主要功能和细节
一次性90分钟协议 灵敏度:9.7 pg/ml 范围:46.88 pg/ml-3000 pg/ml 样品类型:细胞培养提取物、组织提取物 检测方法:比色法 分析类型:三明治(定量) 反应对象:人类
概述
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产品名称 -
检测方法 比色法 -
精密度 内部审计 样品 n个 平均值 标准偏差 变异系数% 总体 5 3% 内部通话 样品 n个 平均值 标准偏差 变异系数% 总体 三 6% -
样品类型 细胞培养提取物、组织提取物 -
化验类型 三明治(定量) -
敏感 9.7微微克/毫升 -
范围 46.88微微克/毫升- 3000微微克/毫升 -
恢复 样品特定回收率 样品类型 平均% 范围 细胞培养提取物 106 103% - 108% -
检测时间 1小时 3000万 -
检测持续时间 一步分析法 -
物种反应性 与以下物质反应: 人类 -
产品概述 人类帕金ELISA试剂盒(ab212159)是一种单洗90分钟夹心ELISA试剂,用于定量测定细胞培养提取物和组织提取物中的帕金蛋白。 它使用我们专有的SimpleStep ELISA®技术。 以9.7 pg/ml的灵敏度定量人类帕金。
SimpleStep ELISA®技术使用与亲和标签结合的捕获抗体,亲和标签被用于覆盖SimpleStepELISA®板的单克隆抗体识别。 这种夹心ELISA方法允许在一个步骤中形成抗体-分析物夹心复合物,显著减少测定时间。 有关更多详细信息,请参阅图像部分中的SimpleStep ELISA®协议摘要。 我们的SimpleStep ELISA®技术具有以下优点:
-单次洗涤方案将化验时间缩短至90分钟或更短 -高级抗体的高灵敏度、特异性和再现性 -在生物样品中充分验证 -96块钢板可分解成12 x 8个井带
384孔单步ELISA®微孔板( 约203359 )可作为SimpleStep ELISA®试剂盒提供的96-well微孔板的替代品使用。 -
注意事项 Parkin在多蛋白E3泛素连接酶复合物中发挥作用,催化泛素部分与底物蛋白的共价连接。 通过这种方式,Parkin通过调节错误折叠蛋白质(包括PARK7和SNCAIP的22 kDa O-连接糖基化亚型)的“Lys-63”连接多泛素化,通过蛋白酶体途径参与异常折叠或受损蛋白质的去除和/或解毒。 Parkin还介导BCL2的单泛素化,从而充当自噬的积极调节器。 帕金还通过促进线粒体蛋白质如TOMM20、RHOT1/MIRO1和USP30的泛素化,促进功能失调的去极化线粒体的自噬降解(线粒体吞噬)。 Parkin还介导ZNF746的多泛素化,然后通过蛋白酶体降解ZNF746; 可能在调节神经元死亡中起作用。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 -
站台 预涂层微孔板(12 x 8孔板条)
属性
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储存说明 储存于+4°C。 请参阅协议。 -
组件 1 x 96测试 10X人Parkin捕获抗体 1 x 600微升 10X人驻车检测抗体 1 x 600微升 10X清洗缓冲液PT(ab206977) 1 x 20毫升 50X细胞提取增强剂溶液(ab193971) 1 x 1毫升 5X细胞提取缓冲液PTR(ab193970) 1 x 10毫升 抗体稀释液5BI 1 x 6毫升 人帕金冻干重组蛋白 2瓶 平板密封件 1台 样品稀释剂NS(ab193972) 1 x 12毫升 单步预涂96孔微孔板(ab206978) 1台 停止解决方案 1 x 12毫升 TMB开发解决方案 1 x 12毫升 -
研究领域 -
功能 在多蛋白E3泛素连接酶复合体中发挥作用,催化泛素部分与底物蛋白质的共价连接,如BCL2、SYT11、CCNE1、GPR37、STUB1,一种22 kDa的SNCAIP、SEPT5、ZNF746和AIMP2的O-连接糖基化亚型。 根据上下文调节底物的单泛素化以及“Lys-48”连接和“Lys-63”连接的多泛素化。 通过介导错误折叠蛋白质(如PARK7)的“Lys-63”连接的多泛素化,参与异常折叠或受损蛋白质的去除和/或解毒:“Lys-63'连接的多泛素化错误折叠蛋白质随后被HDAC6识别,导致其招募为攻击性蛋白,然后降解。 介导SNCAIP的“Lys-63”连锁多泛素化,可能在路易体形成中发挥作用。 介导BCL2的单泛素化,从而充当自噬的积极调节器。 促进功能失调的去极化线粒体的自噬降解。介导ZNF746的“Lys-48”连接的多泛素化,然后通过蛋白酶体降解ZNF747; 可能在调节神经元死亡中发挥作用。 限制活性氧(ROS)的产生。 这种泛素连接酶活性的丧失似乎是PARK2发病的机制。 可保护神经元免受α-突触核蛋白毒性、蛋白酶体功能障碍、GPR37积聚和红藻氨酸诱导的兴奋毒性。 可能在控制突触前末端的神经递质运输和钙依赖性胞吐中发挥作用。 在神经元凋亡期间调节细胞周期蛋白E。 可能代表肿瘤抑制基因。 -
