跳到主页面内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https公司

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2008年12月15日；68(24):10377-86.
doi:10.1158/0008-5472.CAN-08-1444。

生长抑制物p12CDK2-AP1诱导的上皮-间充质转化促进肿瘤细胞局部侵袭，但抑制远处集落生长

Takanori Tsuji先生 1, 茨瓦拉吉, Kaori Shima公司, 妙芬·G·胡, Miki Katsurano先生, 佐佐木明, 胡国福
附属公司

生长抑制物p12CDK2-AP1诱导的上皮-间充质转化促进肿瘤细胞局部侵袭，但抑制远处集落生长

Takanori Tsuji先生等。 癌症研究. .

摘要

上皮-间充质转化（EMT）被认为是转移的关键，这是一个多步骤过程，包括局部浸润、灌注、外渗和远处增殖。然而，EMT是否真的发生以及它对转移的重要性仍存在争议。我们研究了EMT在转移的各个步骤中的参与，发现p12（CDK2-AP1）是转化生长因子β的下游效应器，通过促进Twist2的表达诱导仓鼠颊囊癌-1细胞的EMT。EMT细胞侵袭性增加，但转移表型减少。接种s.c.后，EMT和非EMT细胞均能建立原发性肿瘤，但只有EMT细胞侵入邻近组织和血管；然而，两个细胞都没有形成肺转移瘤。静脉接种后，只有非EMT细胞发生肺转移。此外，皮下接种这两种细胞的混合物会导致这两种类型的细胞的灌注，并形成非EMT细胞的肺转移。我们的研究结果为EMT在肿瘤转移中的作用提供了一个新的模型。我们发现EMT和非EMT细胞协同完成自发转移过程。因此，我们假设EMT细胞负责降解周围基质，从而导致侵袭和灌注。然后，非EMT细胞进入血流并在次级部位重建菌落。

PubMed免责声明

数字

图1
图1
p12反义抑制TGF-β诱导的HaCaT细胞EMT。A、 HaCaT细胞p12反义转染物的相控图像。Zn诱导的p12反义转染剂（ip12（−）HaCaT）和载体控制转染剂+-HaCaT）在25μM ZnSO存在下在DMEM+5%FBS中培养4，使用或不使用TGF-β（10 ng/ml）和EGF（30 ng/ml）混合物处理48 h。B类Western blotting分析载体和p12反义转染体中E-cadherin和p12蛋白水平，以β-actin作为负荷控制。
图2
图2
p12在HCPC-1细胞中诱导EMT。A类，载体和p12转染剂的相控图像。p12的表达改变了细胞形态，从多边形上皮结构（左）到纺锤体样纤维母细胞结构（中）。p12和载体转染体的混合培养相互分离（右）。B类，载体和p12转染体混合培养的荧光图像，如所示A类，右侧面板。DsRed和GFP产生的红色和绿色荧光分别代表载体和p12转染体。C类qRT-PCR分析载体和p12转染体以及用5-Aza-cdR处理的p12转导体中E-cadherin mRNA水平（左）。HCPC-1亲代细胞以及以β-肌动蛋白作为负载对照的载体和p12转染子中的桥蛋白激酶、N-钙粘蛋白、E-钙粘蛋白和波形蛋白水平的蛋白质印迹分析（右）。天载体和p12转染体中E-cadherin（绿色）和vimentin（红色）的IF。
图3
图3
Dco-1诱导Twist2的表达，调节EMT。A类已知E-cadherin阻遏物的RT-PCR分析。p12诱导Twist2表达。B类，载体和p12转染体中Twist2蛋白的Western blotting分析。C类、载体和p12转染体中Twist 2蛋白的IF。细胞核用DAPI染色。细胞质和细胞核均出现扭曲（箭头所示）。天，敲除Twist 2使细胞形态恢复为上皮样结构（箭头）。将Twist2特异性合成siRNA和编码GFP的质粒共同转染到p12转染体中（无GFP）。因此，Twist-2 siRNA-转染细胞被标记为GFP表达。
图4
图4
p12诱导的EMT增强细胞运动和肿瘤局部侵袭。A类，载体和p12转染体在在体外细胞迁移试验。B类在相差显微镜下测量了总共100个细胞在24小时内的平均迁移距离。C类H&E染色显示来源于p12转染剂（EMT）而非载体转染剂的原发性肿瘤局部浸润。肿瘤细胞以星号表示。肿瘤细胞（以星号表示）和血管（以箭头表示）的双IF显示，仅在p12转染体衍生的肿瘤组织中存在肿瘤细胞的灌注。两组动物的肺部宏观照片和H&E检查均未发现肺转移（n=12）。天对从荷瘤小鼠血液样本中采集的GFP和DsRed基因组DNA进行PCR分析。
图5
图5
非EMT、EMT和MET细胞通过静脉接种建立肺转移的能力。A类宏观照片和H&E染色显示，所有动物（n=6）均因静脉接种载体转染物（非EMT细胞）而发生了肺转移。静脉接种p12转染剂（EMT细胞）和E-cadherin再表达的p12转导剂（MET细胞）后，所有动物均未发生肺转移。B类，E-cadherin的Western blotting分析证实了E-cadherin的重新表达。C类E-cadherin再表达使p12转染者的成纤维细胞结构恢复为上皮结构，表明MET过程。
图6
图6
EMT和非EMT细胞的混合物完成了整个自发转移过程。A类，原发肿瘤组织。肿瘤边缘H&E染色显示侵袭性表型。GFP和DsRed的双IF显示侵袭前沿主要由p12转染子组成（绿色），但肿瘤中心主要由载体转染子组成（红色）。B类PCR检测血样和肺转移瘤中的DsRed和GFP DNA。血流中检测到GFP和DsRed，但在肺转移灶中仅检测到DsRed。C类宏观照片和H&E染色显示肺转移。天肺转移瘤中DsRed、GFP和E-cadherin的荧光图像和IHC染色。GFP未检测到，但DsRed和E-cadherin均强烈表达，表明它们来源于载体转染体（非EMT细胞）。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Berx G、Raspe E、Christopori G、Thiery JP、Sleeman JP。术前转移？癌症形态发生过程综述。临床实验转移。2007;24:587–97.-公共医学
    1. Shook D，Keller R.上皮-间质转化在早期发育中的机制、力学和功能。机械开发2003；120:1351–83.-公共医学
    1. Duband JL，Monier F，Delannet M，Newgreen D.神经嵴发育过程中的上皮-间质转换。《安娜特学报》。1995;154:63-78。-公共医学
    1. Hugo H、Ackland ML、Blick T等。癌进展中的上皮-间充质和间充质-上皮转变。细胞生理学杂志。2007;213:374–83.-公共医学
    1. Pantel K，Brakenhoff RH.解剖转移级联。Nat Rev癌症。2004;4:448–56.-公共医学

出版物类型

MeSH术语