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骨钙素,又称含骨γ-羧基谷氨酸蛋白(BGLAP)属于骨钙素/基质格拉蛋白家族。
骨钙素占总骨蛋白的1-2%,并与磷灰石和钙强烈结合。
骨钙素仅由成骨细胞分泌,但对骨矿化和骨密度的影响很小。
骨钙素以内分泌方式在多种生理过程中发挥关键作用,例如葡萄糖稳态和运动能力、大脑发育、认知和男性生育能力。
骨钙素通常用作骨形成过程的标志物。
分泌型蛋白
人 (P02818):11千Da(预测)
小鼠 (P86546):11 kDa(预测)
大鼠 (P04640):11千Da(预测)
γ-羧基谷氨酸残基由维生素 K(K)依赖性羧化形成
骨钙素是一个11千帕左右的小分子量蛋白,在工作分解结构实验中使用15%或更高浓度的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳也可以使用梯度胶以获得理想实验结果。
建议在工作分解结构实验转膜液中加入20%甲醇。
重组人骨钙素蛋白(ab152231号, ab152232型)
希拉细胞裂解液
在实验中除了需要注意常规问题外,还要特别关注以下关键控制点:
样本制备
添够酶靶
整个样本制备过程中,保持样本置于冰上。
通过布拉德福德分析、劳里分析或业务连续性分析分析
转膜
强烈建议转膜完成后使用丽春红染色,确定转膜是否成功。
抗体孵育
建议使用新鲜抗体,避免重复利用。