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.1988年2月15日;263(5):2553-62。

人类阳离子非依赖性甘露糖6-磷酸受体。COS细胞全长cDNA的克隆、序列分析及功能受体的表达

附属公司
  • PMID: 2963003

人体不依赖于阳离子的甘露糖6-磷酸受体。COS细胞全长cDNA的克隆、序列分析及功能受体的表达

A大岛等。 生物化学杂志. .

摘要

我们从四个重叠的克隆中克隆并测序了人类阳离子非依赖性甘露糖6-磷酸受体的全长cDNA。9104核苷酸序列包含7473个核苷酸,编码2491个氨基酸的蛋白质。氨基酸序列包括40个氨基酸的假定信号序列、由134-167个氨基酸的15个同源重复序列组成的胞外结构域、23个氨基酸的跨膜区和164个氨基酸的胞质结构域。预测的分子尺寸大于270 kDa。人受体胞外质域的重复序列7-15与最近报道的牛受体部分cDNA的序列高度同源(Lobel,P.,Dahms,N.M.,Breitmeyer,J.,Chirgwin,J.M.和Kornfeld,S.(1987)Proc。国家。阿卡德。科学。美国84,2233-237)。本文报道的全长cDNA的核苷酸序列和推导出的阳离子非依赖性甘露糖6-磷酸受体的氨基酸序列惊人地相似(核苷酸水平上99.8%相同,氨基酸水平上99.4%相同)最近报道的HepG2肝癌细胞中人胰岛素样生长因子II受体(Morgan,D.O.,Edman,J.D.,Standring,D.N.,Fried,V.A.,Smith,M.C.,Roth,R.A.,and Rutter,W.J.(1987)Nature 329,301-307)。这些发现支持了溶酶体酶的阳离子非依赖性甘露糖6-磷酸受体是一种与胰岛素样生长因子II受体相同的多功能结合蛋白的建议。用表达载体pSVL中含有阳离子非依赖性甘露糖6-磷酸受体的完整编码序列的cDNA构建物转染COS细胞。cDNA在转染COS细胞中的表达产生了一种细胞表面蛋白,该蛋白在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳上与真正的人类受体共迁移,结合到亲和柱上,并用6-磷酸甘露糖特异性洗脱,介导细胞表面结合和β-葡萄糖醛酸酶的内吞,并将内吞酶靶向溶酶体。

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