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.2005年6月;19(6):1584-92.
doi:10.1210/me.2005-0040。 Epub 2005年4月14日。

功能基因组学确定乳腺癌细胞中维甲酸受体α1基因雌激素激活的机制

附属公司

功能基因组学确定乳腺癌细胞中维甲酸受体α1基因雌激素激活的机制

何塞·拉加尼埃等。 分子内分泌学. 2005年6月.

摘要

雌激素受体(ERalpha)靶基因的鉴定对于我们了解其在乳腺癌中的主要作用至关重要。在这项研究中,我们使用染色质免疫沉淀(ChIP)克隆策略来鉴定人类乳腺癌细胞系MCF-7中的ERalpha调节模块和相关靶基因。我们分离出12个转录活性基因组模块,在体内以不同强度招募ERalpha和辅激活剂类固醇受体辅激活剂(SRC)-3。其中一个ERalpha调节模块位于RARA基因座第一个转录起始位点下游3.7 kb处,该位点编码维甲酸受体α1(RARalpha1)。该模块包括雌激素反应元件(ERE),在人类和小鼠基因组之间是保守的。EMSA显示ERalpha与ERE直接结合,在MCF-7细胞中的瞬时转染表明内源性ERalpha可以诱导与异源启动子相连的模块或ERE的雌激素依赖性转录激活。此外,ChIP分析表明,协同调节子SRC-1、SRC-3和受体相互作用蛋白140以雌激素依赖的方式被招募到该内含子模块。正如先前研究所预期的那样,转录因子Sp1可以通过ChIP在RARAα1启动子处检测到。然而,雌二醇治疗并没有影响Sp1的募集,也没有帮助ERalpha募集到启动子。最后,消融内含子ERE足以消除雌二醇对RARAα1启动子活性的上调。因此,这项研究揭示了ERalpha显著激活乳腺癌细胞中RARalpha1表达的机制,并举例说明了功能基因组学策略在识别核受体远程调控模块方面的实用性。

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