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.2017年8月21日；7(1):9020.
doi:10.1038/s41598-017-09228-8。

Ccdc3：参与肝脏脂质代谢调控的新P63靶点

廖文娟 1, 刘洪兵 1 2, 张一伟 1, Ji Hoon Jung先生 1, 陈嘉祥 1 3, 苏晓华 4, Yeong C Kim先生 5, 埃尔莎·R·弗洛雷斯 4, 王三明 5 6, 马尔维娜·沙尔尼·雷塔杰扎克 7, 文丽（Wen Li） 8, 谢莉娅·X·曾 9, 华路 10
附属公司

Ccdc3：参与肝脂代谢调控的新P63靶点

廖文娟等。 科学代表. .

摘要

TAp63是p53家族的一员，已被证明可以调节能量代谢。在这里，我们报告了卷曲线圈域包含3（CCDC3）作为一个新的TAp63靶点。TAp63，而不是ΔNp63、p53或p73，通过直接结合CCDC3的增强子区域上调CCDC3表达。CCDC3在TAp63缺失的小鼠胚胎成纤维细胞和棕色脂肪组织中的表达显著降低，并被降低p63转录活性的肿瘤坏死因子α显著降低，但被激活p63的抗糖尿病药物二甲双胍诱导。此外，在脂肪细胞分化过程中，CCDC3的表达与TAp63水平呈正相关，而与ΔNp63水平相反。有趣的是，CCDC3作为一种分泌蛋白，靶向肝癌细胞，增加长链多不饱和脂肪酸，但减少细胞中的神经酰胺。CCDC3通过减少肝脏PPARγ及其靶基因CIDEA以及其他参与新生脂肪生成的基因的表达，缓解高脂饮食（HFD）转基因CCDC3小鼠的葡萄糖不耐受、胰岛素抵抗和脂肪变性形成。HFD小鼠异位CCDC3的肝脏表达也产生了类似的结果。总之，这些结果表明，CCDC3作为p63网络的下游参与者，通过抑制肝脏新生脂肪生成来调节肝脏脂质代谢。

