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.2002年5月;67(6):429-37.
doi:10.1016/s0039-128x(01)00172-6。

动态且难以捉摸的膜雌激素受体-α

附属公司

动态且难以捉摸的膜雌激素受体-α

Cheryl S Watson(Cheryl S Watson)等。 类固醇. 2002年5月.

摘要

许多研究已经证明了类固醇受体的核形式及其活性,而很少有研究人员鉴定和描述这些受体的膜形式。我们对雌激素受体α(mER-alpha)的膜形式与其核对应物进行定性和定量比较的免疫识别方法现在允许我们解决关于这些受体形式的比较水平和调节的问题。ERα特异性反义寡核苷酸可消除mERα的表达,但仅轻度降低核ERα。mERα免疫识别的成功对不同的固定方案非常敏感,影响细胞通透性(从而区分细胞内形式)和差异表位保存。所有这些鉴定都必须附有细胞膜完整性和焦平面评估的证明。所选细胞上的mERα表达随着细胞传代数和细胞密度的增加而迅速下降。血清饥饿和细胞周期特定阶段的选择增强了mERα的表达。蛋白质的铰链区对配体诱导的表位掩蔽和受体介导反应中抗体诱导的变化敏感。响应性细胞通常在细胞群中因失去膜受体形式而被稀释。雌激素快速作用的双峰性,以及皮摩尔和纳米摩尔刺激浓度之间的抑制剂量,需要详细的剂量-反应曲线。最后,反应细胞可能会从分析中丢失,因为在雌激素治疗后,它们会迅速聚集起来,并留下附着在其上的底物。这些调节现象表明,雌激素受体的膜形式水平是非常动态的。

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