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.2003年10月;31(2):231-9.
doi:10.1016/s1046-5928(03)00185-2。

钙蛋白酶h1和h2亚型的表达与纯化

附属公司

钙蛋白酶h1和h2亚型的表达与纯化

金建平等。 蛋白质Expr纯化. 2003年10月.

摘要

在鸟类和哺乳动物中发现了三种同源的钙蛋白亚型,分别命名为h1、h2和酸性钙蛋白。主要基于对鸡gizzard平滑肌(h1)钙蛋白的研究,钙蛋白被确定为一个抑制肌动球蛋白ATP酶活性的肌动蛋白相关蛋白家族。calponin亚型的进化差异表明其功能不同。虽然h1钙调素在平滑肌收缩中的作用尚在研究中,但已经证明h2钙调素调节肌动蛋白细胞骨架的功能。利用克隆的cDNA,我们在大肠杆菌中表达了哺乳动物h1和h2钙蛋白。我们开发了从转化细菌培养物中纯化具有生物活性的h1和h2钙蛋白的有效方法。纯化的钙调素亚型蛋白用于产生单克隆抗体,以揭示h1和h2钙调素之间的表位结构差异。结合它们在组织和发育过程中的差异表达,h1和h2钙调素的结构多样性表明其具有非冗余的生理功能。然而,h1和h2钙调素以相似的亲和力结合F-actin,表明它们在调节平滑肌和非肌肉细胞中的肌动蛋白丝中的作用是一种保守的机制。

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