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.2007年11月23日;374(2):506-16.
doi:10.1016/j.jmb.2007.09.044。 Epub 2007年9月20日。

敲除人Oxa11会损害F1Fo-ATP合成酶和NADH:泛醌氧化还原酶的生物生成

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敲除人Oxa11会损害F1Fo-ATP合成酶和NADH:泛醌氧化还原酶的生物生成

卢卡斯·斯蒂布雷克等。 分子生物学杂志. .

摘要

Oxa1蛋白是进化上保守的Oxa1/Alb3/YidC蛋白家族的创始成员,该家族参与线粒体、叶绿体和细菌中膜蛋白的生物生成,最初是通过酵母oxa1突变体呼吸生长缺陷的部分功能互补来鉴定的。在这里,我们证明了表观分子量为42 kDa的内源性人类Oxa1l和Oxa1l-FLAG嵌合蛋白仅定位于HEK293细胞中的线粒体。此外,发现人Oxa1l是一种完整的膜蛋白,使用二维蓝色天然/变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,大多数蛋白质被鉴定为600-700 kDa复合物的一部分。HEK293细胞中稳定的短发夹(sh)RNA介导的Oxa1l敲除导致F(1)F(o)-ATP合成酶的稳态水平和ATP水解活性显著降低,NADH:泛醌氧化还原酶(复合物I)的水平和活性中度降低。然而,在蓝色天然免疫印迹上未检测到相应亚复合物的显著积累。有趣的是,Oxa1l蛋白的耗竭并未对细胞色素c氧化酶或细胞色素bc(1)复合物的组装或活性产生不利影响。综上所述,我们的结果表明,人类Oxa1l代表F(1)F(o)-ATP合成酶和NADH:泛醌氧化还原酶正确生物生成所需的线粒体完整膜蛋白。

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