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.2008年12月;14(12):1999-2007年。
doi:10.1089/ten.tea.2007.0344。

体外快速增殖的人关节软骨细胞中II型胶原合成和分泌的持续性

附属机构

体外快速增殖的人关节软骨细胞中II型胶原合成和分泌的持续性

Aboulghassem Shahdadfar公司等。 组织工程A部分. 2008年12月.

摘要

用于组织工程的关节软骨细胞(AC)在体外扩增后迅速关闭II型胶原(COL2)的合成。我们希望充分抑制这一过程,以在不损失COL2合成的情况下获得治疗上有用的AC数量。为此,AC在自体细胞外基质(CA-ECM)中指定为软骨细胞的结构中在其自身的细胞外基质(ECM)上扩增。在这里,AC保持圆形,并迅速增殖。培养13-15天后,可以从软骨活检中获得40 x 10(6)个细胞(中位数)。实时RT-PCR显示此时COL2A1 mRNA的生成减少,但持续存在。流式细胞术显示细胞内高水平的COL2,免疫金电子显微镜显示新合成ECM中高密度的有序COL2纤维。有趣的是,检测到高水平的COL1A1 mRNA和细胞内蛋白,但在ECM中未发现COL1。COL2A1 mRNA的缓慢丢失与COL2调节转录因子SOX9 mRNA的丢失平行。染色质免疫沉淀分析无法确定表观遗传组蛋白修饰,从而解释观察到的COL2合成变化。因此,CA-ECM策略允许AC增殖到临床有用的数量,同时保持COL2的合成和分泌。这种策略可能会改进关节表面的组织工程。

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