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.2000年1月7日;275(1):390-7.
doi:10.1074/jbc.275.1.390。

帕金森病相关α-突触核蛋白的组成性磷酸化

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帕金森病相关α-突触核蛋白的组成性磷酸化

M Okochi先生等。 生物化学杂志. .
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摘要

alpha-Synuclein与帕金森病的发病机制有关,因为罕见的常染色体显性突变与该病的早期发病有关,alpha-Sonuclein被发现是路易小体的主要成分。我们分析了转染细胞系中α-同核蛋白的表达。在脉冲相实验中,α-同核蛋白在长时间(t(1)/(2))54小时内似乎是稳定的,没有观察到内蛋白水解过程。α-Synuclein在人肾293细胞和大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞中被组成性磷酸化。在这两种细胞系中,磷酸化对磷酸酶高度敏感,因为冈田酸显著稳定了磷酸盐的掺入。磷氨基酸分析表明,磷酸化主要发生在丝氨酸上。通过定点突变,我们在α-同核蛋白的C末端结构域中的丝氨酸129处发现了一个主要的磷酸化位点。另一个磷酸化效率较低的位点被定位到丝氨酸87。主要磷酸化位点位于酪蛋白激酶1(CK-1)的一致识别序列中。体外实验和二维磷酸肽图谱进一步证明丝氨酸129被CK-1和CK-2磷酸化。此外,通过抑制CK-1或CK-2,丝氨酸129的磷酸化在体内降低。这些数据表明,α-突触核蛋白在其C末端组成性磷酸化,并可能表明α-突触核蛋白的功能受磷酸化/去磷酸化调节。

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