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CD9(CD9)四重奏、四重奏、四重奏等
在巨噬细胞中,CD9(CD9)功能与CD81型以及β-1和β-2整合素相关,并阻止巨噬细胞融合成多核巨细胞,多核巨细胞专门吞噬补体调理大颗粒。
CD9(CD9)参与血小板活化和聚集,它还参与细胞粘附、细胞运动和肿瘤转移。
CD9(CD9)最初被认为是一种特殊的外泌体标记物,然而,它现在被认为是单核细胞和巨噬细胞的抗炎标记物。
CD9(CD9)在多种造血细胞和非造血细胞中表达,如基质细胞、巨核细胞、血小板、B类和T型淋巴细胞、树突状细胞、内皮细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱粒细胞等。
胞外或胞外体、细胞膜
人(第1926页):25.4 kDa(预测)
小鼠(P40240):25.2 kDa(预测)
大鼠(P40241):25.2千Da(预测)
棕榈酰化
CD9(CD9)蛋白以三种形式存在,分子质量介于22到27千帕之间,能与脂肪酸共价连接。
二硫键,糖蛋白,脂蛋白,棕榈酸酯
CD9(CD9)在部分组织和细胞株系表达,并且其表达量在不同组织和细胞株系也有差别,建议设置阳性对照。
CD9(CD9)是一个多次跨膜蛋白,强烈建议提取蛋白时不煮样,防止蛋白聚集;表达量较低的细胞可通过提取膜蛋白富集靶标蛋白。
在对外泌体进行CD9(CD9)检测时,CD9(CD9)的蛋白丰度十分重要,若提取的外泌体中CD9(CD9)含量较低,易出现无信号现象。更多外泌体提取方案和研究指南见参考文献[1,2]。
CD9(CD9)是一个蛋白分子量比较小的蛋白,建议在电泳和转膜时根据小分子蛋白操作流程进行实验。
实际检测到的分子大小可能与预测不符。预测条带大小约25kDa检测条带大小约22千Da
希拉牌手表和HCT116型中国
小鼠心脏和肾脏组织裂解液
拉吉全细胞裂解液
人CD9(CD9)敲除希拉牌手表细胞系(约255375)
在实验中除了需要注意常规问题外,还要特别关注以下关键控制点:
样本制备
添加复合蛋白酶抑制剂以避免靶标蛋白降解。
整个样本制备过程中,保持样本置于冰上。
对于膜蛋白,强烈建议不要煮样。
通过布拉德福德分析、劳里分析或业务连续性分析分析
建议使用阳性和阴性对照。
电泳
至少上样20微克总蛋白进行电泳。
对于分子量较小的靶标蛋白,请使用较高浓度的分离胶如15%的分离胶,进行电泳。
转膜
对于分子量较小的靶标蛋白,建议使用0.22微米的聚偏氟乙烯膜。
对于分子量较小的靶标蛋白,建议转膜缓冲液中使用20%甲醇。
强烈建议转膜完成后使用丽春红染色,确定转膜是否成功。
建议不要裁膜。
抗体孵育
建议使用新鲜抗体,不建议抗体重复利用。