主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 抗Caspase-3前体的兔单克隆抗体[E61] 适用于:IP、WB、IHC-P、ICC/IF、Flow Cyt(Intra) 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克 [E61]转pro Caspase-3 -
宿主 兔子 -
特异性 抗体只识别Caspase-3的原形式。 它不与Caspase-3的裂解形式(活性酶)反应。 -
经测试应用 -
种属反应性 以下内容: 人类 -
免疫原 人前半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(N末端)内的合成肽。 确切的顺序是专有的。 -
阳性对照 WB:Hap1和HeLa细胞。 ICC/IF:Jurkat细胞。 IHC-P:宫颈癌组织。 IP:HeLa全细胞裂解物。 流式细胞术(内):Jurkat细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 交付后,将等分样品储存在-20°C下。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:49%PBS、50%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 E61型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
检测试剂盒 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制
应用
靶标
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关联方 半胱氨酸蛋白酶是一个半胱氨酸蛋白酶家族,是程序性细胞死亡或凋亡的关键介质。 所有半胱天冬酶的前体形式由前体蛋白和大小催化亚基组成。 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶的活性形式由多种刺激物产生,包括配体-受体相互作用、生长因子剥夺和细胞功能抑制剂。 所有已知的半胱天冬酶都需要在天冬氨酸附近进行裂解,以释放出一个大的和一个小的亚基,这些亚基结合成a2b2四聚体形成活性酶。 Caspase 3的基因也称为Yama、CPP32和32-kDa蛋白质的质外蛋白编码。 半胱氨酸天冬氨酸酶3将死亡底物聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)裂解为凋亡过程中观察到的特定85 kDa形式,并被CrmA蛋白抑制。 其他胱天蛋白酶3底物包括DNA-PK、肌动蛋白、GAS2和原蛋白酶-6等。胱天蛋白酶3被Asp-28/Ser-29(N末端前结构域之间)和Asp-175/Ser-176(大亚基和小亚基之间)的切割事件激活,产生17kDa的大亚基和12kDa的小亚基。 -
细胞定位 细胞质的 -
数据库链接 -
别名 CASP3抗体 半胱氨酸蛋白酶3抗体 半胱氨酸蛋白酶3凋亡相关半胱氨酸肽酶抗体
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(希腊语)
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所有车道: 1/1000稀释的抗前胱天蛋白酶-3抗体[E61](ab32150) 车道1: 野生型HeLa处理的Staurosporine(2uM,4h)细胞裂解物 车道2: CASP3敲除HeLa处理的Staurosporine(2uM,4h)细胞裂解物 车道3: 野生型HeLa车辆控制Staurosporine(0uM,4h)细胞裂解物 车道4: CASP3敲除HeLa车辆控制Staurosporine(0uM,4h)细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 观察到的频带大小: 30千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1/1000稀释的抗-CASP3抗体[E61](ab32150)染色,显示为绿色; 小鼠抗α-管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度进行负荷对照染色,以红色显示。在Western blot中,ab32150显示与CASP3特异结合。 在处理过的野生型HeLa细胞裂解液中,在30 kDa处观察到一条带,在CASP3敲除细胞系中未观察到该大小的信号。 为了生成此图像,分析了野生型和CASP3敲除HeLa细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
车道1: 野生型HAP1细胞裂解物 车道2: 野生型HAP1细胞裂解物+Staurosporine(1μM,4h) 3号车道: 半胱氨酸蛋白酶-3敲除HAP1细胞裂解物 车道4: 半胱氨酸蛋白酶-3敲除HAP1细胞裂解物+Staurosporine(1μM,4h) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在35 kDa下观察到ab32150。 红色负载控制, ab8245 ,在37 kDa下观察到。 当使用Caspase 3敲除样品时,ab32150被证明与前Caspase 2特异性反应。 对野生型和Caspase 3敲除样品(±Staurosporine处理)进行SDS-PAGE分析。 ab32150和 ab8245 (GAPDH的负荷控制)分别稀释至1/1000和1/10000,并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附液开发印迹( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye®680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
对4%副甲醛固定、0.1%Triton X-100渗透性Jurkat(外周血人T细胞白血病细胞系)细胞进行免疫荧光分析,在1/200稀释度下用一抗Caspase-3原抗体(ab32150)标记Caspase-3,然后用山羊抗Rabbit IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )二级抗体的稀释度为1/1000。 共聚焦图像显示Jurkat细胞中的细胞质染色。 抗α-微管蛋白抗体(DM1A)-微管标记物(Alexa Fluor ® 594)( 约195889年 )用于在1/200稀释度下对微管蛋白进行复染。 核反染为DAPI(蓝色)。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
使用ab32150在1/500稀释度下对人石蜡包埋宫颈癌组织进行免疫组织化学分析。 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。 -
重叠直方图显示Jurkat细胞用ab32150染色(红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。 然后将细胞与抗体(ab32150,1/100稀释)在22°C下孵育30分钟。 使用的二级抗体是抗兔DyLight®488( 约96899 )在22°C下以1/500稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 采集了超过5000个事件。 该抗体在用4%多聚甲醛固定的Jurkat细胞(10分钟)/在相同条件下用0.1%PBS-Tween渗透的Jurket细胞中发出阳性信号。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (132)
赵Q 等。 双向正反馈通路在分子靶向治疗介导的间变性甲状腺癌细胞凋亡中的中心作用。 临床翻译医学 12:e727(2022)。 公共医学:35184413 李毅 等。 microRNA-378a-3p通过调节PD-L1和STAT3调节肝细胞癌的进展。 生物工程 13:4730-4743 (2022). 公共医学:35184646 张伟 等。 配对盒5通过促进p53信号活性增加食管鳞癌细胞的化疗敏感性。 Chin Med J(英语) 135:606-618 (2022). 公共医学:35191417 风扇J 等。 lncRNA LEF1-AS1作为一种新的生物标志物,通过靶向miR-221-5p/GJA1轴促进下咽鳞状细胞癌的进展和转移。 Dis标记 2022:3881310 (2022). 公共医学:35371339 罗H 等。 MAT2A促进宫颈癌中PDCD6甲基化,并在葡萄糖缺乏的情况下促进细胞生长。 细胞死亡发现 8:176 (2022). 公共医学:35396512