酵素法食品分析
使用酶法的F-试剂盒(试剂)广泛用于一般定量分析。
食品分析领域有果实、果汁类、各种酒精饮料(葡萄酒、啤酒、酒、烧酒等)、
并且,从鸡蛋、乳制品到肉加工制品的日用食品的商品评价、品质管理等被广泛利用。
酶法生物成分分析及食品分析
“酶法分析”作为最可靠的方法之一被世界认可
作为食品分析法的酶法分析,在国际的公定法和机构等中相继采用、导入。
被采用的代表性国际机构如下。
- ISO(International Standardization Organization):国际标准
- AOAC(American Association of Analytical Chemists):美国分析学会
- IFU(International Federation of Fruit Juice Producers):国际果汁制造业联合会
- IDF(International Dairy Federation):国际奶酪畜牧业联盟
- EBC(European Brewing Convertion):欧洲啤酒酿造者团体
- 欧盟(European Community):欧洲共同体联盟
注:德国等欧洲各国,日本的酵素法分析也被公开化。
“酶法分析”与HPLC相比有同等的灵敏度和精度,更有优势
天然成分分析采用酶法试剂(F-试剂盒用作盲检)和HPLC法分析
在共同研究中进行比较研究的结果表明,酶法的特点是以下几点更为突出。
- 降低设备成本
- 不排放有害物质
- 无需经过训练的分析技术
- 即使没有标准物质也可以定量
F-试剂盒酶法分析试剂的便利性
从分析方的角度来看,F-套件也承认了很多优点,并提供了出色的分析结果。
- 测量项目的多样性:F-套件目前有32种套件。
- 通用性:使用通用分光光度计(也可应用于自动分析装置)。
- 高灵敏度和高可靠性:保持和保证高水平的质量管理。
- 节省时间:试剂盒化使试剂制备简单,可立即投入分析操作。
- 对应多种试样:记载了丰富的用方法预处理样品的例子。
- 控制用标准液附件:几乎所有配套元件都附有,非常适合日常操作的确认。
套件一般信息
分光光度计的 测量条件 |
测量原理 |
确认了具有催化作用酶的反应在化学计量上是正确的 确立了分子吸光系数、酶的高特异性(物质选择性高) 是以使用为基础的分光光度分析法。 |
UV测量 |
大多数F-试剂盒采用UV法(紫外吸光度测定法)进行定量。 在340nm测量辅酶NADH或NADPH的吸光度,求增减。 另一种方法可以在365nm或334nm测量。 |
比色法 |
在测定反应体系中产生的发色物质的波长(在各个测定项目中不同的波长) 测定样品浓度。
L-抗坏血酸 |
:578nm |
胆固醇 |
:405nm |
谷氨酸 |
:492nm |
D-羟基丁酸 |
:492nm |
山梨糖醇/木糖醇 |
:492nm |
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套件内容和 试剂配制 |
包装 |
大多数试剂盒一个试剂盒大约可以测量30次 此次数包括检体用、空白用、控制用的次数。 (详情请参阅价目表),模板名称将采用不同的格式 |
套件配置 |
・酵素 ・辅酶 ・缓冲液 许多套件都附有分析用控制溶液。 |
到期日期 |
所有试剂都以稳定的形状包装。 生物农场公司保证至少3个月(正常有效期为6个月以上)。 |
溶解后 到期日期 |
在试剂中加入蒸馏水时,溶解后试剂的稳定性变短。 试剂配制(溶解)后的缓冲液或辅酶溶液,为了维持使用安全 一般情况下,请用+2℃~+8℃保冷或零下20℃的冷冻保存。 |
样品的 制备方法 |
样品的预处理 |
用分光光度计测定时,必须是透明的样品溶液。 (稍微浑浊没有问题) 果汁和葡萄酒可以直接测定,牛奶等除蛋白处理 中所述修改相应参数的值。 另外,样品制备的详细情况请参照配套元件附带的说明书。 |
测量操作 |
测量程序 |
- 将蒸馏水分注到试剂瓶中,溶解试剂。
- 将试剂溶液和样品溶液分别分注到培养皿中。
- 约3分钟后用分光光度计测定吸光度E1。
- 将酶的悬浮液分注到培养皿中。
- 孵育约10分钟后(酶反应后),用分光光度计
测量吸光度E2。
- 浓度根据兰伯特·贝尔定律计算。
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测量范围 准确性 |
最终测量范围 |
约0.04~0.4g/L,根据配套元件的种类不同而不同。 |
特异性 |
根据套件的种类不同而不同。 |
检测极限 |
0.1~1mg/L,根据试剂盒的种类不同而不同。 |
灵敏度 |
根据套件的种类不同而不同。 |
精度 |
距测量中值5%以内(标准偏差) |
分析装置 器具 使用水
| 装置 |
分光光度计340nm、(405nm、492nm、578nm,因分析项目而异) 可读取装置,334nm或365nm(可替代340nm) |
器具 |
丘比特(单元)示例:显示子程序丘比特 护板支架 移液管(0.020~1ml用) |
水 |
再蒸馏水(或精制蒸馏水、新蒸馏水) |
罗什公司和生物农场公司获得了ISO9001的认证。
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