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比较研究
.1995年1月25日;23(2):277-84.
doi:10.1093/nar/23.277。

Wilms肿瘤抑制蛋白WT1的高亲和力结合位点

附属公司
比较研究

Wilms肿瘤抑制蛋白WT1的高亲和力结合位点

T B汉密尔顿等。 核酸研究. .

摘要

Wilms的肿瘤抑制蛋白(WT1)是一种推测的转录调控蛋白,具有四个锌指,其中最后三个锌指与早期生长反应蛋白-1(EGR-1)具有广泛的序列同源性。虽然编码WT1[-KTS]锌指结构域的肽可以与9 bp EGR-1结合位点结合,但目前关于锌指-DNA相互作用机制的知识预计WT1的识别位点会更广泛。在结合位点选择分析中使用WT1[-KTS]锌指肽(WT1-ZFP)和模板寡核苷酸GCG-TGG-GCG-NNNNN,我们确定WT1[-KTS]的最高亲和力结合位点由12 bp序列GCG-TGG GCG-(T/G)(G/a/T)(T/G)组成。通过定量硝化棉滤膜结合试验测定了WT1-ZFP与一些选定序列的结合,结果表明这些序列对蛋白质的亲和力是非选择序列GCG-TGG-GCG-CCC的4倍。全长WT1蛋白调节与这些高亲和力序列相连的报告基因的转录。缺少WT1[-KTS]第一锌指但包含与EGR-1同源的三个锌指的肽在结合位点选择分析中未能选择GCG-TGG-GCG共识序列下游的任何特定序列。胰岛素样生长因子II基因胎儿启动子中的DNA序列在瞬时转染试验中赋予WT1反应性,与WT1-ZFP结合,亲和力随每个序列在指状1亚基中的共识碱基数量而变化。

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    1. 分析生物化学。1976年5月7日;72分48秒54秒-公共医学
    1. 生物化学杂志。1993年5月5日;268(13):9172-5-公共医学
    1. 自然。1984年5月10日至16日;309(5964):170-2-公共医学
    1. 自然。1984年5月10日至16日;309(5964):172-4-公共医学
    1. 自然。1984年5月10日至16日;309(5964):174-6-公共医学

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