酶测定法（比色法）
鸡蛋、鸡蛋制品等食品，蛋利口酒、面食、面包制品、脂肪、油、肉制品、化妆品等产品中胆固醇的定量。
测定项目（胆固醇）
胆固醇是动物类固醇中最重要的一种，是高等动物细胞膜的重要成分，也是所有类固醇激素的前体物质。
胆固醇在所有动物脂肪中都能看到。是蛋黄的重要成分，其内容量相对恒定，因此经常用于测定含有蛋黄的面包制品、面类、利口酒等食品的鸡蛋量。
胆固醇是能够以食物的形式部分摄取的营养学上重要的东西。
原理（文献1）
特异性
胆固醇氧化酶会氧化胆固醇和第3位的碳原子羟基位于β部位的甾醇（除去拉诺甾醇）。因此，在含有植物的试样的分析中，也测定了几个植物甾醇。
The International Union for Pure and Applied Chemistry（IUPAC）在动物脂肪的分析中作为胆固醇，在植物脂肪样品的分析中β-建议将分析结果计算为甾醇（2）。
灵敏度和测量极限
测量灵敏度基于试样量（v）为0.400ml时的极限0.005吸光度。相当于7℉/l（样品溶液）的胆固醇浓度。
20℉/l的测量极限来源于最大样品量（v）为0.400ml时的吸光度变化量0.030。
线性
测量的线性为8μg胆固醇/测定（20℉胆固醇/l样品溶液：v=0.400ml）〜160μg胆固醇/测定（0.4g胆固醇/l样品溶液：v=0.400ml）之间。
准确性
对一个试料进行双重测量时，会产生0.010到0.020的吸光度差异。标准偏差值在测量范围内为1-2%。
全蛋粉的测定（文献3）：
x=1665℉/100g:r=111℉/100g S（r）=39℉/100g
R=172℉/100g S（R）=61℉/100g
干扰物/误差原因
作为稳定剂市售的甲醇氢氧化钾溶液阻碍胆固醇氧化酶。
套件内容
- 磷酸铵缓冲液pH7.02.6M甲醇约220000U过氧化氢酶
- 50mM乙酰丙酮。3M甲醇
- 约12U Cho-OD
- 测定的控制用胆固醇标准液
（计算结果不需要测量。）
样品制备的一般信息
胆固醇必须从样品基质中溶出。另外，该酯在试样调制时需要用碱水解。
测定游离胆固醇时，将样品溶解或提取到异丙醇中。不溶成分通过过滤或离心除去。
含有低浓度胆固醇的试科在回流氢氧化钾溶液的同时煮沸，然后用醚/石油醚提取。
脂肪酸通过在冷处氧化除去。椰子油等植物油的着色可以用活性炭除去。
参考文献
- Beutler，H.-O.&Michal，G.（1976）Eine Eigehalts-bestimmung für die Routineanalytik:Enzym。Bestimmung von Cholesterin，Getreide，Mehl，Brot30116-118。
- International Union of Pure and Applied Chemistry（IUPAC），Applied Chemistry Division，Commission on on Oils，Fats and Derivatives:Standard Methods for the Analysis of Oils，Fats and Derivatives，7thed.（1987）pp.170-173，Blackwell Scientific Publications Oxford London Edinburgh Boston Palo Allo to Melbourne。
- Amtliche Samlung von Untersuchungsverfahren nach§35LMBG；Untersuchung von Lebensmitteln:Bestimmung des Cholesteringehaltes in EIern und EIprodukten（L05.00-7/Dez.1992）。
- Schweizer。Lebensmittelbuch，Kapitel32（Spirituosen）/11:Bestimmung des Eigehaltes，enzymatisch:Kapitel22（Diätetische Lebensmittel und Speziallebensmittel），Provisorische Methoder Subkommission5（1990）。
- Shen，Ch.S.J.，Chen，I.S.&Sheppard，A.J.（1982）Enzymatic determination of cholesterol in egg yolk，J.Ass.Off.Anal。Chem。651222-1224。
- Karkalas，J.，Donald，A.E.&Clegg，K.M.（1982）Cholesterol content of poultry meat and cheese determined by enzymatic and gas-liquid chromato-graphy methods。J.Food Technol。17281-283。
- Lücker，E.&Bülte，M.（1997）Verfahren zum Nachweis von im Hinblick auf die bovine spongiforme Enzephalo-pathie（BSE）unerwünschten Zutaten in Fleisch-Erzeugnissen，1。Enzymatische Cholestrerin-bestimmung als Schnellverfahren zur Erfassung von Hirngewebe，Fleischwirtschaft77836-840
※德国及瑞士的食品法中有记载。
另外，由国际纯正·应用化学联合（IUPAC）推荐
进行调试。
