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.2007年11月28日；2（11）：e1241。
doi:10.1371/journal.pone.0001241。

线粒体核糖体RNA在小鼠卵母细胞和受精卵中的亚细胞分布

Youichirou Ninomiya先生 1, 一枝静子
附属公司

线粒体核糖体RNA在小鼠卵母细胞和受精卵中的亚细胞分布

Youichirou Ninomiya先生等。 公共科学图书馆一号. .

摘要

据报道，线粒体核糖体RNA（mtrRNAs）在除哺乳动物外的一些后生动物的卵母细胞和合子的生殖细胞决定簇中进行胞外易位和定位。为了确定mtrRNA是否也在哺乳动物中定位，采用全山原位杂交（ISH）检测了线粒体编码RNA在小鼠卵母细胞和受精卵中的表达和分布。12S和16S rRNA主要分布在成熟卵母细胞的动物半球。受精后，这种分布模式向受精卵的第二极体重新排列。mtrRNA的数量在第一次卵裂前后减少，在第二次卵裂期间保持低水平，在第三次卵裂后增加。在整个检测阶段，12S rRNA的染色强度弱于16S rRNA。在锶激活的单倍体孤雌生殖中观察到类似的16S rRNA分布动力学，表明分布重排不需要精子成分。16S rRNA的分布与线粒体特异性热休克蛋白70的分布不一致，表明mtrRNA是从线粒体转位的。ISH扫描电镜证实小鼠卵母细胞中存在线粒体外mtrRNA。氯霉素（CP）治疗晚期原核期合子扰乱了首次卵裂，因为2细胞胚胎的卵裂球大小差异大于正常值。三分之二的CP处理的合子在2细胞或3细胞阶段被截留，即使CP被洗掉。这些发现表明，线粒体外的mtrRNA定位于小鼠卵母细胞中，并通过合子的分裂正确地将细胞质分离到卵裂球中。

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数字

图1
图1。16S rRNA在小鼠卵母细胞和受精卵中的亚细胞分布。
高倍放大MII卵母细胞（A）显示16S rRNA在动物半球的主要分布（星号：MII纺锤体的位置）。16S rRNA的分布被重排为前核周围（V形），向合子（B）上的极体（星号）聚集，在第一次分裂（C）周围强度降低。16S rRNA的数量在第二次切割（D和E）期间保持较低水平，在第三次切割（F）后增加。酒吧===========================================================10微米
图2
图2。线粒体特异性热休克蛋白70在小鼠卵母细胞和受精卵中的亚细胞分布。
MtHSP70均匀分布于细胞质（A和D）。抗微管蛋白（B）和Hoechst 33342（C）荧光显示卵母细胞的方向，与抗mtHSP70免疫荧光（A）同时显示。抗-mtHSP70免疫荧光仍然均匀分布在合子的细胞质中，除了缺乏免疫荧光的原核（E）。第一次卵裂（F）后，免疫荧光开始在细胞质的某些部位聚集。酒吧===========================================================10微米
图3
图3。16S rRNA在亚内质细胞器水平的定位。
ISH的电子显微镜显示，16S rRNA在MII卵母细胞的亚内质细胞器水平上定位。由于标本是切片的，所以在SEM图像中，只有暴露在外的细胞器内部可以被视为凹面结构。金胶粒（15纳米，黑色小点）通过背散射电子探测器可见，并可见其积聚在线粒体（a）的嵴（V形）上。细胞质周围几乎没有这样的颗粒。然而，在MII卵母细胞的特定区域，金胶粒在线粒体外扩散（B）。颗粒中的细胞质比线粒体（人字形）内部的细胞质更丰富。与线粒体的结构内表面不同，内质网的内部（星号）表面光滑，没有颗粒。酒吧===========================================================0.5微米
图4
图4。16S rRNA在小鼠孤雌生殖中的亚细胞分布。
锶激活的16S rRNA ISH在体外孤雌生殖的分布模式与体内合子。激活（0小时）后立即在卵母细胞的第二极体（星号）挤压部位周围可见强烈分布（A）。在极体挤压完成后，16S rRNA的分布被重新排列为原核周向孤雌体（B）上的极体（星号）聚集。激活6小时后，ISH染色强度已经开始下降（C）。第一次切割后，染色强度较弱（D）。酒吧===========================================================10微米
图5
图5。线粒体翻译抑制剂对原核晚期合子的影响。
24小时后2细胞期胚胎的卵裂球在体外在含有1%二甲基亚砜载体对照物（A）或200µg/mL CP（B）的培养基中，这两个处理显示出大小差异。在显微照片上追踪每个卵裂球的轮廓，然后使用ImageJ软件将其转换为区域。对面积的成对值进行处理，以计算“成对卵裂球的平均大小”和“成对胚裂球之间的大小差异”，并绘制在散点图（C）上。Mann-Whitney的单位测试表明，两个处理的“平均大小”没有显著差异(单位===========================================================206，显著性水平0.263），但它们之间的“大小差异”存在统计差异(单位===========================================================150，显著性水平0.021）。原始数据集见表S1。MitoTracker红H2-用1%的二甲基亚砜载体对照物（D）或200µg/mL的CP（E）治疗24小时后，在2细胞期CMXRos染色表明线粒体氧化能力没有明显的延迟迹象。极体（星号）也表示保留活性线粒体===========================================================10微米
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    1. Rushlow C，Arora K。果蝇胚胎的背腹极性和模式形成。精液细胞生物学。1990;1:137–149.-公共医学
    1. 马霍瓦尔德美联社。果蝇种质的组装。Int Rev细胞。2001;203:187–213.-公共医学
    1. 丁D，利普希茨HD。定位RNA及其功能。生物论文。1993;15:651–658。-公共医学