摘要
建立精子核蛋白目录是阐明受精时传递给卵母细胞的父染色质功能的重要第一步。为此,通过CTAB处理获得精子细胞核,并分离到99.9%以上的纯度,通过光学显微镜和透射电子显微镜评估,没有任何尾部片段、顶体或线粒体。用2-D和1-D凝胶提取和分离细胞核蛋白,并切除2-D斑点和1-D带,通过LC-MS/MS鉴定蛋白质。利用这种方法,从分离的精子细胞核中鉴定了403种不同的蛋白质。已鉴定的最丰富的蛋白质家族是组蛋白,其中一些新成员以前从未在生精细胞系或人类成熟精子中出现过。在之前的人类全精子细胞蛋白质组报告中,有一半以上(52.6%)的蛋白质未被检测到。相关的是,还检测到了一些与染色质相关的蛋白质,如锌指和转录因子,目前为止还不知道与精子染色质相关。这提供了与表观遗传标记、适当受精和胚胎发育潜在相关的核蛋白的额外信息。
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