。(A类)在G9a-缺失（Diff.G9a-KD）和正常（Diff.）MEL细胞分化前（Nondiff.）和分化后进行ChIP，以分析NF-E2/p45和G9a的结合以及H3K9me2和H3K27me2的富集。使用指定探针通过qPCR检测ChIP。数值表示为最高富集度的函数，并表示至少两个重复±SD的平均值(B类)胚胎的RT-qPCR分析*E类^年*和成人β*^马吉珠蛋白*转染表达WT G9a（WT）或MT-缺陷G9a突变体（Mut.）的DNA构建物后，在G9a KD细胞分化时进行基因表达。这些结构通过沉默突变（序列可用于*SI文本*). 成绩单值相对于GAPDH表示，最高比率设置为1。平均值±SD代表三个独立的实验。在相同的条件下进行ChIP，以分析H3K9me2和H3K27me2在*E类^年珠蛋白*发起人。qPCR检测出ChIP。数值表示为最高富集度的函数，并表示至少两个重复±SD的平均值(C类)Dox诱导分化MEL细胞的UTX KD后，用Western blot分析UTX和TFIIHp89蛋白水平。在*E类^年*和β*^马吉-珠蛋白*在UTX缺失（Diff.UTX KD）与正常（Diff.）MEL细胞中分化后，通过RT-qPCR评估基因。成绩单值相对于GAPDH表示，最高比率设置为1。在UTX缺失的MEL细胞与正常MEL细胞分化后进行ChIP，以分析UTX的结合和H3K27me2的富集。使用位于启动子的探针，通过qPCR显示ChIPE类^年和β*^马吉珠蛋白*基因。数值表示为最高富集度的函数，并表示至少两个重复±SD的平均值。

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

激活剂介导的MLL2甲基转移酶复合物向β-珠蛋白位点的募集。
Demers C、Chaturvedi CP、Ranish JA、Juban G、Lai P、Morle F、Aebersold R、Dilworth FJ、Groudine M、Brand M。 Demers C等人。分子细胞。2007年8月17日；27(4):573-84. doi:10.1016/j.molcel.2007.06.022。分子细胞。2007 PMID：17707229 免费PMC文章。
通过H3K9甲基转移酶G9a/KMT1C和H3K4脱甲基酶Jarid1a/KDM5A的协同作用维持基因沉默。
Chaturvedi CP、Somasundaram B、Singh K、Carpenedo RL、Stanford WL、Dilworth FJ、Brand M。 Chaturvedi CP等人。美国国家科学院院刊2012年11月13日；109(46):18845-50. doi:10.1073/pnas.1213951109。Epub 2012年10月29日。美国国家科学院院刊，2012年。 PMID：23112189 免费PMC文章。
红系激活剂NF-E2、TAL1和KLF1在人类成人β-珠蛋白基因座LCR HSs的形成中发挥作用。
Kim YW、Yun WJ、Kim A。 Kim YW等人。国际生物化学与细胞生物学杂志。2016年6月；75:45-52. doi:10.1016/j.bicel.2016.03.013。Epub 2016年3月26日。国际生物化学与细胞生物学杂志。2016 PMID：27026582
分化红细胞和p45 NF-E2基因敲除小鼠中β-珠蛋白活性染色质中心的形成。
Kooren J、Palstra RJ、Klous P、Splinter E、von Lindern M、Grosveld F、de Laat W。 Kooren J等人。生物化学杂志。2007年6月1日；282(22):16544-52. doi:10.1074/jbc。M701159200，Epub 2007年4月11日。生物化学杂志。2007 PMID：17428799
染色质环作为改变红系基因表达的靶点。
Krivega I，院长A。 Krivega I等人。 Ann N Y科学院。2016年3月；1368(1):31-9. doi:10.1111/nyas.13012。Epub 2016年2月25日。 Ann N Y科学院。2016 PMID：26918894 免费PMC文章。审查。