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利益冲突声明

作者声明，他们没有相互竞争的利益。

数字

图1
图1
TAp63而非ΔNp63、p53、p73转录激活CCDC3。(a–c)qRT-PCR显示TAp63gamma的过度表达，而不是ΔNp63、p53或p73的过度表达可以诱导H1299的CCDC3(一,b条)和HUVEC细胞(c（c）). (d、 （f）)CCDC3基因转录起始位点上游的两个p63结合位点（BS1和BS2）和突变结合位点（BS 1-1Mut、BS1-2Mut、BS 1-3Mut、B 1-4Mut、S 1-5Mut和BS1-6Mut）的示意图。H1299细胞与所示质粒和β-Gal质粒共转染。转染48小时后，收集细胞进行荧光素酶分析。荧光素酶活性根据β-Gal表达进行标准化。数据以平均值表示 ± S.D.，编号 = 3. (克)HaCat细胞用二甲双胍处理后进行ChIP分析，使用所示抗体，然后对CCDC3启动子序列或阴性对照序列（3′-UTR）进行q-PCR。数据以平均值表示 ± S.D.，编号 = 三。
图2
图2
CCDC3蛋白水平由TAp63的过度表达诱导，并通过敲除或敲除TAp63而降低。(a、 b条)WB分析显示TAp63在H1299细胞中过度表达(一)和HACAT细胞(b条)可诱导CCDC3蛋白水平，而p40抑制CCDC3表达。(c（c）)p63敲除降低HaCat细胞中CCDC3蛋白水平。(d日)WB分析显示TAp63中CCDC3蛋白水平较低−/−MEF细胞比WT-MEF细胞强。(e（电子）)TAp63−/−MEF细胞感染GFP（对照）、TAp63或p40腺病毒，随后用所示抗体进行WB分析。(（f）)使用所示WT和TAp63的棕色脂肪组织对CCDC3（红色）和DAPI（蓝色）进行IF染色−/−老鼠。(克)图2f中CCDC3染色强度的量化。密度分析标记在每个带的顶部。
图3
图3
在不同药物治疗和脂肪细胞分化过程中，CCDC3的表达与TAp63γ水平密切相关。(一,b条)用20 ng/ml的TNFα或DMSO处理MCF-7细胞20 分钟，并收获用于qRT-PCR(一)和WB(b条)检测CCDC3级的分析。(c（c）)用1 mM二甲双胍，在指示的时间点采集用于WB分析以确定具有指示抗体的蛋白质水平。密度分析标记在每个带的顶部。(d日)3T3-L1前脂肪细胞分化为脂肪细胞。在分化培养基中培养8天后，用油红O对3T3-L1脂肪细胞进行染色。在570℃下用分光光度法测定提取的油红O的吸光度 nm测量甘油三酯（TG）积累。误差条表示平均值的标准误差。(e（电子）)如图d所示，在分化培养基中孵育不同天数后的细胞被采集用于WB分析，并带有指示的抗体。(（f）)使用所示抗体对未分化（F8）和分化（A4.5）脂肪细胞进行ChIP分析，然后对CCDC3启动子序列或阴性对照序列（3′-UTR）进行q-PCR。数据以平均值表示 ± S.D.，编号 = 3. (克)分化后2.5天，3T3-L1细胞感染shTAp63慢病毒和对照病毒。在感染后2天（分化后第4.5天），采集细胞进行WB分析，以确定带有指示抗体的蛋白质水平。
图4
图4
CCDC3识别肝细胞，增加长链多不饱和脂肪酸（PUFC）水平，降低神经酰胺水平。(一)CCDC3条件培养基或对照培养基培养的Huh-7细胞抗myc免疫荧光的代表性图像。抗Myc单克隆抗体（绿色）与DAPI（蓝色）融合。(b条)CCDC3-CM区域（绿色）和矢量CM区域（红色）踏面Huh7样本的成分2与成分1的偏最小二乘判别分析（PLS-DA）得分图。(c（c）)PLS-DA加载图比较矢量CM（加载1）和CCDC3-CM（加载2）处理的Huh7样本之间的变量。投影变量重要性（VIP）值大于1.0的细胞样品中的变量（代谢物）标记为粉红色。(d日)基于VIP值的PLS-DA分析CCDC3-CM处理后的前10种代谢产物 > 1.0. (e（电子）)两组的甘油水平呈倍数变化。结果以平均值显示 ± 东南太平洋 < 0.05. (（f）)通过折叠变化分析确定重要的脂质代谢产物。这些值以对数2比例绘制。表中缩略语列表：CE：胆固醇酯（CE），PC：磷脂酰胆碱，TG：三硬脂酸甘油酯，DG：二硬脂酰甘油。(克)CCDC3-CM（1）组和Vector-CM（0）组的神经酰胺和CE 18:1浓度变化。(小时)CCDC3或对照培养基处理的Huh7细胞中脂肪生成和脂肪酸氧化基因的mRNA表达*P（P） < 0.05，**P < 0.01.
图5
图5
在CMV-Cre介导的DNA重组后，CCDC3在转基因小鼠中普遍过度表达。(一)显示CCDC3转基因小鼠构建体的示意图。将标记小鼠CCDC3置于loxP侧翼Stop盒的下游，并与从IRES启动子转录的GFP连接。在C介导的Stop盒切除后，Flag-ccdc3表达。(b条)在解剖显微镜下拍摄的一个完整E11.5胚胎和一个两天大的小鼠分离心脏中GFP表达的代表性图像，证实了CCDC3在TG小鼠中的整体表达。(c）WB分析证实CCDC3蛋白在TG小鼠的E11.5胚胎和心脏组织中表达。(d日)qRT-PCR验证CCDC3在成年TG小鼠不同组织中的表达。(e（电子）)ELISA证实成年TG小鼠血清中CCDC3水平较高。数据代表平均值 ± 标准偏差*P < 0.05.
图6
图6
CCDC3的过度表达可缓解葡萄糖耐量、胰岛素抵抗和脂肪肝的形成。(a、 b条)葡萄糖耐量试验(一)和胰岛素不耐受试验(b条)使用5个月大的WT和CCDC3 TG小鼠进行为期4个月的高脂饮食（HFD）试验，图中的每个点表示x轴上指定时间点的血糖水平。(c（c）)HFD上各组小鼠脂肪肝的代表性照片（上图），以及相同肝脏切片的CCDC3免疫荧光染色图像（下图，多克隆抗体再次CCDC3（红色）与DAPI（蓝色）融合。(d日)油红O染色后小鼠肝脏切片的代表性图像， × 放大20倍。红色染色表示脂质沉积。(e（电子）)肝甘油三酯水平*P（P） < 0.05. (（f）)小鼠肝脏冷冻切片F4/80免疫荧光染色的代表性图像。F4/80（绿色）多克隆抗体与DAPI（蓝色）融合。(克)不同基因在小鼠肝脏中的mRNA表达 = 每组3个）。(小时)小鼠肝脏脂肪生成和脂肪酸氧化相关基因mRNA表达的Q-RT-PCR分析（n = 8). *P（P） < 0.05，**P < 0.01.
图7
图7
腺病毒介导的小鼠肝脏CCDC3过度表达可减少脂肪变性。(一)WB分析证实CCDC3蛋白在293HEK细胞的细胞裂解液和培养基中均有表达。(b条)腺病毒感染后，CCDC3表达载体和对照载体均表达GFP(c、 d日)实时PCR(c（c）)和WB（d）分析注射表达CCDC3或GFP的病毒后小鼠肝脏中的CCDC3。(e（电子）)如图所示，在小鼠肝脏切片上进行油红O染色。(f）面板E油红O染色区域密度的量化(克)如图所示，Flag（红色）和F4/80（绿色）的双重免疫荧光染色与小鼠肝切片的DAPI（蓝色）融合。(h）F4/80染色区域密度的量化，如图G所示(i、 j个)肿瘤坏死因子α的实时PCR分析(我)以及与从头开始脂肪生成有关的基因(j个)在小鼠肝脏中注射表达CCDC3的病毒与表达GFP的病毒。面板c、f、i和j中的数据以平均值表示 ± 标准偏差*P < 0.05; **P（P） < 0.01. (k个)TAp63-CCDC3途径如何调节肝脂肪变性和胰岛素敏感性的示意图。
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    1. Marchesini G等人。非酒精性脂肪肝、脂肪性肝炎和代谢综合征。肝病学。2003;第37:917–23页。doi:10.1053/jhep.2003.50161。-内政部-公共医学
    1. Byrne CD、Targher G.异位脂肪、胰岛素抵抗和非酒精性脂肪肝：对心血管疾病的影响。动脉硬化血栓血管生物学。2014;34:1155–61。doi:10.1161/ATVBAHA.114.3034。-内政部-公共医学
    1. Su X等。TAp63是脂和糖代谢的主要转录调控因子。单元格元数据。2012;16:511–25. doi:10.1016/j.cmet.2012.09.006。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

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