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在运行western blot时使用预处理蛋白质阶梯有助于您:-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中蛋白质分离的监测-验证凝胶和膜(PVDF、尼龙或硝化纤维素)之间的传递效率-将膜的图像与抗体染色生成的图像叠加在梯子上,计算出蛋白质的大致大小。
使用未染色蛋白梯当你需要精确计算蛋白质的大小时,它非常有用。然而,只有在用考马斯群岛或类似的非特异性蛋白染色。未染色的蛋白质梯状物对蛋白质的定量更准确,因为预染色梯状物中使用的染料可能会轻微扭曲凝胶上蛋白质梯状体蛋白质的表观尺寸。
蛋白质梯子在供应时最方便使用,在装入凝胶之前不需要加热、稀释或添加还原剂。预设梯子也可以使用不同颜色的高亮带,以便更容易识别不同尺寸的带。
当选择正确的预设蛋白质阶梯时,最重要的选择是基于您感兴趣的蛋白质的大小。对于大多数研究人员,我们通常建议:a)约116027对于10至180 kDa之间的蛋白质b)约116028对于高达245kDa的较大蛋白质c)约116029对于低至3.5 kDa的较小蛋白质d)约116029或约234592同时研究较小和较大的蛋白质。
预应变蛋白质阶梯表
显示每个预沉积阶梯中单个蛋白质标记物大小的图表