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.2004年11月26日;279(48):50120-31.
doi:10.1074/jbc。M402299200。 Epub 2004年9月30日。

ERK1/2通过缺血缺氧和复氧心肌细胞α-烯醇化酶的表达调节细胞内ATP水平

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ERK1/2通过缺血缺氧和复氧心肌细胞α-烯醇化酶的表达调节细胞内ATP水平

水井仪一等。 生物化学杂志. .
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摘要

细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)在细胞生存中对各种应激反应起作用;然而,ERK1/2在缺血性心脏中的细胞存活机制尚不清楚。在这里,我们通过双向电泳应用功能蛋白质组学来确定ERK1/2的细胞靶点,以应对缺血缺氧。考马斯亮蓝染色法对来自未刺激细胞的样本检测到约1500个斑点。缺血缺氧2小时后,至少50个斑点的染色强度在复氧6小时时增加。在增加的50个斑点中,至少有4个斑点在MEK抑制剂PD98059的存在下被抑制。通过液相色谱-质谱和氨基酸序列分析,确定了一种分子量为52 kDa的蛋白,该蛋白由ERK1/2激活强烈诱导,以应对缺血缺氧和复氧,该蛋白为α-内酯酶,是糖酵解途径中的一种速率限制酶。在缺血缺氧后的复氧过程中,含有MEK1显性阴性突变的细胞中α-烯醇化酶mRNA和蛋白的表达受到抑制,并用MEK抑制剂PD98059处理,导致ATP水平降低。alpha-Enolase在缺血再灌注大鼠心脏中也有表达。ERK1/2对α-烯醇酶的诱导似乎由c-Myc介导。将α-烯醇化酶蛋白引入细胞后,可恢复ATP水平,并防止这些细胞在缺血缺氧和复氧期间的细胞死亡。这些结果表明,ERK1/2的α-烯醇化酶表达参与了缺血缺氧后复氧过程中ATP的生成,ATP的减少导致细胞凋亡。此外,α-烯醇化酶可改善因缺血缺氧而受损的心肌细胞的收缩能力。我们的结果表明,ERK1/2在缺血缺氧和复氧期间通过α-烯醇化酶的表达在心肌细胞的收缩性和细胞存活中发挥作用。

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