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.2009年10月;67(2):164-8.
doi:10.1016/j.pep.2009.05.003。 Epub 2009年5月8日。

人转录因子Nanog和Sox2与大肠杆菌周质伴侣Skp复合物的纯化

附属公司

人转录因子Nanog和Sox2与大肠杆菌周质伴侣Skp复合物的纯化

宋楚哈等。 蛋白质Expr纯化. 2009年10月.

摘要

Nanog和Sox2是参与人类和其他哺乳动物干细胞自我更新和多能性的关键转录因子。Nanog和Sox2分别包含同源结构域(HD)和高迁移率组(HMG)DNA-结合域,通过提供招募其他转录调控因子的位点,将其靶向其调控区域和具有转录激活功能的其他区域。为了深入了解Nanog和Sox2其他区域的生化和生物物理特征,我们尝试过多生产和纯化在大肠杆菌中表达的全长野生型人类Nanog及Sox2。有趣的是,我们发现Nanog和Sox2通过与大肠杆菌周质伴侣Skp的紧密相互作用而单独稳定,从而实现Nanog与Sox2的稳定过表达和纯化,两者均与Skp复合。纯化的Nanog和Sox的Skp复合物对其同源DNA序列保持DNA结合活性。类似的方法可能适用于其他一些在大肠杆菌中不稳定或难以过度表达的哺乳动物蛋白质。

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