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.2008年8月;29(8):942-50.
doi:10.1111/j.1745-7254.20080830.x。

抗细胞表面F1F0 ATP合成酶单克隆抗体对HUVEC和肿瘤细胞的双重作用

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抗细胞表面F1F0 ATP合成酶单克隆抗体对HUVEC和肿瘤细胞的双重作用

张霞(Xia Zhang)等。 中国药理学报. 2008年8月.

摘要

目标:制备抗细胞表面F1F0 ATP合酶(ATP酶)的单克隆抗体(McAb),并观察其对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和肿瘤细胞的抗肿瘤活性。

方法:通过聚乙二醇介导的融合产生分泌抗ATP酶单克隆抗体的杂交瘤细胞,并通过ELISA进行筛选。单克隆抗体的特异性通过免疫荧光和共焦成像以及流式细胞仪分析来证明。用单克隆抗体阻断HUVEC和人乳腺癌MDA-MB-231细胞表面ATP酶后,用ATP检测试剂盒和CellTiter96 AQueous Assay(MTS)检测抗体对细胞外ATP修饰和细胞增殖的影响。联合阿霉素的细胞毒性试验和MDA-MB-231细胞的细胞迁移试验用于测定抗肿瘤活性。最后,采用HUVEC试管形成试验检测单克隆抗体178-5G10的抗血管生成作用。

结果:制备了抗ATP酶β亚基的单克隆抗体(McAb178-5G10),并研究了其对HUVEC和肿瘤细胞的反应性。我们证明,单克隆抗体178-5G10在细胞表面与ATP酶结合,从而能够抑制ATP合成。这种抗体还可以阻止HUVEC和MDA-MB-231细胞的增殖。此外,单克隆抗体178-5G10增强了阿霉素的抑瘤作用(P<0.05),在跨孔分析中抑制了MDA-MB-231的迁移(P<0.01),并干扰了Matrigel上HUVEC管的形成(P<0.01。

结论:单克隆抗体178-5G10优先与细胞表面ATP酶结合,阻断ATP合成,并显示抗血管生成和抗肿瘤作用。

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