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.2003年7月18日;278(29):26374-9.
doi:10.1074/jbc。M212407200。 Epub 2003年4月30日。

蛋白激酶Calpha参与Ca2+诱导的血小板聚集的直接证据

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蛋白激酶Calpha参与Ca2+诱导的血小板聚集的直接证据

阿拉塔·田口等。 生物化学杂志. .
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摘要

血小板在整合素αIIβ3激活后聚集,在止血和血栓形成中发挥关键作用。然而,血小板内整合素激活的分子机制尚不清楚。药理实验表明,蛋白激酶C(PKC)在血小板聚集中起重要作用。由于PKC抑制剂可以有多种底物,并且已经证明非PKC-佛波酯结合信号分子发挥重要作用,因此PKC在细胞功能中的精确参与需要重新评估。在这里,我们建立了一种分析Ca2+诱导的渗透血小板聚集的方法。添加精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸肽(αIIbbeta3的整合素结合肽抑制剂)可以抑制血小板的聚集,这表明聚集是由整合素介导的。聚集还依赖于外源性ATP和血小板胞浆,表明存在聚集所需的基本细胞溶质因子。为了检测PKC在聚集分析中的作用,我们从胞浆中去除了PKCalpha和β。缺乏PKC的细胞液失去了聚集支持活性,通过添加纯化的PKCalpha可以恢复聚集支持活性。此外,在没有细胞液的情况下添加纯化的PKCalpha不支持聚集,而含有较少PKC的细胞液有效地支持聚集,这表明除了PKC之外还需要其他因素。因此,我们直接证明PKCalpha参与调节钙诱导的血小板聚集。

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