组织特异性 在包括黑质在内的大脑中高度表达。 表达于心脏、睾丸和骨骼肌。 在肿瘤活检中表达下调或缺失,在PARK2患者的大脑中缺失。 过度表达可保护多巴胺神经元免受kainate介导的凋亡。 在血清中发现(蛋白质水平)。 -
通路 蛋白质修饰; 蛋白质泛素化。 -
参与疾病 PARK2缺陷是帕金森病(PARK)的病因[MIM:168600]。 一种复杂的神经退行性疾病,以运动迟缓、静止性震颤、肌肉僵硬和姿势不稳定为特征。 其他特征包括特征性姿势异常、自主功能障碍、张力障碍性痉挛和痴呆。 帕金森病的病理学涉及黑质多巴胺能神经元的丢失,以及大脑不同区域幸存神经元中路易小体(神经元内聚集的蛋白质)的存在。 这种疾病是进行性的,通常在50岁之后表现出来,尽管早发病例(50岁之前)是已知的。 大多数病例是散发的,表明其病因是基于环境和遗传因素的多因素。 然而,一些患者的家族病史呈阳性。 家族性疾病通常始于早期,与非典型临床特征相关。 PARK2缺陷是2型帕金森病(PARK1)的病因[MIM:600116]; 也称为早发性帕金森综合征伴昼夜波动(EPDF)或常染色体隐性遗传青少年帕金森病(PDJ)。 一种神经退行性疾病,特征是运动迟缓、僵硬、姿势不稳、震颤,通常在40岁之前发病。 它与经典帕金森病的不同之处在于早期DOPA诱导的运动障碍、症状的昼夜波动、睡眠益处、肌张力障碍和过度反射。 痴呆症不存在。 病理学上,患者显示黑质多巴胺能神经元丢失,与帕金森病相似; 然而,没有路易体(聚集蛋白的神经元内积累)。 注=PARK2缺陷可能与卵巢癌的发展和/或进展有关。 -
序列相似性 属于RBR家族。 Parkin亚科。 包含1个IBR型锌指。 包含2个环形锌指。 包含1个泛素样结构域。 -
域 泛素样结构域结合26S蛋白酶体的PSMD4亚单位。 -
翻译后 修改 以E2依赖的方式自动泛素化,导致自身退化。 RNF41还可将多泛素化用于蛋白酶体降解。 S-亚硝基化。 S-亚硝基化对PARK2泛素E3连接酶活性的抑制可能通过削弱PARK_2底物的泛素化而导致PD的退化过程。 -
手机定位 细胞质>胞浆。 核心。 内质网。 线粒体。 主要定位于胞质溶胶中。 在中子中与SYT11共标。 与SNCAIP在脑干路易体中协同放大。 迁移到失去线粒体膜电位的功能失调线粒体; 线粒体的再激发依赖于PINK1。 -
UniProt提供的信息 -
替代名称 AR JP公司 E3泛素连接酶 E3泛素蛋白连接酶parkin
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数据库链接
相关产品
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替代版本 -
ELISA试剂盒
图像
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SimpleStep-ELISA技术允许在一个步骤中形成抗体-抗原复合物,将测定时间减少到90分钟。 将样品或标准品和抗体混合物一次性添加到微孔中,培养、清洗并添加最终基质。 有关详细的分步指南,请参阅协议。 -
绘制了背景数据值(平均值+/-SD)。 -
Parkin浓度测量一式两份,根据Parkin标准曲线进行插值,并针对样品稀释进行校正。 绘制插值稀释因子校正值(平均值+/-SD,n=2)。 Parkin过表达提取物中Parkin的平均浓度为2180 pg/mL。 -
在三种不同稀释液中测量Parkin的浓度,一式两份,并根据Parkin标准曲线进行插值,并针对样品稀释进行校正。 插值稀释因子校正值以纳帕金/毫克提取物为单位绘制(平均值+/-SD,n=3)。 在过度表达Parkin的HEK293T细胞提取物中Parkin浓度为830 ng/mg,在转染空载体的HEK2903T细胞的提取物中为1 ng/mg。
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (1)
黄W 等人。 脓毒症Fission1/Parkin比值的预后意义:一项前瞻性队列研究。 Front Med(洛桑) 8:642749 (2021). 公共医学:34055831