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.2005年1月7日;280(1):729-37.
doi:10.1074/jbc。M406203200。 Epub 2004年10月31日。

NADPH参与血红素加氧酶-1与细胞色素P450还原酶的相互作用

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NADPH参与血红素加氧酶-1与细胞色素P450还原酶的相互作用

东岛由一郎等。 生物化学杂志. .
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摘要

血红素加氧酶-1(HO-1)利用NADPH-细胞色素P450还原酶(CPR)提供的电子,以牺牲分子氧为代价催化血红素的生理降解。在本研究中,我们通过表面等离子体共振研究了NADP(H)对HO-1与CPR相互作用的影响。我们发现HO-1在NADP(+)(K(D)=0.5 micro)的存在下与CPR的相关性比在无NADP(D)=2.4 micro)时更紧密。HO-1突变体K149A、K149A/K153A和R185A在NADPH-CPR中几乎没有表现出血红素降解活性,而当使用抗坏血酸钠时,它们表现出与野生型相当的活性。与野生型相比,R185A对CPR的亲和力降低了100倍,即使存在NADP(+)(K(D)=36.3 micro)。K149A和K149A/K153A对CPR的亲和力分别降低了7倍和9倍(K(D)=16.8和21.8微米)。与R185A相比,添加NADP(+)(K(D)分别为5.2和9.6 micro)可以提高K149A和K149A/K153A的亲和力,野生型也是如此。HO-1/CRP复合物的计算机模拟表明,Arg(185)的胍基位于NADPH的2'-磷酸的氢键距离内,表明Arg(85)通过与磷酸基团的静电相互作用,有助于与CPR结合。另一方面,Lys(149)靠近CPR的FMN结合位点附近的酸性氨基酸簇。因此,Lys(149)和Lys(153)似乎与CPR相互作用,以确定氧化还原伙伴的方向,从而实现从CPR的FMN到HO-1的血红素的最佳电子转移。

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