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.2018年5月;31(5):343-350。
doi:10.3967/bes2018.045。

无佐剂显示EV71表位的嵌合病毒样颗粒诱导的高效体液和细胞免疫反应

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无佐剂显示EV71表位的嵌合病毒样颗粒诱导的高效体液和细胞免疫反应

蒲良等。 生物环境科学. 2018年5月.
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摘要

目标:为了消除铝佐剂和His-tag的副作用,我们构建了显示EV71(SP70)抗原表位的无His-tagged嵌合VLP。然后评估VLP是否能够在不添加佐剂的情况下,有效激发对EV71的体液免疫和细胞免疫反应。

方法:将SP70插入截短HBcAg序列的MIR中构建融合蛋白,在大肠杆菌中表达,并通过离子交换色谱和密度梯度离心纯化。用VLP免疫小鼠,然后收集血清。通过ELISA、中和试验和EV71致死试验检测特异性抗体滴度、IgG亚型和中和效果。ELISPOT法检测脾细胞分泌的IFN-γ和IL-4。

结果:HBc-SP70蛋白可以自我组装成空的VLP。用HBc-SP70 VLP免疫后,可检测到的抗EV71抗体可有效中和EV71并保护新生小鼠免受EV71致命攻击。无论是否添加铝佐剂,免疫效果都没有显著差异。特异性IgG亚型主要为IgG1和IgG2b,免疫小鼠的脾细胞产生高水平的IFN-γ和IL-4。

结论:无His标记的融合蛋白表达并纯化为可溶性嵌合HBc-SP70 VLP,无需复性。在没有佐剂的情况下,它们可以有效地诱导高水平的Th1/Th2混合免疫反应,并在铝佐剂的辅助下进行。此外,嵌合VLP具有同时预防HBV和EV71感染的潜力。

关键词:助剂;肠道病毒71型;体液和细胞免疫;中和抗体;疫苗;类病毒颗粒。

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