查看所有类似文章

引用人

H3K9me2的作者和读者在细胞周期中形成了不同的蛋白质网络，其中包括H3K9拟态的候选者。
Pollin G、De Assuncao TM、Doria Jorge S、Chi YI、Charlesworth MC、Madden B、Iovanna J、Zimmermann MT、Urrutia R、Lomberk G。 Pollin G等人。 Biosci Rep.2023年10月31日；43（10）：英国标准20231093。doi:10.1042/BSR20231093。 Biosci报告2023。 PMID：37782747 免费PMC文章。
PRMT5在三阴性乳腺癌中触发糖皮质激素诱导的细胞迁移。
努雷丁·LM、阿伯莱恩·J、苏米利奥瓦·加内斯·A、杰奎梅顿·J、范·TH、马兰戈尼·E、施尼茨勒·A、比切一世、巴德兰·B、特雷丹·O、侯赛因·N、勒罗曼塞·M、保拉德·C。 Noureddine LM等人。生命科学联盟。2023年8月3日；6（10）：e202302009。doi:10.26508/lsa.202302009。打印日期：2023年10月。生命科学联盟。2023 PMID：37536978 免费PMC文章。
CHCHD2/Sirt1共抑制因子参与G9a介导的RNase H1表达调控，以控制R-loop。
李磊，吴毅，戴坤，王琦，叶斯，石琦，陈姿，黄永春，赵伟，李磊。李磊等。细胞洞察。2023年6月4日；2(4):100112. doi:10.1016/j.cellin.2023.100112。eCollection 2023年8月。细胞洞察力。2023 PMID：37388553 免费PMC文章。
赖氨酸甲基转移酶、G9a（EHMT2）和GLP（EHMT1）的存在影响TNFα对脂肪细胞的作用。
Able AA、Richard AJ、Stephens JM。 Able AA等人。生物学（巴塞尔）。2023年4月30日；12(5):674. doi:10.3390/biology12050674。生物学（巴塞尔）。2023 PMID：37237488 免费PMC文章。
使用改进的大规模平行报告试验对RE1沉默子的全基因组功能进行表征。
Mouri K、Dewey HB、Castro R、Berenzy D、Kales S、Tewhey R。 Mouri K等人。细胞基因组。2022年12月16日；3(1):100234. doi:10.1016/j.xgen.2022.100234。eCollection 2023年1月11日。细胞基因组。2022 PMID：36777181 免费PMC文章。

查看所有“被引用”文章

参考文献

1. Li B、Carey M、Workman JL。染色质在转录过程中的作用。单元格。2007;128:707–719.-公共医学
1. Mikkelsen TS等人。多能干细胞和谱系提交细胞中染色质状态的全基因组图。自然。2007;448:553–560.-项目管理咨询公司-公共医学
1. Barski A等人。人类基因组中组蛋白甲基化的高分辨率分析。单元格。2007;129:823–837.-公共医学
1. Shilatifard A.组蛋白H3赖氨酸4（H3K4）甲基化的分子实现和生理作用。当前操作细胞生物学。2008;20:341–348.-项目管理咨询公司-公共医学
1. Tachibana M等人。G9a组蛋白甲基转移酶在常染色组蛋白H3赖氨酸9甲基化中起主导作用，对早期胚胎发生至关重要。基因发展2002；16:1779–1791.-项目管理咨询公司-公共医学

出版物类型

行动

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

物质

行动
行动
行动
行动
行动
行动

关联数据

行动
- 在PubMed中搜索
- 在GEO中搜索

赠款和资金

加拿大卫生研究院/加拿大

LinkOut-更多资源

[1] Li B、Carey M、Workman JL。染色质在转录过程中的作用。单元格。2007;128:707–719.-公共医学

[2] Li B、Carey M、Workman JL。染色质在转录过程中的作用。单元格。2007;128:707–719.-公共医学

[3] Mikkelsen TS等人。多能干细胞和谱系提交细胞中染色质状态的全基因组图。自然。2007;448:553–560.-项目管理咨询公司-公共医学

[4] Mikkelsen TS等人。多能干细胞和谱系提交细胞中染色质状态的全基因组图。自然。2007;448:553–560.-项目管理咨询公司-公共医学

[5] Barski A等人。人类基因组中组蛋白甲基化的高分辨率分析。单元格。2007;129:823–837.-公共医学

[6] Barski A等人。人类基因组中组蛋白甲基化的高分辨率分析。单元格。2007;129:823–837.-公共医学

[7] Shilatifard A.组蛋白H3赖氨酸4（H3K4）甲基化的分子实现和生理作用。当前操作细胞生物学。2008;20:341–348.-项目管理咨询公司-公共医学

[8] Shilatifard A.组蛋白H3赖氨酸4（H3K4）甲基化的分子实现和生理作用。当前操作细胞生物学。2008;20:341–348.-项目管理咨询公司-公共医学

[9] Tachibana M等人。G9a组蛋白甲基转移酶在常染色组蛋白H3赖氨酸9甲基化中起主导作用，对早期胚胎发生至关重要。基因发展2002；16:1779–1791.-项目管理咨询公司-公共医学

[10] Tachibana M等人。G9a组蛋白甲基转移酶在常染色组蛋白H3赖氨酸9甲基化中起主导作用，对早期胚胎发生至关重要。基因发展2002；16:1779–1791.-项目管理咨询公司-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

甲基转移酶G9a在维持成人红细胞β-珠蛋白基因转录中的双重作用

附属

甲基转移酶G9a在维持成人红细胞β-珠蛋白基因转录中的双重作用

作者

附属

摘要

利益冲突声明

数字

类似文章

引用人

参考文献

出版物类型

MeSH术语

物质

关联数据

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

医疗

分子生物学数据库

摘要

利益冲突声明

数字

类似文章

引用人

参考文献

出版物类型

MeSH术语

物质

关联数据

相关信息

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

医疗

分子生物学数据库