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结合过氧化物酶体增殖物,如降血脂药物和脂肪酸的核受体。一旦被配体激活,核受体与DNA特异性帕帕反应元件(PPRE)结合,并调节其靶基因的转录,如酰基辅酶一氧化酶。因此,它控制着脂肪酸的过氧化物酶体-氧化途径。
脂肪细胞分化和葡萄糖稳态的关键调节因子。
通过抑制NF-卡帕-B介导的促炎反应,作为肠道稳态的关键调节因子。
在脂肪组织中表达最高。骨骼肌、脾脏、心脏和肝脏较低。胎盘,肺和卵巢也能检测到。
定位于细胞质,细胞核。
人(第37231页):异构体1:54千Da异构体2:57千帕异构体3:21千帕(预测)
小鼠(第37238页):异构体1:54千Da异构体2:57千帕(预测)
鼠(O88275):异构体1:54千Da异构体2:57千帕(预测)
存在磷酸化,糖基化修饰。
PPARγ存在表达特异性,不同样本中靶标蛋白的含量存在区别,有些样本可能会出现弱表达或无表达的情况;若不确定自己的样本是否表达靶标蛋白,强烈建议在实验中使用阳性对照。
如果内源性表达较低,可能会出现无信号现象;部分样本可尝试诱导刺激增加PPARγ的表达量(例如:3T3-L1)
K562型中国
人物
小鼠、大鼠卵巢组织裂解液
关键控制点
在实验中除了需要注意常规问题外,还要特别关注以下关键控制点:
样本制备
添加复合蛋白酶抑制剂以避免靶标蛋白降解。
整个样本制备过程中,保持样本置于冰上。
通过布拉德福德分析、劳里分析或业务连续性分析分析测定样本总蛋白浓度。
建议使用阳性对照。
转膜
建议转膜完成后使用丽春红染色,确定转膜是否成功。