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.1999年10月22日;274(43):30349-52.
doi:10.1074/jbc.274.43.30349。

ERK2中一个细胞质抑制序列的鉴定

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ERK2中一个细胞质抑制序列的鉴定

H鲁宾菲尔德等。 生物化学杂志. .
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摘要

有丝分裂原活化蛋白激酶/细胞外信号反应激酶(ERK)级联信号机制中的一个关键步骤是其移位到细胞核中,在那里调节转录和其他核过程。为了表征ERK2的亚细胞定位,我们将其融合到表达绿色荧光蛋白(GFP)的基因的3'端,得到GFP-ERK2蛋白。该结构在CHO细胞中的表达导致GFP-ERK2蛋白的核定位。然而,GFP-ERK2与其上游激活物MEK1的共表达导致GFP-ERK1在细胞内滞留,这是其与MEK1结合的结果,并在刺激后逆转。然后我们研究了ERK2的C末端区域在其亚细胞定位中的作用。将GFP-ERK2的312-319残基替换为丙氨酸残基可以阻止ERK2在细胞内的滞留以及与MEK1的结合,而不会影响其活性。对细胞溶质保留最重要的是ERK2的316、319和320位的三种酸性氨基酸。321-327残基被丙氨酸取代后,ERK2在有丝分裂刺激下的核移位受损。因此,我们得出结论,ERK2的312-320残基负责其胞质滞留,321-327残基在ERK2核转位机制中发挥作用。

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